Аппарат для приготовления корн догов: Лучшие аппараты для приготовления корн-догов на 2021 год

Есть в наличии

Описание

Аппарат для приготовления корн-догов Enigma ICD-5 – специализированное термооборудование для приготовления сосисок в горячей хрустящей булочке с насечкой, напоминающей кукурузный початок. Устанавливается в кафе и бистро, в заведениях фаст-фуда, в палатках в зонах отдыха или в холлах развлекательных заведений: кинотеатров или цирка.

• автоматическая система поддержания выбранной температуры, включение нагрева при снижении температуры поверхности;
• две нагревательные поверхности из пищевого спецсплава, выкладка до 5 шт. булочек;
• аналоговая панель управления – поворотные ручки терморегулятора и таймера, две лампы-индикатора;
• термодатчик для блокировки работы при перегреве ТЭНа.

• конструкция корпуса – сталь коррозионностойкая;
• круглые ножки с эластичными накладками для надежной установки на поверхность;
• складывающаяся конструкция из нагревательных поверхностей с ручкой из атермичного пластика;
• высокий борт вокруг рабочей части для сбора крошек и жидкости.

Характеристики Аппарат для приготовления корн-догов Enigma ICD-5

Бренд:
Артикул:	258626
Артикул поставщика	105506
Длина	385 мм
Ширина	410 мм
Высота	320 мм
Страна	Китай
Производительность	5
Способ установки	настольный
Количество булочек	5 шт
Тип подключения	электрический
Количество сосисок	5 шт
Напряжение	220 В
Мощность	1. 5 кВт
Управление	электромеханическое
Материал корпуса	нержавеющая сталь
Масса	8 кг
Масса в упаковке	12 кг

Информация о технических характеристиках, комплект поставки, страну изготовления и внешний вид товара носит справочный характер и основывается на последних доступных сведениях от производителя

Похожие товары

Внимание! В связи с нестабильным курсом валют, просьба точную стоимость уточнять у менеджера!

ВРЕМЯ РАБОТЫ 09:00 – 18:00

Настольные аппараты для приготовления хот-догов, сосисок в тесте, корн-догов

Устройства для приготовления сосиски в тесте, яйце, на палочке

Вниманию посетителей нашего каталога представлено около десятка устройств для приготовления сосиски в тесте и на палочке, французских хот-догов и прочих подобных блюд. Настольные паровые приспособления характеризуются простотой и удобством использования. Они идеально подходят для установки в кафе, на торговой точке, в развлекательном месте. Допускается эксплуатация в домашних условиях. Характерные особенности приспособлений:

• надежные материалы изготовления;
• легкость обслуживания;
• высокая производительность;
• хорошие вкусовые качества блюд;
• низкое энергопотребление;
• длительный срок службы. 

Домашние и коммерческие аппараты для приготовления французских сосисок

Чтобы разобраться в специфике приготовления сосисок в тесте, яйце, на палочке, изучите описания аппаратов для хот-догов и корн-догов, размещенные на сайте нашей компании. Домашние и коммерческие устройства легко осваиваются, с ними справится даже неопытный человек. При возникновении вопросов обращайтесь к менеджерам «АльгоТрейд». Они расскажут об отличиях моделей для французских хот-догов, паровых сосисок в яйце и прочих настольных аппаратов из каталога.  

Настольные аппараты для хот-догов и корн-догов с паровой баней

Сосисочница galaxy электрическая | хотдоггер | аппарат для приготовления хот догов корн догов и сосисок в тесте

galaxy — хотдоггер сосисочница электрическая купить по цене со скидкой в городе Москва Вы можете на официальном сайте интернет магазина поставщика.

Сосисочница Galaxy «Хотдоггер»

Galaxy Hotdogger – аппарат для приготовления сочных и ароматных сосисок в тесте, хот догов и крон догов по оригинальному американскому рецепту. Аппарат прост в использовании и не занимает много места и оснащен непригораемыми панелями, которые заметно упростят процесс готовки сосисок.

Вы любите есть хот доги, но Вас смущает качество фаст фуда, продаваемого на улице?

При этом, приготовить даже одну порцию сосисок в тесте самому на плите- это так хлопотно и долго. А после, всю кухню буквально приходится драить от жира.

Воспользуйтесь сосисочницей Galaxy, которая сделает настоящие хот доги быстро и чисто.

Для того, чтобы приготовить 6 хот догов вручную Вы потратите уйму времени.

С Galaxy Hotdogger Вы справитесь с этой задачей всего за 7 минут, а Ваша кухня останется чистой.

Все предельно просто и экономично.

Просто заверните сосиску в тесто, положите ее внутрь хотдоггера и закройте крышку. Всего несколько минут и сосиски в тесте готовы. Сосиски получаются вкусными, горячими, а самое главное свежими, без масла и лишнего жира.

Радуйте своих детей и гостей вкусными домашними хот догами в новом исполнении.

Готовьте полезные блюда по собственным рецептам.

Благодаря тому, что Вы сами подбираете ингредиенты, домашние хот доги без опаски могут есть, как взрослые, так и дети.

Больше не нужно волноваться за качество и свежесть продуктов. Вы сами готовите тесто и покупаете любимые сосиски.

Создавайте собственные рецепты

Если вы любите экспериментировать и создавать необычные кушанья, займитесь творчеством. Сделайте горячие бутерброды с беконом и сыром или придумайте любую начинку для утренних тостов.

С помощью Хотдоггера Galaxy Вы сможете готовить не только хот доги, но и кучу других разнообразных блюд в новой, интересной форме:

• Мясные котлеты
• Сырники
• картофельные драники

Хотдоггер можно использовать в качестве контактного гриля и при готовить на нем мини-стейки, овощи-гриль или люля кебаб

Готовьте вкусные десерты.

Приготовьте сладкие пирожки, вафли или яблоко в карамели на палочке для своих детей. Используйте для начинки фрукты, варенье и даже шоколад.

С чудо-хотдоггером воплощайте самые необычные и смелые рецепты.

Сосисочницу очень легко использовать

Устройство имеет мощный нагревательный элемент и пластины с противопригарным покрытием, благодаря которому не нужно наливать много масла. Пища не пригорит и не получится пережаренной.

Датчики сети и нагрева позволят определить, когда прибор готов к работе.

Инструкция

• Включите прибор в сеть и подождите, пока формы для сосисок нагреются. Специальный индикатор подскажет когда можно залить тесто.
• Смажьте тонким слоем масла формы для сосисок
• Налейте в форму тесто
• Положите сосиски
• Сверху долейте еще немного теста
• Закройте крышку
• Время запекания 2-7 минут
• Чем тоньше тесто, тем меньше времени уйдет на запекание.
• За один раз Вы сможет приготовить сразу 6 порций

Технические характеристики:

• Мощность: 850 Вт
• Напряжение: 220-240 В, 50 Гц
• Количество отделений для готовки: 6
• Размеры: 240х90х260 мм
• Вес аппарата: 1600 г
• Гарантия: 12 месяцев

Преимущества:

• Готовьте хот доги, овощи гриль, мини стейки, пирожки, вафли с разнообразной начинкой
• Противопригарная поверхность позволит использовать минимум масла и не даст блюду пригореть
• Индикаторы подскажут когда прибор готов к работе
• За один Вы сможете приготовить сразу 6 порций

Информация для заказа
Заказать оригинальный товар:	http://tvshoponline. ru/product/sosisochnitsa-galaxy-hotdogger/
Акции:	спеццена для покупателей на сайте (акция действует до конца месяца)
Купоны на скидку:	Нет
Доставка по России:	Да
вафельница гриль сосисочница хотдоггер galaxy купить или заказать с доставкой Вы можете: в Москве (Мск) Санкт-Петербурге (Спб) Архангельске Астрахани Брянске Великом Новгороде Волгограде Волгодонске Воронеже Иваново Ижевске Казани Костроме Краснодаре Курске Липецке Магнитогорске Мурманске Набережных Челнах Нижнем Новгороде Оренбурге Орле Пензе Перми Петрозаводске Пскове Ростове-на-Дону Самаре Саратове Смоленске Ставрополе Сыктывкаре Тамбове Тольятти Тюмени Ульяновске Уфе Чебоксарах Ярославле Йошкар-Оле
Доставка за рубежом:	Нет
Доставка до двери:	Да
Предоплата:	Да
Оплата при получении:	Да
Безналичный расчет\оплата картой	Да
Гарантия:	Да

Купить аппарат для хот догов корн догов и сосисок в тесте с быстрой доставкой по городу Москва на официальном сайте производителя:

Осложненные переломы зубов у собак и кошек

Резюме

Переломы зубов — распространенная проблема в ветеринарии. И у собак, и у кошек эти переломы возникают у 10–20% всех домашних животных. Однако собаки, похоже, не только более склонны к получению таких травм, но и более подвержены большему количеству переломов зубов, чем их собратья из семейства кошачьих.

Переломы часто условно классифицируют как сложные или несложные. Из-за типичных различий в причинах, диагностике и лечении неосложненных переломов есть отдельная статья.

Травмы — типичная причина сложных переломов зубов. Источником травмы являются следующие:

• Тупая травма лица (например, когда домашние животные получают удар твердыми предметами во время дорожной травмы, спортивных соревнований или во время работы в полиции или в армии)

• Травма, связанная с жеванием (например, твердые игрушки, камни или другие предметы)

• Падение с высоты (чаще встречается у кошек)

• Грубая игра (в основном среди собак) и определенная тактика обучения (например, с рабочими собаками, участвующими в работе с укусами) )

Военные и полицейские служебные собаки особенно подвержены сложным переломам. Полные 25% этих собак в какой-то момент своей карьеры получат переломы. Большинство из них предположительно классифицируются как травматические, сложные переломы из-за их более высокого профиля риска.

У собак наиболее часто поражаются зубы верхних (верхних) клыков (их «клыки») и четвертых верхнечелюстных премоляров (два самых больших коренных зуба), расположенных по обе стороны от верхней челюсти.

Между тем у кошек часто случаются сложные переломы клыков. Как и у собак, переломы клыков верхней челюсти встречаются чаще, чем переломы клыков нижней челюсти.Кошки также могут страдать от сложных переломов в результате синдрома, называемого резорбцией кошачьих зубов, при котором у них спонтанно образуются большие полости на линии десен. Эти поражения предрасполагают зубы к переломам.

Сложные типы переломов зубов включают сложные переломы коронки, сложный перелом коронка-корень и переломы корня.

При сложных переломах полость зуба обнажается, а корень зуба поражается. Может возникнуть кровотечение и боль. Хроническая боль обычно является наиболее значительным эффектом.Открытие пульпы делает зубы восприимчивыми к серьезным инфекциям, некрозу пульпы (омертвевшей ткани) и болезненным абсцессам корней этих зубов.

Симптомы и идентификация

Клинические признаки переломов зубов не всегда так очевидны, как могли бы предположить владельцы домашних животных. Действительно, большинство собак и кошек не проявляют никаких внешних признаков боли даже после сложных переломов зубов. Большинству удается избежать обнаружения, либо жевая другой стороной рта, либо проглатывая пищу целиком.

Тем не менее, у некоторых домашних животных могут быть незаметные признаки того, что во рту что-то не так. Следующее может служить косвенным доказательством сложного перелома зуба:

• Менее обычный стиль питания (еда выпадает из миски)

• Наклонение головы во время еды (как если бы пытались пережевывать одну сторону рта) )

• Срыгивание пищи (неразжеванные кусочки появляются вскоре после еды)

Более того, владельцы, которые чистят зубы своих питомцев или иным образом могут исследовать их рты, могут заметить один или несколько из следующих признаков:

• Отсутствующий кусок зуба (владельцам рекомендуется сравнить его с таким же зубом на противоположной стороне рта)

• Изменение цвета части или всего зуба

• Видимая трещина на поверхности коронки зуба, особенно той, которая простирается до линии десен и за ее пределы.

Собаки и кошки, у которых сложные переломы зубов привели к абсцессу корня зуба, могут заметить припухлость на боковой стороне лица, а иногда даже открытые, сочащиеся язвы на лице (чаще всего под глазами).

Для окончательной диагностики сложных переломов, особенно переломов корня, требуется рентген зубов (всегда проводится под анестезией). Многие ветеринары общей практики теперь оснащены цифровыми стоматологическими рентгеновскими аппаратами, чтобы быстро оценить проблему.Без рентгена может быть невозможно полностью оценить степень повреждения зуба, классифицировать перелом и / или добиться правильного лечения.

Затронутые породы

Все породы собак и кошек могут иметь сложные переломы зубов. Однако некоторые породы могут быть предрасположены к определенным видам переломов из-за своего строения. Например, брахицефальные (короткоголовые, курносые) породы собак могут с большей вероятностью перенести переломы их более выступающих, чем типичных четвертых премоляров (особенно во время жевания).

Лечение

Лечение стоматологических переломов обычно зависит от их типа и серьезности, а также от времени, прошедшего между переломами и их обнаружением. Что касается рентгеновских лучей, то для этих процедур всегда требуется анестезия.

Когда обнажается пульпа, как это бывает с наиболее сложными переломами, у ветеринаров обычно есть только два варианта: удалить зуб или проработать корневой канал. Корневые каналы стремятся удалить пораженную пульпу и заменить ее специальным материалом перед установкой новой коронки, которая позволит зубу функционировать, как раньше.

Однако экстракция так же эффективна для облегчения боли вместе с источником инфекции. Хотя удаление зуба приводит к безвозвратной потере нормально функционирующего зуба, обычно это наиболее доступный вариант.

В некоторых случаях, когда трещина распространяется на корень, удаление является единственным вариантом. Но не все переломы корня требуют автоматического удаления. Если это не приведет к расшатыванию зуба или повреждению коронки, такой перелом может зажить сам по себе. Тем не менее, эти зубы необходимо часто делать рентгеном (не реже одного раза в шесть месяцев), чтобы быть уверенным, что они заживают правильно.

Для рассасывания зуба кошек также требуется удаление. Эти зубы не подлежат восстановлению.

Врачи общей практики обычно имеют все необходимое для удаления зубов, но немногие специалисты общего профиля практикуют выполнение корневых каналов. В таких случаях обычно рекомендуются сертифицированные ветеринарные стоматологи.

Ветеринарные расходы

Стоимость переломов зубов варьируется в зависимости от вида, типа перелома и выбранного лечения.

Осложненные переломы, требующие удаления, могут обойтись владельцу от 500 до 1000 долларов за большой зуб, если он удален врачом общей практики (значительно больше, если будет задействован сертифицированный стоматолог). Однако для кошек эта процедура может стоить значительно дешевле.

Корневые каналы у собак и кошек стоят примерно столько же, сколько у людей. Обычно это от 1500 до 3000 долларов и более. В частности, клык у крупной собаки может стоить очень дорого. В зависимости от географического положения установка корневого канала на этом зубе может стоить до 6000 долларов.

Профилактика

Профилактика переломов зубов требует от владельцев эффективных методов предотвращения травм. Безопасность, когда дело доходит до доступа к балконам и другим высоким местам (особенно для кошек) и транспортным средствам, конечно, является обязательной, но также необходимо использовать подходящие игрушки и игрушки и осторожный доступ на улицу, если поведение жевания камней является фактором. .

Для домашних животных в клетках следует проявлять осторожность, чтобы избегать использования определенных видов клеток или клеток, если собаки любят жевать решетку.(Это особенно характерно для тревожных собак, например, во время грозы.)

Резиновые пластмассовые игрушки обычно считаются безопасными. Копыта, рога и вареные кости коров считаются потенциально опасными, и их следует избегать. Спросите своего ветеринара о рекомендации.

Дрессировщики и дрессировщики рабочих собак должны избегать использования жестких тренажеров и сохранять бдительность в отношении признаков переломов, чтобы как можно скорее обратиться за помощью.

Список литературы

Американский ветеринарный стоматологический колледж.Ветеринарная стоматологическая номенклатура. Классификация переломов зубов. Доступно на http://www.avdc.org/. По состоянию на 30 апреля 2008 г.

Baumgartner JC, Hutter JW. Эндодонтическая микробиология и лечение инфекций. В: Cohen S, Burns RC eds. Пути пульпы. 8-е изд. Сент-Луис, Мо: Мосби, 2002; 501-520.

Голден А.Л., Столлер Н., Харви К.Э. Обследование заболеваний полости рта и зубов у собак под наркозом в ветеринарной больнице. J Am Anim Hosp Assoc 1982; 18: 891-899.

Harran-Ponce E, Holland R, Barreiro-Lois A, et al.Последствия перелома коронки при обнажении пульпы: гистопатологическая оценка у собак. Дент Травматол 2002; 18 (4): 196-205.

Holmstrom SE, Fitch PF, Eisner ER. Эндодонтия. В: Ветеринарные стоматологические методы для практикующих мелких животных. 3-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Сондерс, 2004; 339-414.

Kuntsi-Vaattovaara H, Verstraete FJ, Kass PH. Результаты лечения корневых каналов у собак: 127 случаев (1995-2000 гг.). J Am Vet Med Assoc 2002; 220 (6): 775-780.

Wiggs RB, Lobprise HB.Анатомия полости рта. В кн .: Ветеринарная стоматология: принципы и практика. Филадельфия, Пенсильвания: Lippincott-Raven, 1997; 55-86.

Какие овощи могут есть собаки? (19 нужно делать и 8 избегать)

Собаки, как и их предки-волки, нуждаются в высокобелковой диете. За столетия приручения и жизни с людьми собаки тоже полюбили некоторые овощи. Это не значит, что выложить салат перед Луной и закончить день! (И psst: , а не собаки должны быть веганами.) Некоторые овощи плохо перевариваются пищеварительной системой собаки.Другие содержат кислоты и химические соединения, которые негативно вступают в реакцию с системой собаки, потенциально приводя к повреждению органов и нервной системы. Пока вы придерживаетесь нашего списка овощей, которые могут есть собаки (и избегаете овощей, которые, как известно, токсичны для собак), ваша собака будет счастливым домашним животным с хорошо сбалансированной диетой.

Примечание: проконсультируйтесь с ветеринаром, прежде чем менять диету собаки или добавлять какие-либо из перечисленных ниже овощей.Вы также захотите узнать, как лучше всего приготовить эти овощи с учетом конкретных потребностей вашей собаки и избежать опасности удушья.

Зачем кормить собаку овощами?

По словам Бриджит Медоуз, главы отдела продуктов питания компании Ollie, компании, которая производит пищу для собак, пригодных для людей, кормить собак овощами безопасно, если вы убедитесь, что их диета содержит от 40 до 70 процентов белка.Белок может быть растительного происхождения (например, бобовых), но чаще всего идеальными формами белка являются мышечное мясо, субпродукты и яйца.

Бретт Подольски, соучредитель The Farmer’s Dog, службы, предлагающей сбалансированный, свежий корм для домашних животных, приготовленный из настоящих ингредиентов по простым рецептам, говорит, что дополнительные овощи не должны составлять более 10 процентов рациона собаки. Но эти 10 процентов могут добавить значительные питательные вещества, которых белки не могут предложить.

«Овощи [являются] отличным источником гидратации из-за высокого содержания воды», — говорит Подольский. «Они также могут предоставить вашей собаке набор витаминов, минералов, антиоксидантов, клетчатки и фитонутриентов, которые являются естественными соединениями, содержащимися в растениях и способными бороться с болезнями».

Конечно, количество овощей в рационе вашей собаки будет зависеть от уровня активности вашего щенка, возраста, породы, состояния здоровья и рекомендаций ветеринара.Например, ветеринар может порекомендовать заменить стандартные собачьи лакомства морковью и яблоком, если вашей собаке необходимо поддерживать более здоровый вес. И Олли, и «Собака фермера» включают овощи непосредственно в свои рецепты, что значительно упрощает вашу работу.

Подольский также отмечает, что исследования показали, что зеленые листовые овощи могут снизить риск рака у некоторых собак. Итак, если у вас есть порода, предрасположенная к раку, например, золотистый ретривер, неплохо было бы добавить эти овощи в рацион вашей собаки в виде закусок во время длительных прогулок или смешать с их любимым кормом.

Как и в случае любой здоровой диеты, ваша собака должна потреблять разнообразную пищу, чтобы поддерживать сбалансированное питание. И не применяйте человеческие рекомендации к своим собачьим друзьям! Хотя люди употребляют специи и приправы, они могут раздражать желудок вашей собаки. И хотя вы можете придерживаться веганской диеты и беззерновой диеты, собакам нужно много белков и здоровых злаков. На самом деле беззерновые диеты не подходят собакам.

19 Овощи, которые можно есть собакам

1. Капуста

Собаки определенно могут есть капусту, хотя это может вызвать реакцию с газом. Он содержит витамины B1, B6, C и K, не говоря уже о тоннах фитонутриентов. Эти антиоксиданты улучшают общее состояние здоровья собак и людей, которые их употребляют.Краснокочанная капуста также является безопасным выбором для владельцев пуховиков, которые хотят повысить уровень клетчатки, марганца, меди и калия в своих питомцах.

2. Морковь

ASPCA утверждает, что морковь является идеальной закуской для собак, потому что ее можно есть сырой, она низкокалорийна и не выделяет много газов (владельцы собак знают, что это может быть проблемой, особенно с некоторыми овощами).Морковь содержит витамины B, C, D, E и K, не говоря уже о большом количестве клетчатки.

3. Цветная капуста

Цветная капуста безопасна в небольших количествах. Как и другие крестоцветные овощи из нашего списка, он может вызывать неприятные газы. Лучше всего подавать слегка приготовленную на пару, цветная капуста содержит витамины B, C и K, а также жирные кислоты омега-3, которые очень полезны для иммунной системы.

4. Сельдерей

Такое ощущение, что сельдерей работает сверхурочно, чтобы приносить пользу нашим собакам. Богатый витаминами A, B и C, он делает все возможное, чтобы освежить дыхание вашей собаки. Витамин А помогает улучшить зрение вашей собаки. (Совет от профессионалов: хрустящие овощи помогают удалить зубной камень с зубов собаки!)

5.Огурцы

Идеально подходит для собак, которым необходимо поддерживать более здоровый вес, огурцы повышают энергию, но при этом имеют низкое количество калорий. По данным Американского клуба собаководства, собаки получают настой витаминов B1, C и K, когда они едят огурцы, не говоря уже о калий, меди, магнии и биотине.

6.Свекла

Многие корнеплоды полезны для здоровья шерсти и пищеварения у собак. Свекла добавляет в еду витамин С, клетчатку, фолиевую кислоту, марганец и калий. Они также могут помочь вашей собаке лучше усваивать другие питательные вещества.

7.Брокколи

Как и цветная капуста, брокколи может вызывать газы. Это может быть неприятным запахом для вас и невероятно дискомфортным для вашей собаки. При этом брокколи содержит витамины A, C, E и K, не говоря уже о тоннах клетчатки и почти без жира. Обязательно хорошо измельчите — стебли могут застрять вашей собаке в горле, если они будут слишком большими.

8.Брюссельская капуста

Брюссельская капуста повышает иммунитет (витамин C) и здоровье костей (витамин K). Кроме того, они содержат антиоксиданты, которые борются с воспалением. Постепенно вводите брюссельскую капусту в рацион вашей собаки, чтобы увидеть, как она приспосабливается, поскольку она также может вызывать газы.

9.Мускатная тыква

Если вашей собаке нужны продукты, богатые витаминами A, B6 и C, чтобы улучшить ее иммунную или сердечно-сосудистую систему, съешьте немного мускатной тыквы. В нем мало калорий, много питательных веществ (идеальное сочетание) и, как правило, он нежно воздействует на живот.

10.Зеленая фасоль

Еще один хрустящий овощ (когда подается в сыром виде)! Зеленые бобы также можно подавать на пару или в консервированном виде, если они простые и несоленые. Присоединяйтесь к своей собаке в перекусе из зеленой фасоли, потому что вы оба можете получить пользу от витаминов А, С и К, фолиевой кислоты и клетчатки.

11.Кале

Капуста капуста — суперпродукт не зря. Он известен своей способностью улучшать здоровье костей, зрение и иммунитет. Как? Витамины А и К, последний из которых является важным источником кальция. Кале также содержит железо — элемент, отвечающий за здоровые эритроциты и уровень кислорода в крови. В рецепт баранины Олли входят как мускатная тыква, так и капуста.

12. Пастернак

Пастернак — не первый овощ, о котором мы думаем, когда думаем о том, чтобы накормить нашу собаку новыми лакомствами. Но эти овощи полны фолиевой кислоты (полезной для нервной системы), калия и витаминов B6 и C.Если у вашей собаки проблемы с почками, подумайте о добавлении пастернака в ее рацион после консультации с ветеринаром.

13. Горох

Несколько кусочков горошка добавят небольшую дозу клетчатки и белка в рацион вашей собаки. Они необходимы, если ваша собака не может или не будет есть мясные продукты.Олли включает горох (и сладкий картофель) в свой рецепт говядины.

14. Перец

Удивительно, что сладкий перец еще не заменил апельсин в качестве символа витамина С. Эти овощи содержат в три раза больше витамина С, чем апельсины, и являются отличными низкокалорийными закусками для собак.Canine Journal предлагает готовить перец на пару, чтобы смягчить его кожицу, и тройную проверку, чтобы убедиться, что вы не кормите своего щенка острыми видами перца!

15. Картофель

Собаки определенно могут есть картошку, если она полностью приготовлена ​​и подается без начинки.(Картофель фри здесь не в счет.) Сырой картофель содержит большое количество соланина, который может быть токсичным, поэтому рекомендуется готовить картофель на пару и пюре или запекать перед тем, как подавать его собаке.

16. Тыква

Консервированная тыква лучше подходит для употребления в пищу вашей собаке, чем сырая тыква, так как она легче переваривается.Обязательно покупайте обычную консервированную тыкву, а не начинку для тыквенного пирога. Известно, что тыква помогает собакам бороться с запорами , , а ее бета-каротин может улучшить зрение. Тыквенные семечки можно кормить собак, если они не покрыты маслом, маслом или солью.

17. Сладкий картофель / ямс

Еще одна звезда в области улучшения пищеварения! Сладкий картофель содержит тонны клетчатки, не говоря уже о витаминах B6 (для здоровья мозга) и C.Как и морковь, сладкий картофель содержит бета-каротин, улучшающий зрение и кожу.

18. Шпинат

Шпинат, богатый железом и магнием, может стать отличным дополнением к рациону собак. Витамины A, C и E также делают этот листовой зеленый овощ победителем (к тому же он может бороться с раком, сердечно-сосудистыми заболеваниями и воспалениями).

19. Кабачки

Цукини обогащает кости, сердце и почки вашей собаки кальцием, витамином А и калием. Как и в случае с перцем, попробуйте приготовить на пару, чтобы смягчить кожицу (цуккини, как известно, сохраняет свою питательную ценность даже после приготовления, в отличие от некоторых овощей).

8 овощей, которых собакам следует избегать

1. Спаржа

AKC утверждает, что спаржа не токсична для собак, но не обладает достаточной пищевой ценностью, чтобы подавать ее им того стоило. Они также могут подавиться, если мясо не порезано или не приготовлено должным образом.

2. Кукуруза в початках

В то время как многие бренды сухих кормов для собак используют кукурузу в своих рецептах, кукуруза сама по себе не обладает пищевой ценностью для собак. Он не токсичен, он просто ничем не примечателен. Однако кукуруза в початках опасна.Для собак это большая опасность удушья, и им нельзя подвергать их ни при каких обстоятельствах.

3. Чеснок

Чеснок является частью семейства луковых и содержит тиосульфат, неорганическое соединение, которое отрицательно вступает в реакцию с организмом собак.Употребление чеснока может привести к анемии, вызывающей вялость, слабость и желтуху.

4. Лук-порей

Еще один член семейства луковых. Эти растения могут вызвать немедленную рвоту, диарею, тошноту и расстройство желудка. Если проглотить много, красные кровяные тельца собаки могут разорваться.

5. Грибы

Хотя грибы, которые мы покупаем в продуктовом магазине, безопасны для употребления, они обычно не нравятся собакам и не превосходят другие овощи по питательной ценности. Определенно следует избегать лесных грибов, так как многие из них ядовиты и могут вызвать внутренние повреждения и даже смерть.

6. Репчатый лук

Являясь частью семейства луковых, лук (и чеснок!) Ядовит для собак, и давать им запрещается. Если вы не уверены, проглотила ли ваша собака лук-порей, лук, чеснок или чеснок, обратите внимание на темно-желтую мочу, резкое снижение уровня энергии, необычный стул и рвоту.Немедленно позвоните ветеринару!

7. Ревень

Ревень содержит оксалаты — органическое соединение, которое может вызывать образование камней в почках или проблемы с нервной системой у собак. При употреблении в пищу в больших количествах ревень также может снизить количество кальция, присутствующего в костях вашей собаки, что нехорошо.

8. Помидоры

Спелый помидор? Не о чем беспокоиться — просто понаблюдайте за собакой на предмет признаков беспокойства. Незрелый помидор или листья и стебель томата? Токсично. Эти части помидора содержат соланин, который может вызвать вялость, спутанность сознания и рвоту.

Как приготовить овощи для собак

Опять же, нельзя просто шлепнуть салат перед Луной и закончить день! «У собак пищеварительный тракт короче, чем у людей, поэтому у них меньше времени, чтобы переваривать сырую пищу», — говорит Олли Мидоуз. «Осторожное приготовление овощей облегчит их переваривание и усвоение всех питательных веществ.”

Имейте в виду, что ваша собака может отвергнуть овощ, даже если он приготовлен, протерт, нарезан или смешан с обычным кормом. Хорошо. Овощи должны дополнять рацион собаки. Если ваша собака отворачивается от одного овоща, попробуйте другое! Если кажется, что ваша собака потеряла интерес к какой-либо пище или не будет придерживаться предписанной диеты, проконсультируйтесь с ветеринаром. Могут быть другие проблемы.

Некоторые породы более восприимчивы к расстройству желудка и желудочно-кишечным расстройствам, чем другие. Если у вас есть немецкий дог, акита или доберман, у вас могут возникнуть дополнительные проблемы с перевариванием новой пищи. Кроме того, у более крупных пород больше шансов развить вздутие живота, состояние, которое можно усугубить, если включить в свой рацион овощи семейства крестоцветных.

При кормлении собаки овощами соблюдайте следующие инструкции по подготовке:

Вводите медленно

«Добавляя новые продукты в рацион собаки, рекомендуется делать это медленно», — добавляет Медоуз.«Небольшое количество … может быть хорошим началом, при этом нужно следить за любыми побочными реакциями, такими как газы или диарея. Со временем вы можете увеличивать количество и разнообразие, пока не найдете оптимальный уровень для конкретных вкусов и пищеварения вашей собаки ».

Нарезка, нарезка или фарш

Обязательно подавайте собаке небольшие, легкие для пережевывания кусочки овощей.В противном случае вы можете случайно подавить своей собаке опасность удушья.

Подавать без добавок

Не обмазывайте овощи специями, маслами, соусами или чем-нибудь еще, что, по вашему мнению, сделает их «вкуснее» для вашей собаки. Людям может понадобиться приправа, чтобы посыпать кочан брокколи, а собакам — нет.Даже обжаривание овощей в масле или добавление соли может испортить питательную ценность овоща и даже навредить вашему щенку.

Пар

Приготовление овощей на пару без их полного погружения в воду смягчает их и облегчает их переваривание, глотание и переваривание вашей собаке.Он также сохраняет большинство питательных веществ, если вы не пережариваете его. Приготовление на пару также упрощает добавление овощей в знакомые продукты.

Бланш

Бланширование не только очищает овощи, но также усиливает вкус и помогает собакам пережевывать пищу.Опустите овощи в кипящую воду, а затем переместите их в ледяную воду, чтобы они не переварились. Вуаля!

Пюре

Овощное пюре очень легко воздействует на пищеварительный тракт собаки. Жесткие овощи, такие как тыква, морковь и цветная капуста, особенно если перед приготовлением пюре смягчить их на пару, они будут более вкусными для вашего щенка.Это также отличный способ объединить несколько овощей в один прием пищи, особенно если вы хотите обманом заставить собаку съесть болгарский перец (для витамина С), но она предпочитает тыкву. Соедините их в одном гладком блюде.

Если вы сомневаетесь, пройдите через службу питания для собак премиум-класса, такую ​​как Ollie или The Farmer’s Dog. Эти компании используют научный и ветеринарный опыт, чтобы определить лучшую диету для вашей собаки.Они принимают во внимание породу вашего питомца, уровень активности, возраст и многое другое, чтобы обеспечить ему наилучшую диету. Кроме того, они исключают догадки при приготовлении правильного соотношения белка и растений.

СВЯЗАННЫЕ: 24 редкие породы собак, о которых вы никогда не слышали до

Возможность интеграции обоняния собак с химическим и микробным профилированием мочи для выявления летального рака простаты

Abstract

Рак простаты — вторая ведущая причина смерти от рака у мужчин в развитом мире.Срочно необходима более чувствительная и специфическая стратегия выявления летального рака простаты, помимо скрининга сыворотки на специфический антиген простаты (ПСА). Диагностика по обонянию собак с использованием собак, обученных обнаруживать рак по запаху, оказалась специфичной и чувствительной. Хотя сами собаки в качестве масштабируемых диагностических датчиков непрактичны, машинное обоняние для обнаружения рака поддается тестированию. Однако исследования, устраняющие разрыв между методами клинической диагностики, искусственным интеллектом и молекулярным анализом, остаются сложными из-за значительного разрыва между этими дисциплинами.Мы проверили клиническую осуществимость междисциплинарного интегративного подхода к раннему биосенсорному анализу рака простаты в моче, используя обученную собачью обоняние, анализ летучих органических соединений (ЛОС) с помощью газовой хроматографии-масс-спектроскопии (ГХ-МС) искусственной нейронной сети (ИНС). вспомогательное обследование и микробное профилирование в двойном слепом пилотном исследовании. Две собаки были обучены обнаруживать рак простаты по шкале Глисона 9 в моче, взятой у пациентов, подтвержденных биопсией. Для оценки специфичности собак как биодетекторов рака простаты использовались контроли с отрицательной биопсией.Образцы мочи одновременно анализировали на содержание ЛОС в свободном пространстве с помощью ГХ-МС и на содержание микробиоты мочи с помощью секвенирования 16S рДНК Illumina. Кроме того, диагнозы собак использовались для обучения ИНС обнаружению значительных пиков в данных ГХ-МС. Система обоняния собак была чувствительна на 71% и специфична на 70–76% при обнаружении рака простаты по шкале Глисона 9. Мы также подтвердили различия ЛОС с помощью ГХ-МС и различия микробиоты с помощью секвенирования 16S рДНК между контролем с положительным и отрицательным биопсией.Кроме того, обученная ИНС определила интересующие области в данных ГХ-МС на основе диагнозов собак. Установлены методология и осуществимость для информирования крупномасштабных исследований с использованием обоняния собак, ЛОС в моче и профилирования микробиоты мочи для разработки инструментов машинной диагностики обоняния. Затем масштабируемые междисциплинарные инструменты можно сравнить со скринингом на ПСА для более раннего, неинвазивного, более специфичного и чувствительного выявления клинически агрессивного рака простаты в образцах мочи.

Образец цитирования: Guest C, Harris R, Sfanos KS, Shrestha E, Partin AW, Trock B, et al. (2021) Возможность интеграции обоняния собак с химическим и микробным профилированием мочи для выявления летального рака простаты. PLoS ONE 16 (2): e0245530. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245530

Редактор: Зоран Кулиг, Медицинский университет Инсбрука, АВСТРИЯ

Поступила: 19 августа 2020 г .; Одобрена: 2 января 2021 г .; Опубликовано: 17 февраля 2021 г.

Авторские права: © 2021 Guest et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в рукописи и ее файлах с вспомогательной информацией.

Финансирование: Эта работа финансировалась грантом Фонда рака простаты (18PILO02), полученным CG, AM и KS. PCF частично поддерживал заработную плату авторов CG, RH, PMS, AM, а также участвовал в разработке исследования и подготовке рукописи, но не участвовал в сборе и анализе данных или принятии решения о публикации.Национальный институт рака при Национальных институтах здоровья предоставил поддержку WYL и QG (номер награды SC1CA245675). Imagination Engines, Inc. предоставила поддержку в виде заработной платы ST. NCI NIH и Imagination Engines, Inc. сыграли роль в разработке, анализе, решении опубликовать и подготовке рукописи исследования. Конкретные роли этих авторов сформулированы в разделе «Авторский вклад».

Конкурирующие интересы: Авторы ознакомились с политикой журнала и имеют следующие конкурирующие интересы: ST — оплачиваемый сотрудник Imagination Engines, Inc.Это не влияет на нашу приверженность политике PLOS ONE в отношении обмена данными и материалами. Нет никаких патентов, продуктов в разработке или продаваемых продуктов, связанных с этим исследованием, которые можно было бы декларировать.

Введение

Рак предстательной железы является ведущим видом рака, не связанным с кожей, в США, вторым по распространенности во всем мире и обогнал рак груди по общему количеству смертей в Великобритании. Примерно у 1 из 9 мужчин в какой-то момент жизни будет диагностирован рак простаты.Раннее выявление биомаркеров рака простаты было спорным, поскольку широко используемый скрининговый тест на простатоспецифический антиген (ПСА) может пропустить клинически значимый рак у мужчин с нормальным уровнем ПСА, может поставить избыточный диагноз у мужчин с клинически незначимым раком и ошибочно выявлять доброкачественные состояния, такие как как доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ДГПЖ) и простатит [1]. Существует острая потребность в неинвазивных, более чувствительных и специфических диагностических технологиях. В частности, необходим инструмент диагностики рака простаты, позволяющий дифференцировать потенциально смертельный рак высокой степени злокачественности с метастатическим потенциалом от вялотекущего рака низкой степени злокачественности, от которого пациенты могли бы умереть, а не от него.

Одним из потенциальных методов улучшения диагностики рака простаты, которому уделяется повышенное внимание, является обоняние у собак. За последние три десятилетия было показано, что обученные собаки способны обнаруживать различные заболевания человека, включая многие типы рака, по запаху [2]. Есть также несколько опубликованных отчетов о случаях, когда необученные собаки спонтанно проявляли интерес к раку кожи у своих владельцев. В 1989 году Уильямс и Пембрук написали о пациентке, собака которой постоянно нюхала родинку на ее ноге.Чрезмерный интерес собаки к родинке побудил пациента посетить клинициста, который определил родинку как злокачественную меланому [3]. В 2001 году Чёрч и Уильямс сообщили о человеке, собака которого постоянно обнюхивала пятно экземы на его ноге, которое после удаления оказалось базально-клеточной карциномой [4]. В 2013 году Кэмпбелл и др. описал случай, когда собака мужчины настойчиво вылизала рану за его правым ухом, которая позже была подтверждена как злокачественная меланома [5]. В каждом из этих случаев собака, по-видимому, могла обнаружить интересующий сигнал в запахе, исходящем от кожи вблизи пораженного участка.Это предположение было подтверждено собакой, обученной обнаруживать меланому [6]. После того, как в 2004 г. было опубликовано доказательное исследование рака мочевого пузыря [7], в литературе появляется все больше исследований, изучающих способность обученных собак точно обнаруживать рак. К ним относятся исследования по выявлению рака легких, груди, яичников, мочевого пузыря и простаты [8–17]. В 2015 году Taverna et al. опубликовал основную статью об обнаружении у собак рака простаты по моче [18].Это исследование включало 362 случая и 540 здоровых людей в контрольной группе со средней чувствительностью (2 собаки) 99% и средней специфичностью (2 собаки) 98%. Эти данные подтверждают предположение о том, что обонятельное обнаружение рака простаты обещает быструю и неинвазивную диагностику.

Учитывая ограниченную доступность обученных собак, в настоящем исследовании мы начинаем изучать, что собаки могут обнаруживать, и может ли искусственная нейронная сеть (ИНС), потенциально развернутая в сочетании с машинным обонянием, быть инструментами для воспроизведения раннего обнаружения собак. возможности.Предыдущие исследования спрашивали, представлен ли запах рака в моче одним или набором конкретных летучих органических соединений (ЛОС), многие из которых вызывают обонятельную реакцию (т.е. являются «пахучими веществами»). Аналогичным образом, мочевой «летучесть» (набор летучих метаболитов, а также других присутствующих летучих органических и неорганических соединений) также показал себя многообещающим в диагностике рака простаты. В недавней статье Lima et al., Анализ ЛОС в моче выявил случаи рака простаты с чувствительностью 78% и специфичностью 94% [19].Микробиом мочи также способствует производству ЛОС [20], поэтому разумно спросить, дает ли интегративный подход преимущества. Однако анализ ЛОС с помощью газовой или жидкостной хроматографии (ГХ или ЖХ) в сочетании с масс-спектрометрией (МС) или другими аналитическими методами, основанными на идентификации соединений, по-прежнему имеет значительные ограничения, поскольку характерный запах рака может зависеть от комбинаторной смеси в пространстве восприятия [ 21] в отличие от какого-либо конкретного набора отдельных запахов (как в случае с некоторыми ароматами [22]), что усложняет стандартизацию, масштабирование и практическое применение.Дополнительные проблемы с химической аналитикой включают трудность доступа к дорогостоящему оборудованию с непостоянной производительностью.

Ограничения современных методов диагностики и анализа молекулярных летучих органических соединений с помощью газовой хроматографии-масс-спектроскопии (ГХ-МС) заставили нас задуматься, может ли интеграция многопараметрического подхода 1) привести к лучшей диагностике, 2) к лучшему пониманию лежащих в основе патология болезни, и 3) освещают путь к скринингу мочи и диагностике на основе машинного обоняния, которым также уделяется все больше внимания [23].Вместо того, чтобы полагаться исключительно на один метод (обнаружение собак, летучесть, профилирование микробиоты мочи) для повышения диагностической эффективности, в этом пилотном исследовании мы стремились объединить сильные стороны каждого из них, чтобы по-новому взглянуть на то, как можно сделать дальнейшие интегративные диагностические разработки. Для этого мы одновременно отправили образцы мочи пациентов с подтвержденным биопсией раком простаты или без него для обнаружения с помощью обученного обоняния собак, идентификации ЛОС с помощью ГХ-МС и профилирования микробиоты. Мы дополнительно обучили ИНС работе с данными ГХ-МС, используя собачьи диагнозы.Насколько нам известно, это первое исследование, в котором анализируются ЛОС в моче и микробные популяции в одних и тех же образцах мочи. Наши результаты показывают осуществимость и характеризуют проблемы, которые необходимо преодолеть в рамках междисциплинарного подхода к диагностике рака простаты с использованием летучих органических соединений в моче, и указывают на разработку практической диагностики на основе машинного обоняния.

Материалы и методы

План эксперимента и дизайн исследования показаны на рис. 1. Подробное описание помещений для дрессировки животных и протокол дрессировки собак представлены в разделе «Методы S1».

Рис. 1. Схема исследования рабочего процесса для анализа проб мочи.

Образцы мочи субъектов с диагнозом «рак предстательной железы по Глисону 9» или контрольные образцы с отрицательной биопсией были собраны, и аликвоты от каждого субъекта были отправлены на анализ по обонянию собак в компанию Medical Detection Dogs (MDD) в Великобритании, GC-MS Массачусетского технологического института (MIT) и Техасский университет в Эль-Пасо (UTEP) в США, а также анализ профилей микробиоты Университетом Джона Хопкинса (JHU) в США.* Два контрольных образца были зарезервированы в качестве дополнительных при необходимости для испытания.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245530.g001

Сбор образцов мочи и характеристики пациентов

образцов мочи, полученных из США (США), которые использовались в заключительном дрессировке собак, а также во всех ГХ-МС и тестах на собаках, были получены в соответствии с протоколом, одобренным Советом по обзору медицинских учреждений (IRB) Университета Джона Хопкинса с письменного информированного согласия. Для раннего обучения и тестирования на собаках образцы британского происхождения были собраны у участников, определенных членом клинической группы, который предоставил им устное объяснение и информационный лист с описанием исследования.Затем участники предоставили устное информированное согласие, подтвержденное подписанной формой согласия и заполненной анкетой о состоянии здоровья. Образцы мочи JHU были собраны у мужчин, перенесших биопсию простаты в больнице Джона Хопкинса с подозрением на рак простаты. Мужчинам либо делали первую биопсию простаты, либо не делали биопсию более 1 года до взятия пробы мочи. Таблица 1 содержит клинические и патологические данные мужчин, включенных в исследование. Образцы чистой уловленной мочи были получены и отправлены на обработку в течение 4 часов после сбора.Необработанную мочу разделяли на аликвоты по 3 мл и хранили при -80 ° C до использования в этом исследовании. Аликвоты использовали для исследований обоняния собак и для ГХ-МС. Оставшиеся 30 мл образца мочи осаждали центрифугированием при 1000 g в течение 10 минут и хранили при -80 ° C. Гранулы мочи использовали для анализа микробиоты мочи. Подробные сведения об образцах мочи и их использовании в анализах приведены в таблице S1.

Животные

Дрессировка собак проводилась в клинике Medical Detection Dogs (MDD), Великобритания (https: // www.medicaldetectiondogs.org.uk). Две собаки были отобраны из шести имеющихся собак для участия в этом испытании после тщательного отбора. Двумя собаками, выбранными для участия в испытании, были Флорин, 4-летняя сука лабрадора, и Мидас, 7-летняя сука жесткошерстной венгерской Визслы (рис. 2А). Каждую собаку предварительно обучили работе с одним источником (положительным) образцом рака простаты (6–9 по шкале Глисона, стадии T1-T4) и контрольным неканцерогенным (отрицательным) образцом из больницы Университета Милтон-Кейнс (MKUH) в период с ноября 2015 года по сентябрь. 2018.Обучение с использованием образцов, предоставленных JHU, началось в октябре 2018 года. Подробная информация о результатах обучения собак приведена в таблице S2.

Рис. 2. Схема исследования обоняния собак.

(A) Две собаки, Флорин и Мидас, отобраны для участия в испытании. (B) Изображение презентационных горшков. (C) Тестовые горшки помещают в металлический рычаг, прикрепленный к карусели. (D) Сравнение показаний к биопсии-отрицательному контролю и образцам рака в двойном слепом исследовании. Эта таблица показывает, что из 21 контрольного образца Флорин дал 5 ложноположительных показаний, в результате чего получилось 76.Специфичность 2% по сравнению с 6 ложноположительными показаниями Мидаса, что дает 70% специфичность. Обе собаки правильно указали 5 из 7 целевых образцов, что дало чувствительность 71,4.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245530.g002

Хранение и подготовка образцов для обоняния собак

Замороженные образцы мочи были отправлены в MDD из JHU через курьерскую службу биологических проб Biocaire на сухом льду, при постоянном мониторинге температуры, указывающем на отсутствие значительных колебаний температуры, и по прибытии были отправлены через таможню в сохраненном состоянии.После извлечения из упаковки все детали образца были сверены с предоставленным списком запасов и немедленно перенесены в морозильную камеру -80 ° C.

За раз отбирали по одному образцу и встряхивали в течение десяти секунд перед открытием. 1 мл мочи пациента переливали в стеклянный флакон объемом 1,75 мл. По завершении каждый стеклянный флакон, содержащий аликвоту 1 мл, был помечен анонимным кодом, прилагаемым к образцу, с использованием перманентного маркера. Все аликвоты одного и того же кода хранили в одном пакете с застежкой-молнией при -80 ° C.Сумка с замком на молнии также была помечена анонимным кодом с помощью перманентного маркера. Все обучающие и тестовые образцы были подготовлены в соответствии с этим протоколом.

Образцы были отобраны и разморожены в день тренировки и помещены в холодильник не более чем на 1 час перед подготовкой к тренировочному протоколу. Все время соблюдалась установленная стандартная рабочая процедура MDD для контроля перекрестного заражения (см. Методы S1).

Подготовка проб для исследования слепым методом

Образцы мочи были анонимизированы и скрыты от MDD с подробной информацией о том, какие образцы должны были использоваться для двойного слепого тестирования.Мы также получили электронный файл от доктора Стива Моранта, консультанта по статистике, Университет Данди, и Лесли Мангольда, менеджера по исследованиям, JHU, содержащий необходимые образцы, слепленные в установленном порядке для контакта с собаками во время испытания. В каждый прогон были включены один образец рака и три контрольных образца с отрицательной биопсией.

В день испытания каждый образец был выбран из слепого списка и подготовлен для тестирования в соответствии с ранее описанным протоколом. Соответствующие образцы были взяты из морозильной камеры и разморожены до жидкого состояния.В жидком состоянии горшки и аликвоту помещали в холодильник для стабилизации минимум на десять минут перед использованием. Когда образец был готов к испытанию, его извлекали из холодильника, переливали в соответствующий стеклянный сосуд для презентаций и закрывали металлической крышкой. Его оставили на десять минут перед использованием. Для тестирования крышка была снята, и каждый тестовый горшок был помещен в металлический рычаг, прикрепленный к карусели (рис. 2B и 2C), в соответствии с заданной слепой рандомизацией.После предъявления собаке образец вынимали из карусели и снова закрывали соответствующей крышкой до тех пор, пока он не потребовался снова или не был возвращен в морозильную камеру для будущего использования или хранения.

В начале пробной сессии была запущена камера видеонаблюдения с записью DVD. Снова соблюдали стандартную рабочую процедуру MDD для контроля перекрестного загрязнения.

Протокол проведения биодетекции собак

В начале каждого сеанса выполнялось несколько прогонов для разминки.Они состояли из одинарных слепых прогонов, включающих образцы, отобранные из обучающей группы, чтобы подготовить собак к работе и убедить специалиста проекта в том, что собаки готовы к завершению пробных сеансов. Затем были подготовлены пробные образцы в соответствии с указанным выше разделом о хранении и приготовлении образцов.

Испытанием руководили два члена обучающей группы: техник по биодетекции, координировавший испытание, и специалист проекта. Также присутствовал руководитель исследования рака.Когда тест был готов к запуску, специалиста вызвали в комнату с собакой. Специалист встал за щит и поручил собаке поискать. Собака подошла к карусели в первой позиции и продолжила движение против часовой стрелки, по очереди обнюхивая каждую позицию (фильм S1). Если образец был «указан» собакой (например, собака указала, что образец содержал рак простаты, см. Фильм S1), специалист подавал сигнал технику, координирующему тест, используя скрытый от собаки сигнал рукой, что это « называется».Флорин указывает образец, стоя и глядя на образец, тогда как Мидас сидит перед образцом. Техник сверился с базой данных, которая дала ответ, и он был отображен на двойном мониторе, чтобы специалист мог его увидеть. Если все правильно, отображается зеленая галочка, и собака была вознаграждена соответствующим образом. В случае ошибки был отображен красный крестик, и собака была отозвана из выборки. Если правильный ответ на тестовый запуск был «вызван», запуск считался завершенным. Специалист и собака вышли из комнаты.Образцы были извлечены, запечатаны и сохранены в холодильнике или морозильной камере в соответствии с требованиями дальнейших опытов. Если «вызов» был неправильным, образец удалялся из строки, заменялся пробелом, и собаке предлагалось выполнить поиск. Если был сделан второй неправильный «вызов», запуск считался завершенным. Никаких дальнейших поисков во время этого испытания с этим конкретным набором образцов не проводилось. В любое время на этапе тестирования специалист может вызвать калибровочный прогон, состоящий из образцов, отобранных и представленных из обучающей группы, если будет сочтено, что собака потеряла равновесие.

Все прогоны продолжались таким же образом, пока испытание не было завершено. Когда цикл был завершен и результат был известен, образцы использовались специалистом для калибровки новых прогонов. Это позволило нам использовать относительно новые образцы для подготовки собак к новому тесту. В случае прогонов, в которых было принято неправильное решение (ложное срабатывание более одного раза), специалист не мог использовать трос для предварительной дрессировки собак, поскольку личность положительного образца в серии не была известна.

Статистические методы, исследование обоняния собак

Мы вычислили биномиальные вероятности наблюдаемых показателей успеха при отборе положительных образцов, которые были представлены в наборах по четыре, но каждый образец требовал решения «да / нет» на основе нулевой гипотезы о том, что выбор был случайным.

Сбор и анализ данных ГХ-МС

сочетали с твердофазной микроэкстракцией в свободном пространстве (HS-SPME) для анализа образцов мочи, полученных от пациентов с раком простаты и контрольных образцов с отрицательной биопсией.Замороженные образцы обрабатывали так же, как описано выше в разделе о собаках, включая анонимное кодирование. После размораживания до комнатной температуры образцы переносили с помощью пипетки во флаконы с свободным пространством над продуктом (Restek, Bellefonte, PA). Летучие вещества были извлечены из свободного пространства мочи с помощью стрелок SPME с широким диапазоном углерода (Restek). Для облегчения уравновешивания сборку стрелки в виде флакона с ТФМЭ осторожно перемешивали при 172 об / мин и 80 ° C в течение 30 минут.

Волокно со стрелкой SPME было термически десорбировано в инжекторе системы 6890 GC, соединенной с масс-спектрометром 5973 (Agilent Technologies, Пало-Альто, Калифорния).Инжектор использовали с разделенным соотношением 2: 1 и разделенным потоком 2,0 мл / мин при 300 ° C. Для разделения ГХ использовали колонку Zebron ^TM ZB-624 (30 м x 0,32 мм x 1,80 мм, 5% цианопропилфенил-94% диметилполисилоксан, Phenomenex, Торранс, Калифорния), и поток газа-носителя поддерживали на уровне 1 мл / мин. Программа печи была следующей: начальная температура 40 ° C в течение 1,0 минуты, линейное изменение 10 ° C / мин до 300 ° C и изотермическое значение 300 ° C в течение 10 минут. Температура линии передачи МС поддерживалась на уровне 240 ° C, и спектры МС записывали в режиме сканирования от m / z (отношение массы к заряду) 35–500.Данные ГХ-МС анализировали с помощью программного обеспечения Agilent MSD ChemStation (E.02.02.1431) в сочетании с программным обеспечением с открытым исходным кодом MZmine 2. Условия свободного пространства, ГХ и МС приведены в таблице S3.

Все обнаруженные пики сравнивали с масс-спектральной библиотекой NIST EPA / NIH 2017 года с использованием программы масс-спектрального поиска NIST (v2.3, Национальный институт стандартов и технологий) и автоматизированной системы масс-спектральной деконволюции и идентификации (AMDIS; v2.70). , Национальный институт стандартов и технологий).Масс-спектральный поиск производит совпадения с коэффициентом совпадения, который описывает качество совпадения. Идеальное совпадение дает значение 999; спектры без общих пиков приводят к значению 0. Как правило, 900 или выше — отличное совпадение; 800–900, хорошее совпадение; 700–800, честный матч. Менее 600 — плохой выбор. Однако неизвестные спектры с большим количеством пиков будут иметь тенденцию давать более низкие коэффициенты совпадения, чем аналогичные спектры с меньшим количеством пиков. Дополнительные рассматриваемые факторы идентификации включают количество ионов в измеренном масс-спектре, независимо от того, являются ли характеристические ионы (напримерграмм. молекулярные ионы), и количество одинаковых совпадений библиотеки NIST присутствует.

Для каждого пика сообщается только лучшее соответствие библиотеки. Это соответствие библиотеки не следует рассматривать как окончательное определение неизвестного пика. Указанные здесь совпадения не могут быть гарантированы, даже если качество совпадения высокое, без дополнительных работ, включая использование идентичного эталонного соединения в тех же условиях.

Статистические методы, ГХ-МС

В образцах мочи было обнаружено более 1157 различных ЛОС, что привело к проблеме многомерного моделирования.Чтобы упростить анализ, мы сначала удалили летучие органические соединения, которые наблюдались менее чем у 3% всего населения. Остальные переменные были проверены путем тестирования разницы в каждом ЛОС между контрольной группой с положительной и отрицательной биопсией. Был использован критерий суммы рангов Вилкоксона, поскольку он позволяет учесть нулевую инфляцию среди многих летучих органических соединений. Тепловые карты были созданы для визуализации этих значимых летучих органических соединений (p <0,05) в группах рака простаты и отрицательной биопсии.

Применение либерального отсечения 0.2 к p-значениям, более 29 летучих органических соединений осталось для разработки модели. Мы подобрали модели регуляризованной логистической регрессии со штрафом SIS, и 10-кратная перекрестная проверка была использована для выбора оптимального параметра настройки [24]. Затем окончательная логистическая модель была оценена с помощью кривой рабочих характеристик приемника (ROC) и других показателей эффективности на основе прогноза складного ножа [25], что помогает снизить чрезмерный оптимизм, вызванный выбором переменных. Кроме того, подход Ферта был использован для соответствия окончательной логистической модели, чтобы добиться снижения систематической ошибки для сценария небольшой выборки и справиться с почти полным разделением, наблюдаемым в данных [26].Все статистические анализы выполняются с использованием программного обеспечения для статистических вычислений с открытым исходным кодом R [27].

Профилирование микробиоты мочи и анализ данных

экстрагировали из образцов осадка мочи (12 образцов рака Глисона 9, 38 отрицательных контрольных образцов при биопсии) и шести пустых отрицательных контролей экстракции, как описано ранее [28]. библиотеки генов 16S рДНК были получены и представлены в SKCCC Next Generation Sequencing Ядро на Джон Хопкинс для следующего поколения секвенирования на приборе Illumina HiSeq, как описано ранее [28].Необработанные считывания с парным концом были объединены в согласованные последовательности с использованием FLASH, требующего минимального перекрытия 20 п.н. и максимальной плотности несоответствия 5%, а затем отфильтрованы по качеству (нацеленность на частоту ошибок <0,1%) и длине (минимум 60 п.о.) с помощью Trimmomatic и ЦИЙМЭ [29]. Проходящие последовательности затем отрезали от праймеров, оценивали на предмет химер с помощью UCLUST [30] (режим de novo ) и фильтровали на предмет ассоциированных с хозяином примесей, используя поиск Bowtie2 [31] в NCBI Homo sapiens Annotation Release 106.Дополнительно хлоропластные и митохондриальные загрязнители были обнаружены и отфильтрованы с использованием классификатора RDP с порогом достоверности 50%. Затем высококачественные чистые последовательности 16S (80 000 последовательностей на образец) были подвергнуты таксономической оценке с высоким разрешением с помощью Resphera Insight [32–34]. Один контрольный образец не имел достаточного количества считываний секвенирования для продолжения, поэтому окончательный анализ был проведен на 12 образцах рака и 37 контрольных образцах с отрицательной биопсией.

Удаление загрязняющих веществ проводилось в три этапа.На первом этапе были определены последовательности потенциальных загрязняющих веществ на основе количества в отрицательных контролях, как описано ранее [28]. На следующем этапе оценивалась корреляция копейщика (корреляция> 0,30) с 10 видами загрязнителей-индикаторов. Наконец, мы выполнили общее удаление общих родов загрязнителей (таблица S4). Каждый образец был нормализован с помощью разрежения до 2700 чистых последовательностей на образец. Анализ бета-разнообразия, включая вычисление расстояний Брея-Кертиса и UniFrac, а также анализ основных координат (PCoA), был выполнен в QIIME.Сравнительный статистический анализ дифференциальной численности был проведен с использованием U-критерия Манна-Уитни.

Обучение нейронной сети

Мы обучили ИНС имитировать диагностику рака у собак по образцам мочи на основе представленных ей данных ГХ-МС. Мы использовали как скелетирование сети [35–37], так и автоассоциативную фильтрацию [38] с последующим обнаружением аномалий. Затем к этой сети были применены методы извлечения правил [35–37], чтобы выявить «логические схемы», разработанные в ней посредством как обучения, так и выборочного отсечения ее весов связей.Используя этот полуколичественный метод, стали очевидными основные входные данные для модели, а также взаимодействие между ними при определении прогноза ИНС диагноза собаки. В общем, этот подход включает обучение сетевой модели, определяющей доминирующие трассы соединений, соединяющие интересующие выходы с входными узлами сети, от которых они наиболее функционально зависят. Анализ продолжается в обратном направлении от слоя выходных весов ИНС, отсекая менее значимые веса, чтобы открыть наиболее заметный соединительный путь к скрытому слою ИНС и наиболее важным узлам этого слоя.Этот процесс повторяется, начиная с этого узла и прорабатывая последовательные слои сети до достижения входного слоя, где наиболее значимые веса указывают на критические факторы, относящиеся к выбранному выходу. Учитывая относительно небольшое количество доступных обучающих примеров, мы обучили предварительную сеть и скелетонировали ее таким образом. Результирующая обрезка веса показала, что наиболее важные пики ГХ-МС приходятся на интервал от 10 до 14 минут. Соответственно, мы удалили данные за пределами этого диапазона времен удерживания, тем самым уменьшив размер входного слоя с почти 9000 до 205 точек.Выбранная нейронная сеть представляла собой полностью связанный многослойный перцептрон (MLP), нейроны которого использовали сигмовидные передаточные функции. Эта сеть была обучена с использованием коммерческого продукта под названием PatternMaster ^TM , который имеет интерфейс виртуальной реальности, который облегчает процесс извлечения правил, позволяя пользователям «летать» по сети, чтобы выбрать интересующие сетевые узлы, а затем постепенно удалять мостовые веса соединений. их. Входные узлы в эту сеть представляли содержания в данных ГХ-МС при временах удерживания в диапазоне от 10 до 14 минут, всего 205 точек данных.Два выходных узла сети представляли положительные и отрицательные оповещения о раке с указанием собак. Было выбрано минимальное количество узлов скрытого слоя, всего 32, не для достижения оптимальной точности предсказания, а для того, чтобы избежать запоминания и облегчить графическую скелетизацию сети для выявления доминирующих связей.

Все данные ГХ-МС, всего 808 экземпляров, были нормализованы до диапазона [0, 1] с использованием минимального и максимального значений данных. Обучение обратному распространению продолжается со скоростью обучения 0.1, и импульс 0,03, со случайным порядковым перетасовкой данных, происходящим с каждой эпохой обучения, чтобы избежать локальных эффектов обучения. Предел шкалы был установлен на 0,1. Сеть была обучена со среднеквадратичной ошибкой (RMS) 0,15, что, вероятно, является минимальной ошибкой, достижимой с этим ограниченным набором весов соединений.

Результаты

Обнаружение рака простаты в образцах мочи по обонянию собак

Образцы мочи, собранные в JHU, были отправлены в MDD, Великобритания (рис. 1). Две собаки, Мидас и Флорин, были ранее тщательно обучены обнаружению рака простаты и были повторно откалиброваны на тестовом наборе мочи (5 случаев рака, 15 отрицательных результатов биопсии) из JHU до начала пилотного испытания (см. Таблицу S2 и S1. Методы).Затем было проведено двойное слепое пилотное исследование с дополнительными 7 образцами рака и 21 контрольным образцом с отрицательной биопсией. На рис. 2D показаны обобщенные результаты испытания, а в таблице 2 представлены индивидуальные результаты. Флорин правильно идентифицировал 16 из 21 представленных контрольных образцов с отрицательной биопсией как отрицательные на рак простаты (специфичность 76,2%), в то время как Мидас правильно идентифицировал 14 из 20 представленных контрольных образцов с отрицательной биопсией (специфичность 70%). Обе собаки правильно указали 5 из 7 образцов рака простаты по Глисону 9, что дало 71.Чувствительность 4%.

Мы заметили, что протокол обучения собак оказал большое влияние на их способность правильно идентифицировать образцы, что согласуется с предыдущими исследованиями [39]. Обе собаки были подготовлены к фазе двойного слепого тестирования в течение двухнедельного предтренировочного периода с использованием системы принудительного выбора положительного смещения, где каждая линия содержала положительный образец рака, а подкрепление было сильно смещено в сторону указания положительного образца рака (например, собаки были вознаграждены только в том случае, если они указали положительный образец).В отличие от традиционного принудительного выбора, система вознаграждения за положительную предвзятость позволяет собакам покинуть очередь поиска, если они сочтут, что положительный образец отсутствует. Решение о тестировании с использованием системы вознаграждения с положительным смещением (т.е. вознаграждение не давалось за неуказанную линию) было принято из-за ограниченного общего количества выборок для тестирования, соотношения выборки и контроля и минимальной возможности для собак адаптироваться. к образцам с новым фоном. Однако это решение было частично отменено путем тестирования, когда по поведению собак стало очевидно, что предоставленные контроли были значительно сложными.У собак был очень ограниченный предыдущий опыт с «отрицательными на биопсию» образцами мочи от мужчин, которые, вероятно, имели другие заболевания предстательной железы, такие как аденома простаты и простатит. Было обнаружено, что система вознаграждения с положительной предвзятостью фактически снижает способность собаки научиться различать. Таким образом, собакам был предоставлен двухнедельный период предварительной подготовки к тестированию с возвращением к сбалансированной системе вознаграждения, в которой истинные пустые строки и поиск цели (положительный результат) вознаграждались одинаково. Период, в течение которого каждая собака была вознаграждена в системе вознаграждения с положительным смещением, обозначен заштрихованной областью в таблице 2.

Из результатов, особенно собаки 1 (Флорин), видно, что обучение происходило в течение первых четырех наборов системы вознаграждения с положительным смещением, так как при переходе на сбалансированное вознаграждение в наборе 5 ее результаты составили 100%. Вероятность выбрать правильный образец из 4 три раза подряд составляет (¼) ³ = 1/64 = 0,016. Обученная собака в качестве биологического детектора может быстро адаптироваться, если будет дано соответствующее подкрепление. Собака 2, Мидас, также показала улучшение: период системы вознаграждения с положительным смещением составлял всего два сета, прежде чем перейти на сбалансированное вознаграждение.Хотя это не так ясно из анализа данных, зарегистрированные поведенческие изменения в базе данных показали, что ее производительность улучшалась по мере продвижения наборов.

Среди восьми наборов образцов, представленных любой собаке с использованием сбалансированной системы вознаграждения (таблица 2), образец рака был неправильно идентифицирован дважды подряд только одной из собак. Вероятность того, что только один или ни один из них не будет случайно пропущен, составляет 0,035.

Различия в содержании ЛОС в образцах рака и контрольных образцах с отрицательной биопсией

Параллельно с анализом, проведенным с помощью обоняния собак, часть образцов (6 злокачественных опухолей, 30 контрольных образцов с отрицательной биопсией) были отправлены на анализ ЛОС с помощью ГХ-МС (рис. 3А).В окончательном анализе можно было использовать только подмножество, потому что несколько образцов (слепым способом) использовались для оптимизации протокола ГХ-МС. Создавая давление и нагревая образцы мочи, мы гарантировали, что все летучие вещества, доступные для носа собак при комнатной температуре, также присутствовали в экспериментах ГХ-МС. Общие необработанные данные доступны в S1 Data. Подобно предыдущим исследованиям [19, 40], мы обнаружили отдельные пики, представляющие ЛОС, которые были повышены или уменьшены при раке простаты по сравнению с отрицательными биопсийно-отрицательными контрольными образцами мочи при p <0.05 (рис. 3B и 3C). Повышенное содержание ЛОС в образцах рака простаты по Глисон 9 отличалось от тех, о которых сообщалось ранее [19], включая триметилсиланол, летучий силоксан, образующийся в результате разложения силиконов. Тем не менее, дизайн нашего исследования (рак простаты по шкале Глисона 9 в сравнении с контрольными образцами с отрицательной биопсией) ранее не исследовался в отношении летучих органических соединений в моче. Несколько летучих органических соединений, количество которых в образцах раковых заболеваний снижено, в том числе 2-пентанон и пиррол, обычно обнаруживаются в образцах здоровой мочи [41, 42].Чтобы не допустить пропуска важных предикторов распространенности рака простаты, относительно большой порог (с p <0,20) был применен к скрининговым переменным для дальнейшего развития регрессионной модели. Осталось более 29 летучих органических соединений для разработки логистической модели. Окончательная логистическая модель была оценена с помощью кривой рабочих характеристик приемника (ROC) (Рис. 3D). На основе прогнозируемых вероятностей из окончательной модели, полученной с помощью перекрестной проверки складным ножом, площадь под кривой ROC (AUC) равна 0.935, что указывает на высокую различающую способность. Для разработки диагностической модели на основе летучих органических соединений необходима дальнейшая проверка указанной выше регрессионной модели с использованием внешних тестовых образцов.

Рис. 3. Анализ ЛОС в образцах мочи пациента.

(A) Схема исследования для анализа ЛОС. (B) Тепловая карта значительного увеличения или уменьшения ЛОС по критерию суммы рангов Вилкоксона (p <0,05) при раке по сравнению с контрольными образцами с отрицательной биопсией. На оси абсцисс показаны номера в реестре CAS семи значимых ЛОС (p <0.05), показывающий увеличение или уменьшение количества у пациентов с раком простаты. Корреляция между ЛОС и пациентами варьируется от низкой (черный) до высокой (белый). (C) Значительно повышенное или пониженное содержание соединений при раке по сравнению с контрольными образцами с отрицательной биопсией. (D) Кривая рабочих характеристик приемника (ROC) для логистической модели рака простаты VOC, проверенная на 34 пациентах.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245530.g003

Различия в микробном содержании злокачественных опухолей и контрольных образцов с отрицательной биопсией

Мы аналогичным образом профилировали микробиоту мочи с помощью секвенирования 16S рДНК в образцах, используемых для обоняния собак и ГХ-МС (рис. 1), как описано ранее [28, 43].Один из контрольных образцов с отрицательной биопсией не имел достаточного количества считываний секвенирования для анализа, поэтому окончательный анализ был проведен на 12 образцах рака и 37 образцах контроля с отрицательной биопсией. Иерархический кластерный анализ не показал четкого разделения рака и контрольных образцов с отрицательной биопсией на основе полного профиля микробиоты (рис. 4A). Аналогичным образом, анализ бета-разнообразия не показал четкого разделения на рак и контрольные образцы с отрицательной биопсией (рис. 4B). Подобно анализу ЛОС, были отдельные виды бактерий, которые в разной степени присутствовали при раке по сравнению с контрольными образцами с отрицательной биопсией (рис. 4С).Один из видов бактерий, уровень которых повышен в образцах рака Глисона 9, Dolosigranulum pigrum , является редким условно-патогенным микроорганизмом, о котором ранее сообщалось в образцах мочи [44].

Рис. 4. Анализ микробиоты в образцах мочи пациента.

(A) Неконтролируемая кластеризация (логарифмическое преобразование) результатов секвенирования 16S рДНК Illumina на образцах осадка мочи у 25 лучших видов. Дендрограмма была основана на иерархической кластеризации евклидова расстояния между образцами в комбинированных образцах для контроля рака и биопсии-отрицательных контрольных образцов.(B) Бета-разнообразие (Bray-Curtis) каждого бактериального профиля мочи, проанализированное с помощью рака (желтый) или отрицательного биопсийного контроля (синий). (C) Дифференциальная численность выбранных видов бактерий в раковых и биопсийно отрицательных контрольных образцах. Среднее процентное содержание последовательностей дано для образцов, положительных для указанных видов, из групп рака и отрицательного контроля при биопсии. MW = U-критерий Манна-Уитни.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245530.g004

Также аналогично анализу ЛОС, виды бактерий, идентифицированные как дифференциально экспрессирующиеся при раке, по сравнению с контрольными образцами с отрицательной биопсией, отличались от тех, о которых мы сообщали ранее [ 28].Наше предыдущее исследование включало, в основном, рак простаты низкой степени злокачественности, и никаких образцов мочи на рак простаты по шкале Глисона 9 не проводилось.

Искусственная нейронная сеть, обученная диагностике обоняния собак, выявляет различия в раке и контрольной группе с отрицательной биопсией

На основе ЛОС, собранных SPME в свободном пространстве и проанализированных с помощью GC-MS, хроматографы сырых ионов использовались для обучения ИНС имитации диагностики рака у собак по образцам мочи. Как скелетизация сети [35–37], так и методы автоассоциативной фильтрации [38] использовались для выявления наиболее важных пиков хроматографа, способствующих диагностике собак.Подход скелетонизации сети (рис. 5) показал, что наиболее заметные спектральные особенности произошли в интервале от 10 до 14 минут. Этот результат был подтвержден аутоассоциативной фильтрацией (рис. 6 и 7), которая показала, что главные различия между образцами мочи, полученными при раке и биопсийно-отрицательными контрольными образцами, заключались в большом количестве элюатов, представленных парой пиков на 13,177 и 13,563 мин, а также отсутствие элюатов по сравнению с контрольными образцами с отрицательной биопсией через 12,698 мин. Появляются похожие, но меньшие истощения 10.561, 10,899 и 11,473 мин. Таким образом, два метода (скелетизация и автоассоциативная фильтрация) согласовывались в указании области данных, наиболее важных для информирования собак о диагнозе, и дополнительно указывали пики, которые были связаны с раком, по сравнению с контрольными мочами с отрицательной биопсией.

Рис. 5. Сетевая скелетонизация нейронной сети, картирующая ГХ-МС для показанных положительных и отрицательных образцов мочи собак.

Сеть изображена как система весов возбуждающих (красный) и тормозных связей (синий).Начиная с выходного узла, представляющего положительный (TP) диагноз рака простаты у собак, отбираются менее значимые веса, чтобы выявить критические связи с наиболее доминирующими пиками ГХ-МС, способствующими диагностике рака у собак. Верхний рисунок показывает сетку со всеми имеющимися весами, а нижний рисунок показывает пик около 13,139 минут как положительно коррелированный (то есть красное соединение) с положительным показателем рака простаты у собак.

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0245530.g005

Рис. 6. Методология автоассоциативной фильтрации.

Автоассоциативная сеть была обучена восстанавливать ГХ-МС спектры всех образцов с отрицательными показателями у собак. Вводя спектры указанных спектров для собак, сеть генерировала ближайший для собак отрицательно указанный спектр на своем выходе. Вычитание выходного сигнала из входного спектра выявило аномальные особенности, возможно, связанные с признаками рака у собак.В показанном примере как избыток элюента (пики), так и недостаток (впадины) указаны в разностном спектре. Короче говоря, эта сеть действует как поисковая таблица базы данных, которая предоставляет наиболее близкий к применяемому отрицательно-собачий указанный спектр, который при необходимости производит синтетические данные, представляющие потенциальный отрицательный для собак спектр.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245530.g006

Рис. 7. Автоассоциативная фильтрация выявляет наиболее доминирующие особенности ГХ-МС, способствующие положительному признаку рака простаты у собак по образцам мочи.

Аномалии делятся на две группы: те, которые показывают переизбыток элюатов (JHBUI-0887, JHBUI-1028 и AWP-5734), и те, которые показывают истощение элюатов (AWP-9307 и AWP-6373). Пик около 13,2 минуты на первых трех из этих графиков соответствует пику, разрешенному на 13,139 минуте посредством скелетонизации сети.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0245530.g007

Обсуждение

Это исследование продемонстрировало осуществимость и выявило проблемы многопараметрического подхода как первого шага к созданию более эффективного, неинвазивного метода ранней диагностики мочи для высокоагрессивной гистологии рака простаты (например,г., оценка по Глисону 9). Обоняние собак позволило различить рак простаты и образцы мочи с отрицательными результатами биопсии, а анализ профиля ЛОС и микробиоты показал качественную разницу между двумя группами. Кроме того, ИНС была обучена имитировать обонятельный диагноз собак на основе аналитических данных ГХ-МС. Наши результаты показывают, что может быть информация, синтезированная собаками относительно природы рака, которая не может быть легко идентифицирована традиционным одноканальным анализом молекулярных биомаркеров, а вместо этого может быть эмерджентным свойством [21].

Несмотря на то, что испытания проводились на небольшом наборе образцов, который не позволяет нам сделать окончательные выводы о точности, результаты, достигнутые в этом пилотном проекте, подтверждают потенциал специально обученных собак-детекторов, непосредственно помогающих в разработке ИНС для работы на биоэлектронной машине. прибор диагностики обоняния [23]. Наши результаты демонстрируют способность собак различать, обучаться и улучшать обнаружение даже при представлении небольшого количества образцов сложного запаха. Остается проблема, как перенести собачий интеллект в машинные обонятельные органы [45].

Собаки исключительны в распознавании запахов, а также известны своей способностью распознавать крошечные изменения в запаховом фоне. Изменения запахового фона часто приводят к заметному изменению поведения до того, как происходит привыкание. Поэтому важно привыкнуть к запахам, которые могут возникать в образцах, хранящихся на другом предприятии, произведенных в другой части мира, до того, как столкнуться с трудностями при принятии решения о различении. Наше пилотное исследование было ограничено количеством образцов мочи, доступных в JHU от мужчин с раком простаты по шкале Глисона 9 с достаточным количеством аликвот, а также осадком мочи, доступным для проведения нашего исследования с тремя руками.Ограниченный размер выборки был самой большой общей проблемой этого исследования и особенно здесь важен, поскольку мы просили собак различать более сложные образцы, чем они когда-либо получали ранее. После подробного обсуждения мы решили использовать пять образцов рака для ознакомительного обучения, а оставшиеся семь — для тестирования.

Интересно, что два контроля с отрицательной биопсией (JHBUI-2719 и AWP-9582) были неправильно выбраны обеими собаками независимо при тестировании и в том же порядке, несмотря на двойное слепое и случайное положение (таблица 2).ГХ-МС не проводилась с этими образцами, однако секвенирование микробиоты дало интересные результаты. JHBUI-2719 содержал Alloscardovia omnicolens (21,5% считываний секвенирования), которых не было ни в одном из других образцов рака. AWP-9582 имел атипичный профиль микробиома мочи, при котором почти все считывания относились либо к Dolosigranulum pigrum (обнаружено, что он более многочислен в образцах рака), либо к неизвестному виду Lactobacillales .Понимание причины ошибки собак и того, способствовала ли микробиота мочи этой ошибке, может дать ценную информацию, и мы планируем изучить ее в будущих исследованиях с большим размером выборки.

В этом пилотном исследовании собак также проверяли на особенно сложных контрольных объектах: моча от мужчин, у которых была отрицательная биопсия на рак простаты. Всем этим мужчинам была сделана биопсия для выявления рака простаты (чаще всего повышенного уровня ПСА или аномального DRE).Следовательно, в контрольной группе, вероятно, были другие заболевания простаты, такие как аденома простаты и простатит, и также возможно, что некоторые из мужчин с отрицательной биопсией действительно имели рак простаты, который не был пропущен при биопсии. К сожалению, данные о последующих положительных биопсиях у этих мужчин были недоступны. Собаки имели лишь ограниченную подготовку по различению контрольных образцов с отрицательной биопсией от рака простаты в прошлом из-за трудностей с получением хорошо аннотированных образцов этого от нашего сотрудника MKUH.С тех пор мы определили, что важно не пытаться тренировать дискриминацию, если не будет подтверждено с уверенностью, что этот контроль свободен от рака. Поэтому мы утверждаем, что тестирование собак на этот уровень производительности требует значительного количества дрессировки против этой контрольной группы, и это должно быть в центре внимания всех будущих крупномасштабных исследований.

Изначально мы приняли решение использовать ответ собаки «система вознаграждения с положительной предвзятостью». Это требует, чтобы собака продолжала движение по карусели, пока она или она не примет решение об обнаружении.Две использованные собаки изначально не были обучены по этому протоколу, но все же могли сигнализировать «бланк» (т.е. решение не принято). Мы перенесли положительное смещение на ожидание рака простаты по каждой строке. К сожалению, это также увеличило вероятность ложных срабатываний. После первого набора тестов мы повторно посетили это решение и согласились, что это был неправильный выбор. Поэтому мы перекалибровали собак, чтобы они принимали все отрицательные линии, тем самым снизив ложноположительное смещение.

В дополнение к вышесказанному, опубликованное нами и независимой группой исследование показывает, что собаки действительно нуждаются в дополнительном обучении, когда появляются новые фоновые запахи из-за изменения обработки проб или изменения фона окружающей среды.Это обучение необходимо для того, чтобы собаки были уверены, что эти меняющиеся фоновые запахи действительно не имеют значения и их следует игнорировать. Этот метод не требует большого количества презентаций и является важной настройкой, позволяющей собаке привыкнуть к сложным задачам распознавания.

Мы провели химический анализ ЛОС, который позволил идентифицировать виды ЛОС, дифференцирующие рак, из контрольных образцов с отрицательной биопсией, однако эти молекулярные виды отличались от тех, о которых сообщалось ранее [40, 46].Саму природу метода ГХ-МС можно рассматривать как нечто похожее на биологическое обоняние: пики ГХ-МС не всегда соответствуют только одному молекулярному виду, и фрагменты из разных молекул, но с одинаковым соотношением заряд / масса могут добавить к одному и тому же пик, в то время как фрагменты одной и той же молекулы могут появляться как части различных пиков. Точно так же большинство обонятельных рецепторов собак настроены так, чтобы отвечать более чем на один летучий, и один и тот же летучий обычно активирует более одного рецептора на разных уровнях с различным связыванием рецептора, часто в зависимости от разных частей одоранта.В ГХ-МС образец пиков используется для идентификации соединений, делается вывод о «сигнатуре» идентичности, и контекст того, какие другие молекулы присутствуют или отсутствуют, может сильно повлиять на то, как интерпретируется идентичность этой молекулы. Точно так же при биологическом обонянии присутствие некоторых одорантов или даже летучих веществ без запаха и комбинаций одорантов в смесях может влиять на характер запаха [22, 47], прямо или косвенно влияя на уровни активации EC50 отдельных рецепторов, действующих как аллостерические или ортостерические модуляторы.То, как запах рака или чего-то еще, что собака приучена искать, кодируется в мозге [21], не конкретным набором молекул, идентифицированных по имени и концентрации, а гештальт-представлением многих наблюдений в гибком контексте. . Таким образом, в отличие от более ранних исследований летучести мочи при раке простаты, нашей основной целью не было выявление соединений, различающихся между раком простаты и контрольной мочой с отрицательной биопсией. Скорее, мы сосредоточились на выявлении общих эмерджентных свойств, сигнализирующих о раке по сравнению с отсутствием рака, которые затем можно было бы перенести на платформу машинного обучения, что дает возможность ставить диагнозы, не зависящие от отдельных биомаркеров.

В прошлом группы, в том числе и наша, проделали большую работу по определению определенного набора биомаркеров сигнатур ЛОС (по названию и потенциально относительной или абсолютной концентрации). Усилия по поиску летучести для надежных сигнатур молекулярных видов, указывающих на ряд состояний, включая рак простаты [46], колоректальный рак [48], печень [49] и рак легких [48], последовательно приводили к схемам, в которых можно определить набор правил отбора. разделение любого достаточно богатого набора данных на кластеры положительного и отрицательного контроля.Возникающая проблема заключается в том, что, как и в случае с собаками, похоже, что никакие уникальные молекулы (наборы) не могут быть обнаружены в качестве однозначных биомаркеров, и вместо этого характерен запах, а не молекулярный состав запаха, который сообщает о раке. подпись к собакам. ГХ-МС создает список ЛОС, которые несут информацию для каждого экспериментального случая, но такие списки, к сожалению, сами по себе не обобщают, чтобы предоставить «основной шаблон биомаркера» в форме идентификации молекулярных видов и концентраций [48].Это показывает потенциал для диагностики рака простаты, но проверка ЛОС остается целью будущих исследований.

Далее мы сообщаем об анализе микробиоты рака и здоровой мочи, который не выявил четкого разделения между раком и здоровой мочой, хотя были отдельные виды, которые различали две группы. Точно так же в микробиоме могут быть определенные роли в микробном сообществе, которые могут быть заполнены различными организмами; это может быть роль, которая изменяется при раке, и определение характеристик роли может быть более важным, чем определение организмов.

Целью данного исследования было продемонстрировать возможность интеграции анализа образцов мочи пациентов с раком простаты с использованием обоняния собак с химическим и микробным профилированием. Диагностические тесты, помимо ПСА, были разработаны в последние несколько лет и имеют отношение к запланированному второму этапу этого исследования, цель которого — сравнить рабочие кривые приемника для интеграции обоняния собак, химического и микробного профилирования с диагностическими тестами, такими как Индекс здоровья простаты ( phi), SelectMDx и PCA3.Как и в случае с ПСА, это специфические молекулярные идентификационные биомаркеры диагностических показателей, в то время как обонятельный подход, центральный в нашем исследовании, зависит от эмерджентного свойства запаха. Обонятельный диагностический сигнал не обязательно связан с неизменяемыми (набором) молекулярных идентичностей, поскольку одинаковый функциональный характер запаха может быть придан собакам и машинным обонятельным органам с помощью различных коктейлей с летучими органическими соединениями. Мы действительно отмечаем, что диагностические метрики, основанные на биомаркерах, а также на основе возникающих свойств, исследуемые вместе, разумно ожидают, что они дадут более точную картину состояния, и, вероятно, их полезность при принятии решений о вмешательстве может быть увеличена за счет добавления здесь проводится диагностика микробного профилирования.Этот интегративный подход является фокусом нашего будущего исследовательского направления.

Наконец, мы изучили осуществимость, проблемы и возможности использования диагностики обоняния собак для обучения ИНС характеристике ее эффективности в различении раковых и незлокачественных (т. Е. Отрицательный контроль биопсии) состояний с использованием одних только данных ГХ-МС, а также в сочетании с собачьими данными, собранными на тех же образцах.

В заключение, наши данные говорят о возможности отличить рак простаты по шкале Глисона 9 от биопсийно-отрицательных контролей путем интегративного анализа нескольких совершенно разных методологий, каждая из которых сама по себе продемонстрировала свою способность в различной степени: обученные собачьи обоняния, обычные GC- MS-анализ летучих органических соединений в свободном пространстве мочи, а также наш новый, специально разработанный подход ИНС и профилирование микробиоты мочи на одних и тех же образцах.Собаки смогли обнаружить рак простаты по шкале Глисона 9 по сравнению с отрицательными результатами биопсии с высокой чувствительностью и специфичностью. Анализ данных ГХ-МС, собранных о ЛОС в моче, позволил идентифицировать молекулярные виды, дифференцирующие рак, от контрольных образцов с отрицательной биопсией, хотя необходима дальнейшая проверка. Профилирование микробиоты не позволило дифференцировать рак простаты от контрольной группы с отрицательной биопсией при оценке в целом, однако было обнаружено, что отдельные ЛОС и виды микробов по-разному присутствуют в этих двух группах.Объединение этих потоков данных позволило нам обучить ИНС имитировать обонятельную диагностику собак. Самой большой проблемой на протяжении всего этого пилотного исследования было наличие патологически хорошо охарактеризованных и стандартизированных образцов мочи. Мы знали об этом ограничении и спроектировали исследование соответственно, полностью ожидая, что небольшое количество образцов помешает нам достичь очень высокой чувствительности и селективности, которые, как было показано, обычно достижимы с собаками, и аналогичным образом ограничили наше обучение ИНС.Мы полностью ожидаем, что более крупные пулы образцов станут ключевым фактором для проведения статистически обоснованных мультиинституциональных будущих исследований, направленных на полную интеграцию профилей ЛОС и микробиоты. Конечная цель пилотного исследования, о котором мы сообщаем здесь, заключалась в том, чтобы проложить путь к разработке инструментов обонятельной диагностики, основанных на машинах, которые определяют и резюмируют то, что может быть обнаружено и выполнено сейчас с помощью обоняния собак.

Благодарности

Мы благодарим профессора Нила Гершенфельда из Центра битов и атомов (CBA) Массачусетского технологического института в долгу перед Джо Мерфи, Кара Пендлбери и Джеймсом Прю за административную поддержку.Д-р Адам Фельдман из отделения урологии Массачусетской больницы общего профиля провел групповые обсуждения и провел экскурсию по лаборатории по клинической урологической практике, включая сбор образцов мочи и определение характеристик. Проф. Федерико Казаленьо из Design Lab Массачусетского технологического института и Samsung за обсуждение новых носов смартфонов. Мы благодарим доктора Ханно Стин из Бостонской детской больницы за обмен знаниями о биомаркерах мочи. Мы благодарим доктора Марвина Вайнштейна и доктора Бернарда Чена из Quantum Insights за исследование особенно многообещающего нового метода кластеризации под названием «Динамическая квантовая кластеризация».Проф. Анн-Софи Барвич из Университета Индианы за плодотворный обмен идеями по распознаванию обонятельных объектов. Доктору Ричу Флетчеру и Кэролайн Джин из MIT Media Lab и D-Lab за продуманное мышление данных и Алексу Спилиотопулосу из Orion Data Sciences за полезные обсуждения автостереограммы обонятельных данных и данных ГХ-МС. Мы благодарим доктора Джеймса Уайта из Resphera Biosciences за помощь в анализе последовательности микробиома. Мы благодарны Фонду Бодоссакиса за поддержку П.M. S. Мы благодарим Альфонсо Парра Рубио за помощь с рис. 1.

Ссылки

1. 1. Картер Х.Б., Альбертсен П.С., Барри М.Дж., Этциони Р., Фридленд С.Дж., Грин К.Л. и др. Раннее выявление рака простаты: Руководство AUA. Журнал урологии. 2013; 190 (2): 419–26. Epub 05/06. pmid: 23659877.
2. 2. Хакнер К., Плейл Дж. Обоняние собак как альтернатива аналитическим инструментам для диагностики заболеваний: понимание «личности собаки» для достижения воспроизводимых результатов.J Breath Res. 2017; 11 (1): 012001–. pmid: 28068294.
3. 3. Уильямс Х., Пембрук А. Собаки-ищейки в клинике меланомы? Ланцет (Лондон, Англия). 1989; 1 (8640): 734. Epub 1989/04/01. pmid: 2564551.
4. 4. Черч Дж., Уильямс Х. Еще одна собака-ищейка для клиники? Ланцет. 2001; 358 (9285): 930. pmid: 11575380
5. 5. Кэмпбелл Л.Ф., Фармери Л., Джордж С.М.С., Фаррант ПБЖ. Обонятельное обнаружение злокачественной меланомы у собак. Отчеты о делах BMJ. 2013; 2013: bcr2013008566.pmid: 24127369
6. 6. Пикель Д., Мануси Г. П., Уокер Д. Б., Холл С.Б., Уокер Дж. Доказательства обонятельного обнаружения меланомы у собак. Прикладная наука о поведении животных. 2004. 89 (1): 107–16. https://doi.org/10.1016/j.applanim.2004.04.008.
7. 7. Уиллис С.М., Черч С.М., Гость С.М., Кук В.А., Маккарти Н., Брансбери А.Дж. и др. Обонятельное обнаружение рака мочевого пузыря человека собаками: доказательство принципиального исследования. BMJ (под ред. Клинических исследований). 2004; 329 (7468): 712. Epub 2004/09/25. pmid: 15388612; PubMed Central PMCID: PMC518893.
8. 8. McCulloch M, Jezierski T., Broffman M, Hubbard A, Turner K, Janecki T. Диагностическая точность обнаружения собачьих запахов на ранних и поздних стадиях рака легких и молочной железы. Integr Cancer Ther. 2006; 5 (1): 30–9. pmid: 16484712.
9. 9. Хорват Г., Андерссон Х., Немес С. Запах рака в крови больных раком яичников: ретроспективное исследование обнаружения собаками во время лечения, через 3 и 6 месяцев после него. Рак BMC. 2013; 13: 396. Epub 2013/08/28. pmid: 23978091; PubMed Central PMCID: PMC3765942.
10. 10. Хорват Г., Джарверуд Г. А., Джарверуд С., Хорват И. Карциномы яичников человека, обнаруживаемые по специфическому запаху. Integr Cancer Ther. 2008. 7 (2): 76–80. Epub 2008/05/29. pmid: 18505901.
11. 11. Horvath G, Andersson H, Paulsson G. Характерный запах в крови указывает на рак яичников. Рак BMC. 2010; 10: 643. Epub 2010/11/26. pmid: 21106067; PubMed Central PMCID: PMC3004816.
12. 12. Уиллис С.М., Бриттон Л.Е., Харрис Р., Уоллес Дж., Гость К.М.Летучие органические соединения как биомаркеры рака мочевого пузыря: чувствительность и специфичность с использованием обученных собак-ищейок. Биомаркеры рака: раздел A маркеров заболеваний. 2010. 8 (3): 145–53. Epub 2010/01/01. pmid: 22012770.
13. 13. Cornu JN, Cancel-Tassin G, Ondet V, Girardet C, Cussenot O. Обонятельное обнаружение рака простаты у собак, нюхающих мочу: шаг вперед в ранней диагностике. Европейская урология. 2011. 59 (2): 197–201. Epub 2010/10/26. pmid: 20970246.
14. 14. Сонода Х., Коное С., Ямазато Т., Сато Й., Моризоно Дж., Шиката К. и др.Скрининг колоректального рака с использованием пахнущего материала путем обнаружения собачьего запаха. Кишечник. 2011; 60 (6): 814–9. Epub 2011/02/02. pmid: 21282130; PubMed Central PMCID: PMC3095480.
15. 15. Туло А., Гилберт С., Бауэр П., Альран С., Фуршот В., Гийо Е. и др. Новый чрескожный метод выявления рака груди у собак. Онкология. 2019; 96 (2): 110–3. Epub 2018/10/03. pmid: 30278460.
16. 16. Шун GAA, Де Йонге Д., Хилверинк П. Как собаки учатся обнаруживать рак толстой кишки — Оптимизация использования средств обучения.Журнал ветеринарного поведения. 2020; 35: 38–44. https://doi.org/10.1016/j.jveb.2019.10.006.
17. 17. Мурарка М., Веслей-Гросс З.И., Эсслер Дж. Л., Смит П. Г., Худа Дж., Драпкин Р. и др. Тестирование клеточных линий рака яичников для обучения собак обнаружению рака яичников из плазмы крови: пилотное исследование. Журнал ветеринарного поведения. 2019; 32: 42–8. https://doi.org/10.1016/j.jveb.2019.04.010.
18. 18. Таверна Г., Тиду Л., Гриззи Ф., Торри В., Мандресси А., Сарделла П. и др. Обонятельная система хорошо обученных собак обнаруживает рак простаты в образцах мочи.J Urol. 2015; 193 (4): 1382–7. Epub 2014/09/30. pmid: 25264338.
19. 19. Лима А.Р., Пинто Дж., Азеведо А.И., Баррос-Силва Д., Херонимо С., Энрике Р. и др. Идентификация панели биомаркеров для улучшения диагностики рака простаты с помощью летучих метаболических профилей мочи. Британский журнал рака. 2019; 121 (10): 857–68. pmid: 31588123
20. 20. Сетхи С., Нанда Р., Чакраборти Т. Клиническое применение анализа летучих органических соединений для выявления инфекционных заболеваний.Обзоры клинической микробиологии. 2013; 26 (3): 462–75. pmid: 23824368.
21. 21. Пашковский С.Л., Юрилли Дж., Бранн Д., Чичарро Д., Драмми К., Фрэнкс К. и др. Структура и гибкость корковых представлений о запаховом пространстве. Природа. 2020; 583 (7815): 253–8. pmid: 32612230
22. 22. Weiss T, Snitz K, Yablonka A, Khan R, Gafsou D, Schneidman E, et al. Перцептивная конвергенция многокомпонентных смесей в обонянии подразумевает обонятельный белый цвет. Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки.2012; 109. pmid: 23169632
23. 23. Харрисон С. Задача создать бота, который чувствует запах не хуже собаки. Проводной. 2019.
24. 24. Fan J, Lv J. Скрининг уверенной независимости для пространств сверхвысокой размерности. Журнал Королевского статистического общества: серия B (статистическая методология). 2008; 70 (5): 849–911.
25. 25. Клейнбаум ДаК, М. Логистическая регрессия, самообучающийся текст. 3-е издание, 2010 г.
26. 26. Ферт Д. Снижение смещения оценок максимального правдоподобия.Биометрика. 1993. 80 (1): 27–38.
27. 27. Команда RC. R: Язык и среда для статистических вычислений: Фонд R для статистических вычислений, Вена, Австрия; 2017. Доступно по адресу: https://www.R-project.org/.
28. 28. Shrestha E, White JR, Yu S.H., Kulac I., Ertunc O, De Marzo AM, et al. Профилирование микробиома мочи у мужчин с положительной и отрицательной биопсией на рак простаты. Журнал урологии. 2018; 199 (1): 161–71. pmid: 28797714
29. 29.Caporaso JG, Kuczynski J, Stombaugh J, Bittinger K, Bushman FD, Costello EK, et al. QIIME позволяет анализировать данные секвенирования сообщества с высокой пропускной способностью. Нат методы. 2010. 7 (5): 335–6. Epub 2010/04/13. pmid: 20383131; PubMed Central PMCID: PMC3156573.
30. 30. Эдгар RC. Поиск и кластеризация на порядки быстрее, чем BLAST. Биоинформатика. 2010. 26 (19): 2460–1. Epub 2010/08/17. pmid: 20709691.
31. 31. Лангмид Б, Зальцберг С.Л. Быстрое выравнивание с пропуском считывания с Bowtie 2.Нат методы. 2012; 9 (4): 357–9. Epub 2012/03/06. pmid: 22388286; PubMed Central PMCID: PMC3322381.
32. 32. Абернети М.Г., Розенфельд А., Уайт JR, Мюллер М.Г., Левики-Гаупп С., Кентон К. Микробиом мочи и уровни цитокинов у женщин с интерстициальным циститом. Акушерство и гинекология. 2017; 129 (3): 500–6. Epub 2017/02/09. pmid: 28178051.
33. 33. Оттесен А., Рамачандран П., Рид Э., Уайт Дж. Р., Хасан Н., Субраманиан П. и др. Динамика обогащения Listeria monocytogenes и связанного с ней микробиома из естественно загрязненного мороженого связана со вспышкой листериоза.BMC Microbiol. 2016; 16 (1): 275. Epub 2016/11/18. pmid: 27852235; PubMed Central PMCID: PMC5112668.
34. 34. Дакиган Н., Грим Си-Джей, Уайт-младший, Хейнс Д.Э., Джарвис К.Г. Раннее извлечение сальмонеллы из пищи с помощью 6-часового неселективного предварительного обогащения и изменения состава тетратионатного бульона. Границы микробиологии. 2016; 7: 2103. PMC5187357. pmid: 28082968
35. 35. Thaler SL. Прогнозирование сверхтвердых бинарных соединений с помощью каскадных авто- и гетероассоциативных нейронных сетей.Журнал сплавов и соединений. 1998. 279 (1): 47–59. https://doi.org/10.1016/S0925-8388(98)00611-2.
36. 36. Райан С., Талер С. Искусственные нейронные сети для определения характеристик щита Уиппла. Разработка процедур. 2013; 58: 31–8. https://doi.org/10.1016/j.proeng.2013.05.006.
37. 37. Райан С., Талер С., Канданаараччи С. Методы машинного обучения для прогнозирования результатов столкновений на сверхвысоких скоростях. Экспертные системы с приложениями. 2016; 45: 23–39.https://doi.org/10.1016/j.eswa.2015.09.038.
38. 38. Талер С., изобретатель Неалгоритмически реализованные искусственные нейронные сети и их компоненты. Патент США 6,014,653. 2000.
39. 39. Гадбуа С., Рив С. Семиотические собаки: собаки, обрабатывающие запахи, в качестве научных сотрудников в биомедицинских и экологических исследованиях. Поведение собаки. 2016; 2: 26–32.
40. 40. Гао Кью, Су Х, Аннаби М.Х., Шрейтер Б.Р., Принц Т., Акерман А. и др. Применение летучих органических соединений (ЛОС) в моче для диагностики рака простаты.Клинический рак мочеполовой системы. 2019; 17 (3): 183–90. Epub 2019/03/12. pmid: 30853355.
41. 41. Мочальски П., Унтеркофлер К. Количественная оценка выбранных летучих органических соединений в моче человека с помощью газовой хроматографии, селективной ионизации реагента, масс-спектрометрии с временем пролета (GC-SRI-TOF-MS) в сочетании с твердофазной микроэкстракцией в пространстве над головой (HS-SPME). Аналитик. 2016; 141 (15): 4796–803. pmid: 27241792
42. 42. Макгиннис В. Р., Аудья Т., Уолш В. Дж., Джексон Дж. А., Макларен-Ховард Дж., Льюис А. и др.Различение лилового фактора, Часть 1. Альтернативные методы лечения в здоровье и медицине. 2008. 14 (2): 40–50. Epub 2008/04/04. pmid: 18383989.
43. 43. Кассири Б., Шреста Е., Каспренски М., Антонеску С., Флореа Л.Д., Сфанос К.С. и др. Проспективное исследование микробиоты мочевыводящих путей и желудочно-кишечного тракта у детей мужского пола с предварительным воздействием антибиотиков или без него. Поданный. 2019. pmid: 31195012
44. 44. Lécuyer H, Audibert J, Bobigny A, Eckert C, Jannière-Nartey C., Buu-Hoï A, et al.Dolosigranulum pigrum вызывает внутрибольничную пневмонию и сепсис. Журнал клинической микробиологии. 2007. 45 (10): 3474–5. Epub 08/08. pmid: 17687015.
45. 45. Мершин А., Васи А., Магуайр Ю., Конг Д., Чжан С., Моран П. и др., Изобретатели; Массачусетский технологический институт, правопреемник. Способы и аппараты для искусственного обоняния 2013.
46. 46. Халид Т., Аджио Р., Уайт П., Де Лейси Костелло Б., Персад Р., Аль-Катеб Н. и др. Летучие органические соединения в моче для выявления рака простаты.PLoS One. 2015; 10 (11): e0143283. Epub 2015/11/26. pmid: 26599280; PubMed Central PMCID: PMC4657998.
47. 47. Hanser H-I, Faure P, Robert-Hazotte A, Artur Y, Duchamp-Viret P, Coureaud G, et al. Метаболическое взаимодействие одоранта и одоранта, новый актер в обонятельном восприятии и поведенческой реакции. Научные отчеты. 2017; 7 (1): 10219. pmid: 28860551
48. 48. Пэн Г., Хаким М., Броза Ю.Й., Биллан С., Абдах-Бортняк Р., Кутен А. и др. Обнаружение рака легких, молочной железы, толстой кишки и простаты на выдыхаемом воздухе с помощью единого набора наносенсоров.Британский журнал рака. 2010. 103 (4): 542–51. pmid: 20648015
49. 49. Сюэ Р., Донг Л., Чжан С., Дэн С., Лю Т., Ван Дж. И др. Исследование летучих биомаркеров в крови рака печени с использованием твердофазной микроэкстракции и газовой хроматографии / масс-спектрометрии. Быстрые коммуникации в масс-спектрометрии, 2008, 22: 1181–6. pmid: 18350562

6 способов, которыми имбирь поможет вашей собаке

Есть веская причина, по которой вы инстинктивно тянетесь к имбирному элю, когда чувствуете себя плохо.Это из-за имбиря.

И оказывается, свойства, которые делают имбирь полезными для вас, могут также помочь вашей собаке .

Азиатские и арабские культуры использовали корень имбиря в качестве пряности и лекарства на протяжении тысячелетий.

Функция имбиря как пищеварительного средства при расстройстве желудка и тошноте, скорее всего, является наиболее известным преимуществом. Но это далеко не единственный. Фактически, его потенциальные преимущества простираются далеко за пределы желудка.

Имбирь также полезен при более серьезных заболеваниях, таких как остеоартрит и даже рак.

Вот почему многие практикующие холистики рекомендуют этот мощный корень для собак.

Вот 6 способов, которыми имбирь может помочь вашей собаке…

1. Тошнота

Есть много причин, по которым собаку может вызывать тошнота и рвота.

Может он немного не в погоде? Или укачивание? Может, он лечится от рака?

Какой бы ни была причина, вполне вероятно, что свежий имбирь (или даже имбирный чай или порошкообразная специя) может помочь.Всегда держите под рукой, если вы подозреваете, что у вашей собаки расстройство желудка.

В одном исследовании имбирь сравнивался с обычным лекарством от тошноты — дименгидринатом (драмамин) . Он был так же эффективен, как дименгидринат, у людей и имел меньше побочных эффектов. Ветеринары также прописывают это лекарство собакам от тошноты и укачивания.

Имбирь обладает противодействием тошноте благодаря гингеролу и шогаолу. Эти соединения придают имбирю вкус и помогают ускорить процесс пищеварения.

Имбирь также обладает противовоспалительным действием, успокаивает пищеварительный тракт и уменьшает тошноту.

Дайте собаке немного имбиря, когда заметите признаки тошноты …

• Одышка
• Чрезмерное слюноотделение
• Потеря аппетита
• Пейте меньше воды
• Пощипывание губ
• Странное выражение лица

Ваша собака может также есть траву при расстройстве желудка, но должны быть и другие признаки.В противном случае он может просто есть траву для развлечения… или потому, что ему нужны дополнительные питательные вещества.

Если ваша собака заболела в машине, дайте ей имбирь за 30 минут до того, как она сядет в машину.

(Подробнее о том, как дать вашей собаке имбирь, я расскажу чуть позже.)

СВЯЗАННЫЕ С: 3 причины, по которым ваша собака ест траву и когда следует беспокоиться…

2. Вздутие живота

Вздутие живота — это когда ваш живот собаки расширяется от скопившегося воздуха, пищи и жидкости. Давление нарастает и живот вашей собаки расширяется.

Вздутие живота часто прогрессирует до заворота желудка (GDV), что опасно для жизни . Поэтому, если вы считаете, что у вашей собаки вздутие живота, вам нужно срочно обратиться к ветеринару.

Первый этап — дилатация. Живот расширяется и оказывает давление на другие части тела вашей собаки…

Кровоток между сердцем, животом и задними лапами замедляется. И кровь будет течь к слизистой оболочке желудка и от нее. Давление на диафрагму затруднит дыхание вашей собаке.Без надлежащего притока воздуха и крови клетки вашей собаки могут начать умирать.

После этого желудок может скручиваться от давления. Он закроет вход и выход в живот вашей собаки. Ничто не сможет ни въехать, ни выйти. Это стадия заворота .

Если желудок скручивает, кровообращение нарушается. Органы не получат кровь и кислород, которые им необходимы для функционирования, и ваша собака впадет в шок. Собаки могут умереть от вздутия живота или GDV в течение нескольких часов.

Если у вашей собаки вздутие живота, вы можете увидеть эти симптомы …

• Увеличенный живот
• Чрезмерное слюнотечение
• Беспокойство
• Боль в животе
• Рвота
• Бледность десен

По мере ее ухудшения вы начнете см.…

• Учащение пульса
• Одышка
• Слабость
• Коллапс

Точная причина ГРВ не подтверждена научно.Но существует множество факторов риска, включая плохое питание и генетику.

Есть также шагов, которые вы можете предпринять, чтобы предотвратить вздутие живота , например…

• Сыроедение
• Кормление костей
• Правильное упражнение
• Невысокие миски (кормите собаку на уровне земли)
• Небольшие порции

Имбирь может помочь на ранних стадиях вздутия живота. Я уже упоминал, что имбирь может стимулировать движения в желудке. Это может помочь быстрее вывести содержимое желудка и предотвратить его скопления.Это также может помочь уменьшить скопление газа, о котором я расскажу позже.

3. Метеоризм

Каким бы неприятным оно ни было, иногда у вашей собаки должны выделяться газы. Газы накапливаются в пищеварительной системе вашей собаки по двум основным причинам …

• Он глотает воздух во время еды и питья
• Пищеварительные газы выделяются при расщеплении пищи (подумайте о бобах и крестоцветных овощах)

Небольшое количество газов — это нормально. Но когда у вашей собаки нарост, она может чувствовать себя некомфортно.И, как вы теперь знаете, это может вызвать серьезные проблемы (например, вздутие живота).

Имбирь — ветрогонное растение. Это означает, что он может помочь предотвратить и удалить газы из пищеварительного тракта вашей собаки .

4. Артрит

Артрит — воспалительное заболевание. А имбирь обладает естественным противовоспалительным действием.

Поэтому неудивительно, что добавление имбиря в рацион вашей собаки может помочь облегчить симптомы артрита .

Нет никаких исследований, посвященных влиянию имбиря на боли в суставах у собак.Но исследования на людях и животных действительно обнадеживают.

Одно исследование показало, что имбирь может уменьшить симптомы остеоартрита коленного сустава.

В другом исследовании на крысах имбирь помог уменьшить воспаление, связанное с ревматоидным артритом.

5. Рак

Да, в некоторых исследованиях имбирь даже показал преимущества в борьбе с раком.

Одно исследование показало, что имбирь может замедлять рост рака груди у мышей. Другое исследование показало, что имбирь может убивать клетки лимфосаркомы в пробирке.Он также оказал положительное влияние на крыс с раком печени.

И поскольку воспаление играет роль в развитии рака… имбирь может помочь предотвратить рак . Это потому, что это противовоспалительное средство и усилитель иммунитета.

Имбирь также помогает облегчить побочные эффекты лечения рака. Это потому, что он может облегчить тошноту.

Распространенным химиопрепаратом для собак является цисплатин, вызывающий тошноту и рвоту. Исследование показало, что имбирь уменьшает рвоту у собак, принимающих этот препарат.

6. Сердечный червь

Сердечный червь — это страшное заболевание, которое может привести к…

• Заболевание легких
• Сердечная недостаточность
• Повреждение органа
• Смерть

Но когда дело доходит до профилактики, обычных вариантов — рискованный выбор . Они полны нейротоксичных химикатов, которые могут нанести вред вашей собаке. Традиционные методы лечения также опасны и трудны для вашей собаки .

Не говоря уже о том, что профилактика на самом деле не останавливает вашу собаку от заражения.Он просто убивает личинок до того, как они станут взрослыми червями.

Хорошая новость: существуют более целостные подходы к профилактике и лечению сердечного червя .

СВЯЗАННЫЙ: Почему я не даю своим собакам лекарство от сердечного червя (и почему вы не должны делать то же самое)…

Одним из этих средств может быть имбирь.

В одном исследовании имбирь показал многообещающие результаты в лечении сердечного червя у собак. Инъекции спиртовых экстрактов корня имбиря снижали микрофиляри у инфицированных собак на 83-98%.

Как кормить имбирь свою собаку

Имбирь выпускается в различных формах, включая порошок, капсулы / пилюли, настойку, чай и сырой корень.

Свежий органический корень имбиря:

Срежьте ножом кожицу и мелко нарежьте желтую часть корня.

Демиан Дресслер DVM (Ветеринар по борьбе с раком собак) рекомендует следующие дозировки для предотвращения тошноты от лечения рака…

10 фунтов или меньше… чайной ложки, 3 раза в день
От 10 до 35 фунтов… ½ чайной ложки, 3 раза в день
35 фунтов или более… ¾ чайной ложки, 3 раза в день

Всегда начинайте медленно и постепенно увеличивайте дозу до полной.

Для других форм Ottawa Valley Dog Whisperer рекомендует следующие дозировки:

Порошок имбиря:

от 1 до 10 фунтов… до чайной ложки
от 10 до 20 фунтов… от до ¼ чайной ложки
от 20 до 50 фунтов… 1 чайная ложка
от 50 до 100 фунтов… 2 чайные ложки
Более 100 фунтов… до 1 столовой ложки

Имбирный чай:

Вы можете купить имбирный чай или приготовить его самостоятельно из свежего корня имбиря.

от 1 до 10 фунтов… менее чашки, от 1 до 3 раз в день
от 10 до 20 фунтов… чашки, от 1 до 3 раз в день
от 20 до 50 фунтов… от до ½ чашки, от 1 до 3 раз в день
от 50 до 100 фунтов… от ½ до 1 чашки, от 1 до 3 раз в день
Более 100 фунтов… до 1 чашки, от 1 до 3 раз в день

Капсула:

От 1 до 10 фунтов… ½ капсулы, от 1 до 3 раз в день
От 10 до 20 фунтов… от ½ до 1 капсулы, от 1 до 3 раз в день
от 20 до 50 фунтов… от 1 до 2 капсул, от 2 до 3 раз в день
от 50 до 100 фунтов… от 1 до 2 капсул, от 3 до 4 раз в день
Более 100 фунтов… доза для взрослого человека

Настойка:

от 1 до 10 фунтов… от 1 до 3 капель, от 2 до 3 раз в день
от 10 до 20 фунтов… от 3 до 5 капель, от 2 до 3 раз в день
от 20 до 50 фунтов… 5-10 капель 2–3 раза в день
50–100 фунтов… 20 капель 2–3 раза в день
Более 100 фунтов… доза для взрослого человека

Предостережения

Имбирь может разжижать кровь, поэтому избегайте этого, если ваша собака сидит препараты, разжижающие кровь, о r будет делать операцию или рожать.Он также может снизить уровень сахара в крови и артериальное давление. Поговорите со своим ветеринаром, если у вашей собаки диабет или какое-либо сердечное заболевание. Также проконсультируйтесь с ветеринаром, если ваша собака беременна, принимает какие-либо лекарства или лечится от заболевания.

Итак… Могут ли собаки есть имбирь?

Имбирь безопасен для собак. И он может принести много пользы для здоровья, от облегчения пищеварения до сердечного червя и профилактики рака.

Так что добавьте имбирь в свой список натуральных средств для вашей собаки и возьмите немного в следующий раз, когда будете в магазине.

Что включать в список средств для лечения травм и чрезвычайных ситуаций

Чрезвычайные ситуации могут случиться в любое время, будь вы дома, на работе по городу или в путешествии.Когда они действительно случаются, вы всегда должны быть подготовлены с аптечкой для собак в дополнение к вашим человеческим запасам.

Этот список поможет вам собрать все необходимое в аптечке для оказания неотложной медицинской помощи собакам или проблем со здоровьем. Помимо этих предметов, не забудьте приложить важные документы, в том числе копии медицинских записей, записей о вакцинации и номеров телефонов экстренных служб.

Руководство по оказанию первой помощи для собак

Карманный справочник на случай чрезвычайной ситуации для домашних животных

Это практическое справочное руководство содержит информацию о первой помощи, оценке болезней и травм, а также список токсичных продуктов.Простое в использовании руководство также поможет вам предвидеть проблемы с советами по планированию действий в чрезвычайных ситуациях, включая руководство по подготовке к стихийным бедствиям и выживанию. Цена: $ 15

Марля

California Basics 24 рулона марлевой повязки

Эта легкая белая медицинская марля без латекса — отличное средство первой помощи, которое нужно иметь при себе в случае получения травмы для вас или вашей собаки. Цена: 13 долларов

Бинты с антипригарным покрытием

Самоклеящаяся повязка ECO-FUSED

Этот набор из шести самоклеящихся водоотталкивающих бинтов отлично подходит для собак, не прилипая к их шерсти.Потребители ценят эти недорогие бинты и хвалят их успешную нескользящую поддержку. Цена: $ 10

Клейкая лента

Самоклеящаяся обмоточная лента Fou

Эти самоклеящиеся бинты эластичны и пропускают воздух, а длина каждого рулона составляет пять ярдов, что гарантирует, что вы никогда не выберетесь в случае неотложной помощи. Цена: $ 10

Ватные шарики

Ватные шарики из органического хлопка

Эти впитывающие шарики из органического хлопка очень мягкие и могут использоваться как для применения лекарств, так и для очистки порезов или ран, принадлежащих вам или вашему щенку. Цена: $ 3

Перекись водорода

365 Повседневная перекись водорода

Антисептик, например перекись водорода, всегда полезно иметь под рукой в ​​аптечке, чтобы предотвратить заражение в случае травмы. Цена: $ 2

Спрей / мазь с антибиотиками

Vetericyn Гидрогель для ухода за ранами и кожей

Сделано в США, эту быстродействующую нетоксичную мазь можно использовать для лечения порезов, язв, сыпи, сухой кожи и аллергии, и она безопасна для собак при случайном проглатывании, что делает ее отличным средством экстренной помощи. Цена: $ 19

Молоко магнезии

Свежее мятное молоко и жидкое магнезиальное молоко Phillips ’

Молоко магнезии и древесный уголь можно использовать для поглощения и противодействия ядам, но сначала обязательно проконсультируйтесь с ветеринаром, чтобы определить, какая доза может быть безопасной для вашей собаки. Цена: $ 24

Цифровой термометр

Цифровой медицинский термометр

Признанный лучшим выбором Amazon среди оральных термометров , гибкий наконечник, доступность и точные показания делают этот продукт надежным приобретением и полезным элементом для включения в свой набор. Цена: $ 14

Таблетка для лекарств

Влагостойкий органайзер для таблеток

Прочный органайзер для таблеток, не содержащий бисфенола А, является влагонепроницаемым и имеет восемь больших отделений, что делает его особенно эффективным для собак, принимающих несколько лекарств. Цена: 13 долларов

Ножницы

Многоцелевые ножницы AmazonBasics

Набор из 3 8-дюймовых ножниц подходит как для левшей, так и для правшей, и они могут пригодиться, чтобы при необходимости обрезать бинты или марлю до нужного размера. Цена: $ 10

Пинцет

Набор пинцетов Guru

незаменим в любой аптечке, а с косыми наконечниками из нержавеющей стали эта точная пара будет полезна при выковыривании заноз из лапы вашей собаки или клещей из ее шерсти. Цена: $ 10

Увеличительное стекло

Увеличительное стекло SeeZoom с подсветкой

Это легкое стекло со светодиодной подсветкой позволяет увеличить изображение порезов, ран, осколков и т. Д. До трех раз с помощью ювелирной лупы. Цена: $ 15

Шприцы

Большой пластиковый шприц Frienda

Используйте пипетки или шприцы, чтобы промыть раны или дать собаке лекарства для приема внутрь. Эта нетоксичная упаковка из четырех шприцев индивидуально запечатана и подходит для кормления домашних животных. Цена: $ 7

Фонарик

Светодиодный тактический фонарь

У этой пары светодиодных фонарей есть пять режимов (низкий, средний, высокий, стробоскоп и SOS), они прослужат 50 000 часов и водонепроницаемы, что делает их долговечным светом, который удобно иметь под рукой в ​​экстренных случаях. Цена: $ 20

Полотенце

Банное полотенце для собак из микрофибры Bone Dry

Это супервпитывающее полотенце из микрофибры, которое можно стирать в машине, специально разработано для домашних животных. Его можно использовать в ненастную погоду или в другом месте. Цена: $ 10

Мягкая морда

Мягкая намордная крышка для собак

Ваша собака может взбеситься, если ее ранят или ранят, а намордник может помочь ей не укусить.Эта дышащая регулируемая сетчатая мордашка подойдет для собаки любого размера. Цена: 13 долларов

Поводок и ошейник

Набор прочных мягких поводков и ошейников для собак Azuza

В случае аварии или другой чрезвычайной ситуации ошейник вашей собаки может оторваться или поводок порвется. Убедитесь, что у вас есть запасной, например водостойкий светоотражающий набор. Цена: $ 17

Дорожные чаши

Складная миска для собак Awakelion

Переносная собачья миска незаменима для любого владельца собаки, который всегда на ходу.Нетоксичный и экологически чистый набор Awakelion состоит из одного контейнера для еды и двух мисок и вмещает примерно неделю еды. Цена: $ 20

AKC независимо выбрал каждый продукт, представленный в этой статье. Если вы покупаете продукт по этой статье, мы можем получить часть от продажи. Хотя мы делаем все возможное, чтобы часто обновлять ссылки, обратите внимание, что цены и предложения могут изменяться.

Что можно и чего нельзя делать в походах с собакой

В отеле El Portal Sedona мы делаем это редко — у нас есть приглашенный блогер.Но это так в нашем переулке, нам просто нужно было пригласить Джен из Your Dog Advisor в качестве нашего гостя. Мы пишем о правилах походов, подходящих для домашних животных, для всей семьи, но не о походах с собакой, поэтому мы надеемся, что вам это понравится, и, возможно, вы даже почерпнете кое-что из этого…

6 советов для пеших прогулок с собакой

Учиться на своих ошибках важно, но лучше действовать на опережение — особенно ради своего питомца. Мы расскажем, что можно и чего нельзя делать в походах с собакой, а также дадим некоторую важную информацию, которую вам нужно знать, прежде чем отправиться в путь со своим пушистым другом, чтобы вы были законными и были в безопасности.

Внимательно следите за собакой во время похода

За некоторыми исключениями, которые мы обсудим позже, большинство собак превзойдут вас в условиях, которые вы не выдержали бы с меньшей подготовкой и без снаряжения. Ваша собака крутая, и они это знают. К сожалению, такая стойкость может доставить вашей собаке серьезные неприятности.

Вы должны понимать, что ваша собака может только лаять, пялиться и, возможно, лапать вас для своих нужд. Вы, как владелец, должны следить за своей собакой и ее состоянием, делать заметки и читать их.Вы также должны быть готовы как к себе, так и к своей собаке, поскольку отсутствие подготовки может привести к серьезным проблемам.

Это стало очевидным в то жаркое лето в Айдахо, когда мы с мужем, нашим миксом Blue Heeler Pointer, отправились в путешествие туда и обратно, пролетев запланированное расстояние и пересекли лицо под постоянным воздействием солнца без тени, чтобы быть нашел. Хотя мы поддерживали нас троих хорошо гидратированными, мы чувствовали, что жара берет свое, и понимали, что скоро у нас закончится вода.Обезвоживание быстро наступало, когда мы проложили свой путь к тропе.

Простая ошибка, заключающаяся в неправильном планировании нашей тропы и недостаточном количестве воды, привела к ситуации, которая могла закончиться намного хуже, чем это было. Сделайте должную осмотрительность и перепроверьте. На несколько фунтов больше воды лучше, чем на несколько фунтов меньше и плохой сценарий.

Также хорошо собрать достаточно еды для вас и вашей собаки. Пусть лишний вес в рюкзаке напомнит вам, что жизнь вашей собаки в ваших руках.И всегда помните, что если в рюкзаке мало места, вода всегда будет важнее еды. Хотя это может быть неудобно, исчерпание еды не так важно, как отсутствие воды; поскольку ваша собака может функционировать и даже процветать, находясь в состоянии временного голодания.

Учитывайте возраст вашей собаки при планировании похода

Несмотря на то, что ваш щенок крепок, некоторые собаки, возможно, исчерпали его в ранние годы своей жизни. За старыми собаками в походах нужно внимательно ухаживать.Дисплазия тазобедренного сустава, артрит, травмы суставов и мышц и другие медицинские проблемы гораздо более заметны у пожилых собак, особенно у тех, кто предрасположен к определенным осложнениям со здоровьем.

Это не значит, что вы не должны брать с собой старшеклассника на тропу. Физические упражнения и прогулки на свежем воздухе — два лучших занятия для собаки, которая давно в зубах. Быть родителем собаки означает найти грань между переутомлением старых суставов и принуждением вашего щенка оставаться сильным. Как уже говорилось ранее, наблюдайте за своей собакой как за ястребом.

Часто проблемы могут остаться незамеченными, так как ваша собака будет обладать силой воли, питаемой любовью к тропе. Идя за своим питомцем и позволяя ему жить своей лучшей жизнью на тропе, вы можете оценить уровень его комфорта по скорости и частоте остановок. Вы также должны следить за неравномерным шагом и любой хромотой, которая может возникнуть, что указывает на состояние, на которое следует обратить внимание.

Держите свою внучку на плаву сквозь годы. Выбирайте походы с небольшим уклоном и спуском и с устойчивым грунтом.Прогулки по валунам, сланцы и крутые участки корней должны быть заменены красивыми прогулками по суглинку к озеру, лучше всего — прогулки с хорошими остановками ручьев по пути!

Вам также следует облегчить нагрузку в рюкзаке вашей собаки, если она есть, или просто нести нагрузку самостоятельно. Это позволит вашей собаке двигаться естественно и избавит ее от лишнего веса. Просто будьте внимательны и подбадривайте свою собаку, делая ее счастливыми в старости. Дайте им удовольствие быть впереди и направлять вас.Как говорят на островах Малайзии: «Ты счастлив, я счастлив!»

Убедитесь, что ваша собака обучена и у нее хороший характер

Вы захотите рассмотреть поведение и личность вашего питомца. Если ваша собака агрессивна по отношению к другим собакам или людям, особенно важно, чтобы вы с умом выбрали свое местоположение. У многих людей есть собаки, которых спасают и которые претерпевают изменения в своей жизни. Однако многие из этих собак никогда полностью не отказываются от своих старых привычек и могут быть очень нервными из-за потенциала агрессии.

Этим собакам нужна терапия походами, но это может быть проблемой. Найдите походы и места, которые находятся вдали от людей и других животных. Обеспечьте достаточное уединение, чтобы эти собаки попали в свою зону и разрядили немного энергии и напряжения. Кормите их новой целью, пока они идут дальше без возможности причинения какого-либо вреда.

Обратите внимание, что опасная и агрессивная собака, которая еще не освоена в достаточной степени, чтобы находиться под разумным контролем, не должна выводиться на публику.Если вы опасаетесь возникновения конфликта между вашей собакой и другим человеком или собакой, примите много мер предосторожности, чтобы убедиться, что вы путешествуете в одиночку в месте, не посещаемом обычными туристами. Все собаки заслуживают шанса, но необходимо проявить усердие, чтобы предотвратить возможные физические и юридические дилеммы.

Знать законы земель

Собака — красивое существо, которое управляет связью с природой и дает шанс воплотить в жизнь инстинктивные цели. Хотя ваша собака живет только по законам природы и физики, вы, хозяин, живете в мире порядка и правил.

У меня плохие новости, многие земли, которые являются законными для вас, не всегда могут быть законными для вашей собаки. Если вы планируете поход своей мечты по одному из чудес света со своим щенком, возможно, вам придется перенести его.

Национальные парки предлагают одни из самых эпических походов, которые только можно найти, поскольку они сохраняют невероятные земли и защищают их от индустриализации, перенаселенности и несбалансированного притока видов, которые могут стать разрушительными. К сожалению, обыкновенная домашняя собака может представлять угрозу этому первозданному равновесию в национальных парках.

Походные тропы в национальных парках закрыты для собак. Единственное исключение — для тех, кто участвует в походах, таких как тропа Тихоокеанского гребня, которая пересекается с парками. Не отказывайтесь пока от всей поездки в парк. Автокемпинги и места дневного использования прекрасно подходят для привоза вашей собаки, если соблюдаются требования к привязи в парке (длина поводка не превышает 6 футов, если не указано иное). Это позволяет вам и вашим близким наслаждаться одними из самых красивых мест, не нарушая при этом естественный порядок.Просто не планируйте никаких дневных походов, так как оставить собаку в машине или в лагере может быть реальной проблемой.

За пределами национальных парков

Так как походы в национальный парк выходят за рамки пеших прогулок, вам предстоит еще бесконечное количество исследований, которые можно исследовать вместе с вашей собакой. Большинство походов для собак, вероятно, будет найдено в ваших местных государственных парках и национальных лесах. Здесь обычно приветствуют собак, и у них, вероятно, будет возможность встретить других щенков, привязанных к пику.

Здесь, в штате Вашингтон, я часто использую веб-сайт Washington Trails Association, чтобы найти подходящие для собак маршруты.Есть много других сайтов, подобных этому, которые действуют в разных штатах, просто выполните быстрый поиск в Google, и вы найдете информацию о тропах в вашем районе и законах, которые их окружают. На этих сайтах вы найдете подробную информацию о сложности похода, расстоянии, направлениях GPS и изображениях. Некоторые сайты даже включают свежие отчеты о тропах от реальных людей, которые недавно прошли по тропе!

К счастью, в большинстве государственных парков разрешено брать с собой собаку на тропу, но законы о поводках различаются от штата к штату; Аризона — требуется поводок — поводок не более 6 футов.

Положите правильное снаряжение в рюкзак и собаку

Как показывает предыдущий рассказ, во время прогулки с собакой очень важно быть готовым. Какими бы самодостаточными ни были собаки, они действительно зависят от вас в том, чтобы держать их в безопасности, кормить и пить. Вы должны убедиться, что у вас есть необходимое снаряжение на тот период времени, когда вы отсутствуете, и спланировать возможные ошибки.

Наряду с достаточным количеством воды и здоровой пищей, вы хотите принести своему питомцу какой-нибудь поилочный прибор.Вы можете найти действительно классные складные пакеты в R.E.I., но вы также можете свернуть края пластикового пакета для сэндвичей, чтобы сделать для своей собаки красивую миску, которая практически ничего не весит. Просто держите несколько штук в стае или в стае вашей собаки. Кроме того, любой легкий турист знает, насколько невероятным может быть застежка-молния для множества жизненных ситуаций на открытом воздухе.

Здоровая, подтянутая и подвижная молодая или взрослая собака может носить свою собственную стаю. Однако, если вы решили оснастить свою собаку одним из этих радикальных тактических жилетов, с вашей стороны следует сделать несколько ключевых вещей.

Прежде всего, убедитесь, что ваша собака способна нести вес. Мы уже упоминали, что у старых собак и тех, у кого есть медицинские ограничения, могут возникнуть проблемы с этим. Молодой атлет собаки будет намного лучше нести такие грузы, как собственная бутылка с водой.

Если вы чувствуете себя комфортно с рюкзаком на вашей собаке, следующий шаг, который вам нужно сделать, — это соответственно определить размер вашей собаки. Хотя веб-сайты могут помочь вам определить размер упаковки по возрасту, породе, росту и длине вашей собаки, нет лучшего способа определить размер вашей собаки, чем примерить рюкзаки.

— отличный способ снять небольшую нагрузку с вашей спины, заставив вашего приятеля накачать мышцы. Но вы должны быть осторожны; пакеты никогда не должны быть перегружены. Всегда взвешивайте общий вес ранца вашей собаки, когда он полностью загружен, и следите за тем, чтобы он не превышал 15% от общего веса вашей собаки. Кроме того, убедитесь, что он правильно закреплен и не перетянут, так как это может привести к чрезмерному давлению на грудь и ребра вашей собаки. Наконец, никогда не используйте тяжелый рюкзак, из-за которого вашей собаке станет жарко при высоких температурах.

Другой полезной вещью для вашей следовой собаки может быть набор обуви. Некоторым это может показаться смешным, но обувь для собак действительно может спасти лапы вашего щенка, если ему поручено взбираться вместе с вами по сланцу, и может защитить от ожогов горячим песком или цементом, а также варежки, если вы путешествуете по большому количеству льда.

Вы также должны обязательно включить в рюкзак своей собаки или в свой мешок для какашек, светящуюся палочку или лампу для ошейника для ночных походов и легкий поводок с карабином, чтобы упростить стрижку и который будет бесконечно полезен, если ваша собака не бегает. -повязать.

Надейся на лучшее, приготовься к худшему

Никто никогда не хочет думать о том, что их младенцы пострадают, и, тем более, люди планируют, что делать в случае, если это действительно произойдет. Какими бы выносливыми ни были собаки, они все же подвержены травмам. За последние 2 года мне приходилось отвезти свою собаку к ветеринару три раза из-за травм в походах; поверьте мне, ребята, это происходит намного проще, чем вы думаете.

Существуют способы предотвратить травмы, например, убедиться, что ваша собака не прыгает на что-нибудь острое или на что-то острое, держать ее на безопасном расстоянии от падений и уступов, а также научить ее не выходить за границы, установив вызов команды, которые их останавливают.Итак, что вы будете делать, если травма все же случится на тропе? В дополнение к вещам, которые вы должны взять с собой, вы должны взять с собой несколько рулонов бинтов, немного изопропилового спирта и несколько палочек, найденных на тропе. Вот несколько шагов, которые нужно предпринять в случае травмы:

1. Не паникуйте
2. Оценить ущерб
3. Лечите травму как можно лучше с того места, где вы находитесь
4. Если возможно, носите собаку
5. Относитесь к своему автомобилю как можно лучше
6. При необходимости отнести к ветеринару

Вы провели исследование, нашли свой след, упаковали все припасы и спланировали самое худшее — вы готовы! Теперь пришло время сделать самый важный шаг из них всех — насладиться видами, звуками и потрясающей красотой природы вместе с вашим лучшим пушистым другом.

Выйти на природу так важно для того, чтобы избавиться от нашей порой стрессовой и монотонной жизни, а привезти с собой питомца — отличный способ расслабиться, сблизиться и насладиться красотой, которую может предложить этот мир. Удачных походов тебе и твоему лучшему другу!

В El Portal Sedona Hotel, самом благоприятном для домашних животных отеле Седоны, мы хотим поблагодарить Джен из Your Dog Advisor
за эти проницательные и полезные советы!

Отель El Portal Sedona 1.800.313.0017

Как заставить собаку перестать копать

Комфорт и защита

В жаркую погоду собаки могут вырыть ямы, чтобы лечь в прохладную грязь.Они также могут копать, чтобы укрыться от холода, ветра или дождя или найти воду. Ваша собака может копать для комфорта или защиты, если:

• Ямы находятся возле фундаментов зданий, больших тенистых деревьев или источника воды.
• У вашей собаки нет приюта или в приюте слишком жарко или холодно.
• Ваша собака лежит в вырытых ямах.

Что делать

Обеспечьте вашей собаке комфорт или защиту, которые они ищут. Чаще приносите их внутрь и убедитесь, что их укрытие на открытом воздухе удобно, защищено от экстремальных температур и имеет доступ к воде в непрокрываемой миске.Если ваша собака по-прежнему увлечена копанием, попробуйте выделить зону для копания.

Внимание

Любое поведение может стать поведением, привлекающим внимание, если собака узнает, что ей уделяется внимание за то, что она этим занимается. Помните, что даже наказание — это внимание. Ваша собака может искать внимания, если копает в вашем присутствии или имеет ограниченные возможности для взаимодействия с вами.

Что делать

Не обращайте внимания на привлечение внимания и хвалите собаку за «хорошее собачье» поведение.Кроме того, убедитесь, что вашей собаке достаточно времени для прогулок и игр с вами каждый день.

Побег

Собаки могут пытаться убежать, чтобы добраться до чего-то, чтобы куда-то добраться или убежать от чего-то. Ваша собака может копать, чтобы убежать, если она будет копать под забором или вдоль него.

Что делать

Выясните, почему ваша собака пытается убежать, и устраните эти стимулы. Убедитесь, что их окружение является безопасным и привлекательным для собаки.

Чтобы держать собаку во дворе:

• Закопать проволочную сетку у основания забора.Обязательно закатайте острые края подальше от двора.
• Поместите крупные камни, частично засыпанные, вдоль нижней части линии забора.
• Закопайте нижнюю часть забора на 1-2 фута ниже поверхности.
• Установите ограждение из цепных звеньев на землю (прикрепите якорь к нижней части забора), чтобы вашей собаке было неудобно ходить возле забора.
• Поработайте со своей собакой над изменением поведения, чтобы остановить попытки к бегству.

Что не работает

Независимо от причины, по которой ваша собака копает, не делайте этого:

• Наказать собаку постфактум.Это не устранит причину такого поведения и ухудшит любое копание, вызванное страхом или тревогой.
• Поставьте собаку на стойку возле вырытой ямы или залейте ее водой.

Следующие шаги: Зона копания

Если ваша собака — увлеченный землекоп, выделите во дворе участок, где ей можно копать, и научите ее, где находится эта зона копания:

• Засыпать рыхлым грунтом или песком. Или используйте песочницу размером с ребенка.
• Сделайте зону раскопок привлекательной, закопав безопасные предметы (например, игрушки), чтобы они могли их обнаружить.
• Когда они копают в зоне копания, наградите их похвалой.
• Если вы поймали свою собаку копающей в неприемлемом месте, прервите ее поведение громким звуком и твердо скажите: «Не копать». Затем сразу же отнесите их в зону копания.
• Сделайте непривлекательные места для копания (хотя бы временно), положив на них камни или проволочную сетку.

Если вы испробовали все эти стратегии и все еще не можете решить проблему копания вашей собаки, держите ее дома при себе и наблюдайте за ней во время перерывов в туалете во дворе.