Кредит 68 04 1 что значит в 2019 году
1С:Бух-466, обычная система налогообложения, применяется ПБУ-18.
Кредитовое сальдо на сч.68.4.1 означает: сколько налога на прибыль следует перечислить в бюджеты.
Подскажите, пожалуйста, что означает сальдо на 01.01.2005 по сч. 68.4.2?
«Как я понимаю дела со счетом 68,4 обстоят так:
По субсчету 68,4,1 «Расчеты с бюджетом» отражаются перечисления в бюджет например авансовые платежи по налогу на прибыль в течении года.
По субсчету 68,4,2 «Расчет налога на прибыль» ведется собственно расчет налога на прибыль, все проводки формирующие налог на прибыль корреспондируют с этим субсчетом. Например: 09 68,4,2; 68,4,2 77; 99,2,3 68,4,2.
В итоге по итогам года вы получаете по счету 68,4,2 сумму налога на прибыль начисленного, по счету 68,4,1 сумму перечисленных авансовых платежей. Завершающей проводкой в конце года Дт 68,4,2 КТ 68,4,1 на сумму начисленного по итогам года налога на прибыль (в случае если налог на прибыль имеется) вы перекроите задолженность по сч 68,4,2, а по счету 68,4,1 получите сумму причитающейся доплаты или возврата из бюджета.
Сальдо на 68.04.1.
Подскажите , если на 68.04.1 «Расчеты с бюджетом» дебетовое сальдо на конец отчетного периода, что это значит?
Уплачено больше, чем начислено + НДС к возмещению
если все верно проведено — убыток в сумме 68.4.1 * 0,24
этот остаток надо на 09 счет перенести
Аноним, у вас 1С? стандартный план счетов?
если да, то это значит, что вы переплатили налог на прибыль.
возможна и переплата.
да у меня стандартная 1С 8.1 . и остаток висит по Дебету= 298р , значит переплата. Что делать в данной ситуации?
прибыль по сравнению с полугодием меньше стала?
прибыли в 3 квартале вообще не было.
тогда что-то не так в проводках.
еще потуплю!
Подскажите!!
сальдо по Д 90.09 что значит??
сальдо по Кредиту 99 что значит?
бух прибыль от деят-ти
и за полугодие прибыли не было, по 68.
04.1 дебетовый остаток 318,44.
И за девять месяцев тоже нет прибыли, но остаток на 68.04.01 уже увеличился до 1170р.
Почему, подскажите!!
налоговый убыток какой по расчету 9 мес?
помогите уважаемые бухгалтера выяснить почему появляется этот дебетовый остаток на 68.04.1 !! Очень прошу, уже запуталась вся!
по итогам 9 мес у вас бухгалтерская прибыль 91+90=3777,24 налог на прибыль 906,5 (К 68.4.1), а по дебету у вас была оплата за 4 кв 2007 г плюс авансовый платеж за 1 кв . Че вас смущает?
смущает, то , что у нас во 2кварт, и в 3кв выручки вообще не было,откуда прибыль взялась?
судя по вашим данным — прибыль взялась в 1 кв
если , я сейчас уплачиваю, налог на прибыль, то сальдо по Дебету 68.04.1 увеличивается. Разве так должно быть?
а зачем вам сейчас уплачивать налог, он у вас оплачен 21.
04.08, а сейчас висит переплата
04.08, а сейчас висит переплатапо итогам полугодия, у меня получается переплата 318,44. За полугодие я ничего не уплачивала.
а по итогам 9мес, у меня эта переплата увеличивается до 1170,16р.
Почему ? И как мне нужно сейчас поступить?
у вас доходов нет, после 1 квартала, а расходы есть и они уменьшают вашу прибыль полученную еще в 1 кв.
это понятно, но вот при автоматическом заполнение декларации на прибыль в 1С у меня на листе 02, заполняется, что я должна уплатить в ФБ 360, а в РБ 969. А по идее должно быть к возмещению!!
КАК поступить в данной ситуации??
*БУКА*, налог на прибыль заполняется нарастающим итогом.
Если вы в 1 кв. 2008г. получили прибыль, начислили налог и заплатили его, а за полугодие получили убыток, то начиления по 1 кв. вы должны отсторнировать в июне. Таким образом вы получаете свою переплату. Далее, если за 9 месяцев у вас опять прибыль, то вы должны опять начислить налог уже по итогам 9 месяцев и таким образом вы увидите в карточке 68..id-o_1bhf40oaonug1qrfbai16hr1013d.jpg)
Последний раз редактировалось Настя; 16.10.2008 в 12:10 .
На каких счетах учитывается сумма налога на прибыль?
Налог на прибыль какой счет – такой интернет-запрос совсем нередок среди начинающих бухгалтеров. Рассмотрим алгоритм учета этого налога и узнаем, какие счета используют в целях его формирования и для учета расчетов по нему.
Налог на прибыль – какой счет применять для учета?
Для учета данного налога используют субсчет к счету 68.
В бухгалтерской программе 1С ему присвоен номер 68.04, а к нему, в свою очередь, привязаны два субсчета: 68.04.1 «Расчеты с бюджетом» и 68.04.2 «Расчет налога на прибыль».
Если вы не применяете ПБУ 18/02, то вопрос, какой счет налога на прибыль использовать, решается легко: налог начисляют проводкой Дт 99 Кт 68.04.1, и сразу относят на субсчет учета расчетов с бюджетом.
Если же компания применяет ПБУ 18/02, то формирование суммы налога на прибыль осуществляется в бухучете через систему бухгалтерских проводок с участием субсчета 68.04.2. В результате на субсчете 68.04.2 при начислении налога к уплате должна образоваться сумма, зафиксированная в декларации. Затем итоговую сумму субсчета 68.04.2 полностью закрывают на субсчет 68.04.1, где налог разделяется по бюджетам. На нем же учитываются дальнейшие расчеты с бюджетом по начисленной к уплате сумме.
О том, на какие моменты необходимо обратить внимание при заполнении декларации, см. этот материал.
Учет налога на прибыль с применением ПБУ 18/02 и без
Когда фирма не применяет ПБУ 18/02, в ее учете доходы и расходы подразделяют на учитываемые и не учитываемые для осуществления расчета налога на прибыль, который в данном случае очень прост, как и проверка правильности его начисления: достаточно сверить бухгалтерские и налоговые регистры.
Варианты проводок по начислению налога на прибыль и авансовых платежей, если организация не применяет ПБУ 18/02, вы можете посмотреть в КонсультантПлюс. Пробный полный доступ к правовой системе можно получить бесплатно.
Применение ПБУ 18/02 позволяет проследить всю схему формирования налога с учетом разниц между бухучетом и налоговым учетом.
Важно! Рекомендация от «КонсультантПлюс»
При применении ПБУ 18/02 отдельную проводку по начислению налога на прибыль в учете делать не надо. Сумма текущего налога на прибыль складывается из следующих составляющих…
Алгоритм начисления налога смотрите в К+.
Таким образом, ответ на вопрос, какой счет налога на прибыль используется для его учета, зависит от конкретной ситуации. В любом случае, для этих целей применяется дебет счета 68.
Более полную информацию по теме вы можете найти в КонсультантПлюс.
Пробный бесплатный доступ к системе на 2 дня.
Счет 68 04 в бухгалтерском учете — дебетовое сальдо по счету 68
Синтетический и аналитический учет расчетов по налогу на доходы физических лиц.
Во всех случаях суммы оборотов по кредиту счета 68 отражаются в корреспонденции с дебетуемыми счетами. В конце месяца по дебиту считываются итоги за месяц и сальдо на начало следующего месяца по определенным дебиторам (кредиторам) и в целом по ведомости.
Обороты по кредиту счетов за месяц в разрезе корреспондирующих счетов переносятся в журнал ордер №8.
Синтетический учет по счету 68 «Расчеты по налогам и сборам» ведется в оборотном балансе, куда записываются остатки и обороты из оборотной ведомости по аналитическим счетам. Итоги оборотной ведомости по аналитическим счетам сверяют с итогами соответствующего синтетического счета – они обязательно должны быть равны.
Счёт 68.04.2
После записи оборотов и сальдо по всем субсчетам, включаемым в оборотно-сальдовую ведомость, итоговое сальдо по счету 68 переносится в Главную книгу.
При составлении баланса дебетовый остаток по счету 68 отражается в его активе, а кредитовый — в пассиве.
Кредитовый оборот по счету 68 показывает начисление задолженности предприятия бюджету по налогам, а дебетовый оборот свидетельствует об уплате налогов в бюджет.
Кредитовое сальдо на конец отчетного периода по счету 68 «Расчеты по налогам и сборам» ведется по видам налогов. Так, к счету 68 в ООО «Инвенто» открыт субсчет 68-2 — «Расчеты по НДФЛ». На предприятии по каждому субсчету счета 68 ведутся накопительные ведомости, в которых указывается остаток на начало отчетного периода по дебету или кредиту, обороты по счету с указанием корреспондирующих счетов, подводятся итоги по дебету и кредиту и выводится остаток.
В соответствии с Инструкцией по применению Плана счетов начисление заработной платы сотрудникам организации отражается бухгалтерской проводкой Дебет счета 20 – Кредит счета 70. К 68 счету открыты субсчета по видам налогов
Удержанная сумма НДФЛ отражается по дебету счета 70 в корреспонденции с кредитом счета 68 «Расчеты по налогам и сборам» в последний день каждого месяца.
Перечисление налога в бюджет (проводка по дебету счета 68, субсчет- 2 «Расчеты по НДФЛ», и кредиту счета 51) производится в день, выдачи денег на руки персоналу.
Перейти на страницу: 12
Счет 68.04.1 — Расчеты с бюджетом
Счет 68.04.1 «Расчеты с бюджетом»
Общая информация о счёте:
Вид счета : Активно-пассивный
смотри также другие счета плана счетов:весь план счетов
смотри также ПБУ: все ПБУ
Характеристики/описание счёта:
Субсчет 68.04.1 «Расчеты с бюджетом» предназначен для обобщения информации о расчетах с бюджетом по налогу на доходы (прибыль) организаций. На данном счете не отражаются подробности расчета суммы налога на прибыль, производимого в соответствии с ПБУ 18/02 «Учет расчетов по налогу на прибыль».
Организации, не применяющие положения ПБУ 18/02, отражают начисление сумм налога на прибыль к уплате в бюджет (либо уменьшение сумм, причитающихся к уплате в бюджет), на данном субсчете в корреспонденции со счетом 99.
01 «Прибыли и убытки».
Организации, применяющие положения ПБУ 18/02, отражают начисление сумм текущего налога на прибыль к уплате в бюджет (либо уменьшение сумм, причитающихся к уплате в бюджет), на данном субсчете в корреспонденции с субсчетом 68.04.2 «Расчет налога на прибыль».
Аналитический учет ведется по бюджетам, в которые налог подлежит зачислению (субконто «Уровни бюджетов»). Субконто могут принимать значения:
— «Федеральный бюджет»,
— «Региональный бюджет»,
— «Местный бюджет».
Описание родительского счета: Описание счета 68.04 «Налог на прибыль»
Хозяйственные операции:
«Ввод начальных остатков: налог на прибыль»
Дебет
000 «Вспомогательный счет» Кредит 68.04.1 «Расчеты с бюджетом«Каким документом делается в 1с:Бухгалтерия 2.0/1с:Бухгалтерия 3.0:
— Ввод начальных остатков в меню «Предприятие» вид операции: «Расчеты по налогам и сборам (счета 68, 69)»
«Перечисление денежных средств с расчетного счета организации в счет погашения задолженности перед бюджетом по налогу на прибыль»
Дебет
68.
04.1 «Расчеты с бюджетом» Кредит 51 «Расчетные счета«Каким документом делается в 1с:Бухгалтерия 2.0/1с:Бухгалтерия 3.0:
— Списание с расчетного счета в меню «Банк» вид операции: «Перечисление налога»
«Начисление налога на прибыль для организаций, применяющих ПБУ 18/02»
Дебет
68.04.2 «Расчет налога на прибыль» Кредит 68.04.1 «Расчеты с бюджетом«Каким документом делается в 1с:Бухгалтерия 2.0/1с:Бухгалтерия 3.0:
— Регламентная операция в меню «Операции — Закрытие месяца» вид операции: «Расчет налога на прибыль»
«Начисление налога на прибыль для организаций, не применяющих ПБУ 18/02»
Дебет
99.01.1 «Прибыли и убытки по деятельности с основной системой налогообложения» Кредит 68.04.1 «Расчеты с бюджетом«Каким документом делается в 1с:Бухгалтерия 2.0/1с:Бухгалтерия 3.0:
— Регламентная операция в меню «Операции — Закрытие месяца» вид операции: «Расчет налога на прибыль»
Интересные статьи
Добавление своих счетов и субсчетов
- Создано 24. 06.2013 23:37
- Опубликовано 24.06.2013 23:37
- Автор: Administrator
- Просмотров: 67013
06.2013 23:37Очень часто мои клиенты-бухгалтеры высказывают пожелания немного изменить стандартный план счетов — добавить в него новые субсчета или изменить состав субконто. В некоторых случаях такие изменения никак не отражаются на функционировании программы, а иногда могут возникнуть определенные трудности.
Но прежде чем писать о трудностях, мне хочется немного рассказать о том, какими способами можно добавлять свои счета в план. Самый простой способ, доступный каждому из вас — добавление счетов в пользовательском режиме, для этого нужно просто зайти в план счетов, нажать кнопку «Добавить» (плюсик) и заполнить все поля. Счета, добавленные таким образом, можно корректировать и удалять при необходимости. Другой способ — добавление новых счетов в режиме конфигуратора, такие счета могут добавлять программисты и их нельзя будет удалить или откорректировать в ходе обычной работы в программе.
Такие счета в плане помечены желтой точкой возле буквы Т.
То есть получается, что Вы не сможете изменить те счета, которые уже существуют в программе и те счета, которые специально для вашей организации могут добавить программисты. Однако можете с легкостью добавлять сколько угодно своих собственных счетов и поступать с ними, как Вам захочется.
А теперь давайте разберемся, зачем вообще нужно изменять план счетов? Очень часто я слышу просьбу добавить субсчета к 20 счету, особенно от клиентов, которые раньше работали на 1С версии 7.7. Например, они привыкли делить затраты по разным видам деятельности и для этого использовали счета 20.01, 20.02, 20.03 и т.д. Каждый раз при появлении нового вида деятельности — добавляли новый субсчет (на рисунке выше показан именно такой вариант). Им так было удобно и эта система прекрасно работала в 7.7.
Однако, в 1С: Бухгалтерии 8 добавление аналогичных субсчетов приведет к проблемам при закрытии месяца — суммы на этих счетах могут просто «зависнуть», потребуются дополнительные настройки или доработки процедуры закрытия месяца.
А внесение изменений в конфигурацию программы при всех очевидных плюсах для пользователей имеет и определенные минусы, подробнее об этом рассказывается в статье Стоит ли дорабатывать программу под особенности организации.
Таким образом, добавление субсчетов к 20 счету может оказаться непростой задачей, к тому же, существует другая возможность разделить затраты, используя стандартные механизмы программы. Для этих целей подойдет субконто «Номенклатурные группы». Достаточно лишь внести названия видов деятельности, которые осуществляет ваша организация, в справочник номенклатурных групп и выбирать их в документах. Это очень простой и удобный способ, который позволит Вам видеть необходимые данные в оборотно-сальдовой ведомости по счету.
Еще одно распространенное пожелание — добавление новых субсчетов к счетам расчетов с контрагентами (62, 76, 60). В данном случае проблем несколько. Первая из них — остатки по добавленным субсчетам не будут попадать в бухгалтерский баланс. Соответственно, об этом нужно всегда помнить и не удивляться, когда актив не будет сходиться с пассивом.
В таком случае придется либо корректировать баланс вручную, либо дорабатывать алгоритм его заполнения в конфигураторе. Вторая проблема — при поступлении предоплаты от покупателей не будут автоматически формироваться счета-фактуры на полученный аванс, а это может привести к искажению суммы начисленного НДС.
Точно такие же проблемы с попаданием данных в баланс возможны и при добавлении субсчетов к другим счетам учета. Но перечислять здесь все счета, которые можно и нельзя редактировать, не имеет смысла, потому что алгоритм заполнения баланса часто корректируется разработчиками, они исправляют недочеты, сами добавляют новые счета и субсчета, чтобы программа отражала все изменения законодательства. Поэтому просто запомните, что если по каким-либо причинам Вы решили, что внесение изменений в план счетов неизбежно, нужно обязательно проверить, корректно ли заполняется отчетность после Ваших корректировок. И если актив и пассив не сходятся, то первым делом нужно проверить, не равна ли сумма расхождения остаткам по добавленным Вами счетам?
И конечно, прежде чем решиться на изменение плана счетов, стоит как следует подумать, а нельзя ли решить ваши задачи стандартными средствами программы? Если Вам нужно помочь разобраться с этим вопросом, пишите, буду рада подсказать 🙂
А если вам нужно больше информации о работе в 1С: Бухгалтерии предприятия 8, то вы можете бесплатно получить нашу книгу по ссылке.
Понравилась статья? Подпишитесь на рассылку новых материалов
Добавить комментарий
68 счет
ТИПОВОЙ ПЛАН СЧЕТОВ БУХГАЛТЕРСКОГО УЧЕТА. ХАРАКТЕРИСТИКА СЧЕТОВ РАЗДЕЛА VI «РАСЧЕТЫ». СЧЕТ 68 «РАСЧЕТЫ ПО НАЛОГАМ И СБОРАМ»Счета этого раздела предназначены для обобщения информации о всех видах расчетов организации — с различными юридическими и физическими лицами, а также внутрихозяйственных расчетов.
Расчеты в иностранных валютах учитываются на счетах этого раздела в белорусских рублях в суммах, определяемых путем пересчета иностранной валюты в установленном порядке. Одновременно эти расчеты отражаются в валюте расчетов и платежей.
Расчеты в иностранных валютах учитываются на счетах этого раздела обособленно, то есть на отдельных субсчетах.
Счет 68 «Расчеты по налогам и сборам»
На счете 68 «Расчеты по налогам и сборам» обобщается информация о расчетах с бюджетом по налогам и сборам, уплачиваемым организацией, и налогам с дохода ее персонала.
Порядок исчисления и уплаты налогов регулируется законодательными и другими нормативными правовыми актами.
К счету 68 «Расчеты по налогам и сборам» могут быть открыты субсчета:
68-1 «Налоги и отчисления, включаемые в себестоимость продукции, работ, услуг»;
68-2 «Налоги, уплачиваемые из выручки от реализации товаров, продукции, работ, услуг»;
68-3 «Налоги, уплачиваемые из прибыли (дохода)»;
68-4 «Налоги на доходы физических лиц»;
68-5 «Прочие налоги, сборы и отчисления».
На субсчете 68-1 «Налоги и отчисления, включаемые в себестоимость продукции, работ, услуг» учитываются расчеты по чрезвычайному налогу и обязательным отчислениям в государственный фонд содействия занятости, земельному налогу (платежам за землю), налогу за пользование природными ресурсами и по другим налогам, включаемым в себестоимость продукции, работ, услуг.
На субсчете 68-2 «Налоги, уплачиваемые из выручки от реализации товаров, продукции, работ, услуг» учитываются расчеты по налогу на продажу товаров в розничной торговой сети, налогу на добавленную стоимость, акцизам, налогу с продаж автомобильного топлива и другим налогам, уплачиваемым из выручки от реализации продукции, работ, услуг.
На субсчете 68-3 «Налоги, уплачиваемые из прибыли (дохода)» учитываются расчеты по налогам на недвижимость, прибыль и доходы, игорный бизнес и другим налогам, уплачиваемым из прибыли (дохода) организации.
На субсчете 68-4 «Налоги на доходы физических лиц» учитываются расчеты по подоходному налогу с физических лиц.
На субсчете 68-5 «Прочие налоги, сборы и отчисления» учитываются расчеты по налогу на доходы иностранных юридических лиц, на приобретение автотранспортных средств, на рекламу и другим налогам и сборам, вводимым местными Советами депутатов на территориях своих административно-территориальных единиц.
Счет 68 «Расчеты по налогам и сборам» кредитуется на суммы, причитающиеся по налоговым декларациям (расчетам) к уплате в бюджеты.
Кроме того, по кредиту счета 68 «Расчеты по налогам и сборам» в корреспонденции с дебетом счета 99 «Прибыли и убытки» отражаются суммы начисленных налоговых санкций и пени, а также административных штрафов, госпошлины, подлежащие уплате в бюджет.
По дебету счета 68 «Расчеты по налогам и сборам» отражаются суммы, фактически перечисленные в бюджет, а также суммы налога на добавленную стоимость, списанные с кредита счета 18 «Налог на добавленную стоимость по приобретенным товарам, работам, услугам».
Реструктуризация кредиторской задолженности по налогам и сборам в бюджет в соответствии с законодательством отражается по дебету счета 68 «Расчеты по налогам и сборам» в корреспонденции с кредитом счета 75 «Расчеты с учредителями» или счетов учета расчетов.
Предоставленная отсрочка и (или) рассрочка по уплате налогов и сборов в соответствии с законодательством отражается в бухгалтерском учете на отдельном субсчете к счету 68 «Расчеты по налогам и сборам».
При перечислении в бюджет налогов и сборов, налоговых санкций и пени, а также административных штрафов, госпошлины производится запись по дебету 68 «Расчеты по налогам и сборам» в корреспонденции с кредитом счетов учета денежных средств.
Аналитический учет расчетов по налогам и сборам ведется по каждому виду платежей.
Динамика курса Доллара США к рублю по ЦБ РФ, прогноз на завтра, график изменений колебания курса Американского Доллара за неделю, месяц и за год, конвертер, котировки валюты на сегодня
Доллар США – официальная валюта Соединенных Штатов Америки. Банковский код — USD. Обозначается знаком $. 1 доллар равен 100 центам. Номиналы банкнот в обращении: 100, 50, 20, 10, 5, 2 (сравнительно редкая банкнота), 1 доллар, а также монеты 1 доллар, 50, 25, 10, 5 и 1 цент. Кроме того, существуют банкноты номиналом 500, 1 000, 5 000, 10 000 и 100 000, которые использовались ранее для взаиморасчетов в рамках Федеральной резервной системы, однако с 1945 года более не выпускаются, а с 1969 года официально выведены из обращения, так как им на смену пришла электронная система платежей. Название денежной единицы, согласно наиболее распространенной версии, происходит от средневековой монеты талер, чеканившейся в Германии.
Традиционно на лицевой стороне доллара США изображаются президенты и политические деятели Соединенных Штатов.
На современных банкнотах это Бенджамин Франклин – 100 долларов, Улисс Грант – 50, Эндрю Джексон – 20, Александр Гамильтон – 10, Авраам Линкольн – 5, Томас Джефферсон – 2 и Джордж Вашингтон – 1 доллар. На оборотной стороне изображены памятники истории: 100 долларов — Индепенденс-холл, где была подписана Декларация независимости, 50 – Капитолий, 20 – Белый дом, 10 – Казначейство США, 5 – мемориал Линкольна в Вашингтоне. Банкнота в 1 доллар на обороте имеет особый рисунок, состоящий из двустороннего изображения так называемой Большой печати США, используемой для подтверждения подлинности документов, выпущенных правительством, и хранящейся в Вашингтоне.
Считается, что для противодействия печатанию фальшивых долларов дизайн необходимо менять не реже одного раза в 7-10 лет. При этом абсолютно все выпущенные банкноты США начиная с 1861 года, когда деньги были впервые эмитированы в бумажном виде, являются на территории Соединенных Штатов законным платежным средством.
Впервые решение о выпуске долларов США было принято конгрессом в 1786 году, а в 1792-м они стали основной расчетной валютой государства.
С 1796 года введен принцип биметаллической денежной единицы, то есть чеканились как серебряные, так и золотые монеты. При этом каждый раз в результате изменения соотношения цен на два драгоценных металла либо одни, либо другие монеты исчезали из обращения. До 1857 года на территории США иностранные деньги (прежде всего испанские песо, а позже мексиканские доллары) также служили законным платежным средством.
В 1900 году был принят закон о золотом стандарте. К этому моменту 1 доллар соответствовал 1,50463 грамма чистого золота. В 1933 году он впервые оказался девальвирован на 41% в результате Великой депрессии. Тройская унция золота стала стоить 35 долларов.
В конце Второй мировой войны в результате Бреттон-Вудского соглашения доллар стал единственной денежной единицей, обменивавшейся на золото, при этом курсы остальных мировых валют привязывались к американской. Одновременно в послевоенные годы Соединенные Штаты сделались основным кредитором Европы. Таким образом, доллар США превратился в мировую расчетную валюту и занял свое место в резервах центральных банков.
Однако уже к 1960 году хронический дефицит бюджета США привел к тому, что количество долларов, которыми владели кредиторы по всему миру, превысило размеры золотого запаса. Усложнил ситуацию кризис 1969-70 годов. В результате в 1971-м обмен долларов на золото был окончательно прекращен после соответствующего заявления президента Ричарда Никсона.
В течение 1970-х годов курс доллара снижался. Ситуация усугубилась кризисом 1975-76 годов. В 1976 году в результате международного соглашения была создана новая – Ямайская валютная система, которая окончательно узаконила отказ от золотого обеспечения валют.
Укрепление доллара в 1980-е поставило американских производителей в невыгодное положение относительно других стран. В результате было принято решение о девальвации доллара путем урезания процентных ставок. И к 1991 году удалось фактически вдвое снизить обменный курс по отношению к японской иене, фунту и немецкой марке.
В 1992 году в результате падения британского фунта стерлингов и кризиса в Европе доллар подорожал почти на 30%, но с апреля 1993-го его котировки вновь стали снижаться — вплоть до 1998 года, когда произошло значительное ослабление доллара по отношению к японской иене — с 136 до 111 в течение трех дней.
Это было связано с массовой репатриацией средств японских инвесторов в результате кризиса рынков развивающихся стран, в том числе дефолта в России.
1999-2001 годы — период нового укрепления доллара США, который был остановлен Федеральной резервной системой, снизившей процентные ставки до 2%, для того чтобы стимулировать экономику.
Наиболее важным событием для доллара стало создание в 1999 году единой европейской валюты, в которую центральные банки многих стран — кредиторов Соединенных Штатов перевели часть своих резервов.
На лето 2011 года доллар США котируется в пределах 1,40-1,46 доллара за евро, 76-78 японских иен за доллар и 1,62-64 доллара за фунт.
Несмотря на конкуренцию с евро, на сегодняшней день валюта Соединенных Штатов занимает ведущее место в резервах центральных банков. Кроме того, она остается основной расчетной валютой между странами в международной торговле, а также является базовой при расчетах через платежные системы по пластиковым картам вне зоны Европейского союза, где преобладает евро.
Доллар США – основная валюта рынка Forex. Через эту валюту проходят сделки и выставляются основные котировки.
Мнения специалистов относительно будущего доллара диаметрально противоположны. С одной стороны, многие считают, что в ближайшее время крах долларовой финансовой системы неизбежен из-за огромного внешнего долга Соединенных Штатов, самого большого в мире. На лето 2011 года он превышает 14,5 трлн долларов.
С другой – стабильность доллара базируется на высоких экономических показателях. Экономика США занимает первое место по валовому внутреннему продукту, опережая Китай, который на второй позиции, почти в два раза. Кроме того, высокому курсу доллара способствует монетарная политика Федеральной резервной системы, а также вера инвесторов, которые сохраняют свои активы в американской валюте и во время кризисов стремятся переводить их в доллары, находя в долговых инструментах США убежище от стихии рыночной экономики.
Материалы по теме: Что нужно знать о долларе США
Орзул выиграла «Битву полов» у Нагучева, угадав напоследок 80 процентов исходов.
Итоги 10-го раундаЗаключительный раунд «Битвы полов» завершился убедительной победой Марии Орзул над Романом Нагучевым (4:2). Общий счет противостояния — 7:3 в пользу телеведущей. Наши поздравления!
Напомним правила, по которым проходил беттинг-проект «Плеймейкера». «Битва полов» состояла из десяти раундов. В каждом Орзул и Нагучев делали по пять прогнозов на матчи очередного футбольного уик-энда в чемпионатах России, Англии, Испании, Италии, Германии и Франции (охват — не менее трех лиг). Выбирать можно было только события, на которые БК «Лига Ставок» давала коэффициенты не ниже 1,65. На матч, выбранный Романом, Мария ставить не могла — и наоборот.
За каждый верный прогноз начислялся один балл (полбалла — за «расход»). Победителем отдельного раунда объявлялся тот, кто собрал больше баллов (максимум — 5). В случае ничьей перевес получал тот, чьи верные прогнозы имели более высокий суммарный коэффициент. Для победы во всей битве нужно было выиграть большее количество раундов, чем соперник.
В первом раунде Орзул победила Нагучева 2,5:2, во втором — 5:2, в третьем — 2:1, в четвертом — 3,5:1,5, в пятом — 2,5:2. Однако затем начался камбэк. В шестом раунде Роман вырвал победу по дополнительному показателю, в седьмом праздновал успех со счетом 3:2, в восьмом — 3,5:1… Впрочем, погоня была остановлена досрочно: девятый раунд остался за Марией — 3:1. А в десятом, уже в ранге победителя проекта, Орзул едва не показала 100-процентный результат, переиграв Нагучева 4:2. Рассказываем, из чего сложился этот результат.
Нагучев переоценил «Майнц» и «Милан»
Уже не имея шансов на общую победу, Роман мог в заключительном раунде поправить личную статистику — выйти на 50-процентный показатель эффективности прогнозов. Для этого нужно было сделать 5 верных ставок из 5. И это, к сожалению, не удалось…
Телекомментатор явно переоценил возможности «Майнца», называя футбол этой команды едва ли не лучшим в Бундеслиге в 2021 году. По крайней мере, против уставшей после финала Кубка Германии дортмундской «Боруссии» середняк не устоял, лишь на последних минутах избежав крупного поражения (1:3).
А Роман ставил на хозяев с форой +1,5 за 1,74.
Обманулся Нагучев и в ожиданиях от «Милана». Будучи уверенным в победе россонери над «Кальяри», он увеличил коэффициент до минимально допустимого в рамках нашего проекта, сформировав событие «победа одной из команд и тотал меньше 3,5» за 1,69. В итоге же «низ» сыграл, а вот миланцы не сподобились даже на один гол. Как, впрочем, и гости с острова Сардиния (0:0).
Еще обиднее получилось с матчем «Монако» — «Ренн» (2:1). Здесь Нагучев поверил в победу хозяев при тотале меньше 3,5. Монегаски благодаря голу и передаче Александра Головина вели 2:0. Но коэффициент 1,9 «обнулил» их защитник Дисаси, отправивший на 69-й минуте мяч в собственные ворота.
Ну а двух оставшихся матчах ожидания Романа оправдались. «Локомотив» все-таки дожал игравший вдевятером «Урал»: победа 1:0 при тотале меньше 3,5 за 2,1. А «Фрайбург», как и предсказывал Нагучев, подтвердил умение играть с «Баварией» на своем поле.
Ничья 2:2 — при хозяйской форе плюс 2 за 1,65.
Таким образом, Нагучев завершил проект с 21,5 балла, сделав ставки на 49 матчей (один, напомним, не состоялся из-за переноса).
Орзул завершила проект по-чемпионски
А вот у Орзул действительно был шанс угадать 5 исходов из 5. По крайней мере, к заключительному матчу «Лилль» — «Сент-Этьен» она подошла со 100-процентным показателем. «Уфа» победила «Арсенал» за 2,25, «Химки» уверенно доехали с форой +1 против «Сочи» (0:0 за 1,8), «Ювентус», пусть и чудом, но победил «Интер» за 2,25, а «Реал», как и предполагала Мария, сохранил чемпионскую интригу в Примере до заключительного тура, переиграв в Бильбао «Атлетик» за 1,65.
Для эффектной точки оставалось, чтобы рвущийся к чемпионству во Франции «Лилль» победил с разницей хотя бы в два мяча «Сент-Этьен» за 1,92. По игре хозяева смотрелись предпочтительнее. Однако ответственность за результат все-таки их придавила.
«Доги» так и не реализовали ни одного голевого момента и завершили встречу нулевой ничьей.
Впрочем, это не отменяет яркую победу Орзул в 10-м раунде и всей «Битве полов». Вряд ли кто-то изначально предполагал, что итоговое преимущество Марии над Романом окажется столь внушительным — 7:3. Но оно получилось именно таким. Поэтому зря динамовский ветеран Андрей Кобелев несколько месяцев назад говорил, что женщинам лучше не рассуждать о футболе, в котором они якобы ничего не понимают. Еще как понимают, и порой даже могут дать мужчинам фору.
Но это, конечно, не точка в беттинг-баттлах от «Плеймейкера». Клубный сезон заканчивается, а футбол продолжается. Впереди новые битвы.
| | Роман Нагучев (21,5 из 49) | Мария Орзул (28,5 из 49) |
| Десятый раунд | Сыгравшие прогнозы «Локомотив» — «Урал» — 1:0 (П1 и тотал меньше 3,5 за 2,01) «Фрайбург» — «Бавария» — 2:2 (П1 с форой плюс 2 за 1,65) Неверные прогнозы «Майнц» — «Боруссия» Д — 1:3 (П1 с форой плюс 1,5 за 1,74) «Монако» — «Ренн» — 2:1 (тотал меньше 2,5 за 1,9) «Милан» — «Кальяри» — 0:0 (П12 и тотал меньше 3,5 за 1,69) | Сыгравшие прогнозы «Уфа» — «Арсенал» — 2:1 (П1 за 2,25) «Химки» — «Сочи» — 0:0 (П1 с форой плюс 1 за 1,8) «Ювентус» — «Интер» — 3:2 (П1 за 2,25) «Атлетик» — «Реал» — 0:1 (П2 за 1,65) Неверный прогноз «Лилль» — «Сент-Этьен» — 0:0 (П1 с форой минус 1,5 за 1,92) |
| Счет в десятом раунде | 2 | 4 |
| Девятый раунд | Сыгравший прогноз «Реймс» — «Монако» — 0:1 (П2 и тотал меньше 3,5 за 1,96) Расход «Сочи» — «Ротор» — 2:1 (П1 с форой минус 1 за 1,71) Неверные прогнозы «Лион» — «Лорьян» — 4:1 (П1 и тотал меньше 4,5 за 1,89) «Герта» — «Арминия» — 0:0 (П1 за 1,95) «Манчестер Сити» — «Челси» — 1:2 (П1 и тотал меньше 4,5 за 2,36) | Сыгравшие прогнозы «Арсенал» — «Рубин» — 2:4 (П2 с форой 0 за 1,67) ЦСКА — «Краснодар» — 3:1 (П1 за 1,93) «Бавария» — «Боруссия» М — 6:0 (П1 с форой минус 1,5 за 1,92) Неверные прогнозы «Барселона» — «Атлетико» — 0:0 (П1 за 1,82) «Ренн» — «ПСЖ» — 1:1 (П2 за 1,67) |
| Счет в девятом раунде | 1,5 | 3 |
| Восьмой раунд | Сыгравшие прогнозы «Челси» — «Фулхэм» — 2:0 (П1 с форой -1 за 1,82) «Химки» — «Урал» — 1:0 (П1 за 2,27) «Лилль» — «Ницца» — 2:0 (2-3 гола в матче за 1,67) Расход «Майнц» — «Герта» — 1:1 (П1 с форой 0 за 1,73) Неверный прогноз «Уэска» — «Реал Сосьедад» — 1:0 (П2 за 2,0) | Сыгравший прогноз «Милан» — «Беневенто» — 2:0 (П1 с форой -1,5 за 1,98) Неверные прогнозы «Зенит» — «Локомотив» — 6:1 (П2 с форой +1 за 1,87) ЦСКА — «Уфа» — 1:1 (П1 за 1,67) «ПСЖ» — «Ланс» — 2:1 (П1 с форой -1,5 за 1,96) Отмененный матч «МЮ» — «Ливерпуль» (П2 с форой 0 за 1,74) |
| Счет в восьмом раунде | 3,5 | 1 |
| Седьмой раунд | Сыгравшие прогнозы «Эйбар» — «Реал Сосьедад» — 0:1 (П2 за 1,99) «Аталанта» — «Болонья» — 5:1 (2-й тайм: П1 и тотал больше 1,5 за 2,27) Расходы «Ман Сити» — «Тоттенхэм» — 1:0 (П1 с форой -1 за 1,82) «Лестер» — «Кристал Пэлас» — 2:1 (П1 с форой -1 за 1,79) Неверный прогноз «Лион» — «Лилль» — 2:3 (2-3 гола за 1,79) | Сыгравшие прогнозы «Вильярреал» — «Барселона» — 1:2 (П2 за 1,7) «Метц» — «ПСЖ» — 1:3 (П2 с форой -1,5 за 1,82) Неверные прогнозы «Спартак» — ЦСКА — 1:0 (тотал больше 2,5 за 1,89) «Майнц» — «Бавария» — 2:1 (П2 с форой -1,5 за 1,75) «Реал» — «Бетис» — 0:0 (П1 с форой -1 за 1,83) |
| Счет в седьмом раунде | 3 | 2 |
| Шестой раунд | Сыгравшие прогнозы «Локомотив» — «Ростов» — 4:1 (П1 за 1,99) «Вулверхэмптон» — «Шеффилд» — 1:0 (П1 за 1,7) «Бетис» — «Валенсия» — 2:2 (тотал больше 2,5 за 1,89) Неверные прогнозы «Лейпциг» — «Хоффенхайм» — 0:0 (П1 тотал меньше 4,5 за 1,73) «ПСЖ» — «Сент-Этьен» — 3:2 (П1 и тотал меньше 3,5 за 2,06) | Сыгравшие прогнозы «Краснодар» — «Зенит» — 2:2 (тотал больше 2,5 за 1,67) «Ротор» — «Динамо» — 0:3 (П2 за 1,71) «Вольфсбург» — «Бавария» — 2:3 (П2 за 1,93) Неверные прогнозы «Хетафе» — «Реал» — 0:0 (П2 с форой -1 за 2,11) «Аталанта» — «Ювентус» — 1:0 (тотал больше 3 за 1,86) |
| Счет в шестом раунде | 3 (сумма коэф. 5,58) | 3 (5,31) |
| Пятый раунд | Сыгравшие прогнозы «Страсбур» — «ПСЖ» — 1:4 (П2 за 1,78) «Шеффилд» — «Арсенал» — 0:3 (П2 с форой -1 за 2,02) Неверные прогнозы «Бавария» — «Унион» — 1:1 (П1 с форой -1,5 за 2,18) «Динамо» — «Урал» — 2:2 (П1 с форой -1,5 за 2,45) «Уфа» — «Ахмат» — 3:0 (пенальти или удаление за 1,9) | Сыгравшие прогнозы «Локомотив» — «Спартак» — 2:0 (П1 с форой 0 за 2,1) «Монако» — «Дижон» — 3:0 (П1 с форой -2 за 1,91) Расход «Реал» — «Барселона» — 2:1 (тотал больше 3 за 1,93) Неверные прогнозы «Арсенал» — «Краснодар» — 1:0 (П2 за 1,84) «Бетис» — «Атлетико» — 1:1 (П2 за 2,37) |
| Счет в пятом раунде | 2 | 2,5 |
| Четвертый раунд | Сыгравший прогноз «Торино» — «Ювентус» — 2:2 (тотал больше 3 за 1,99) Расход «Лидс» — «Шеффилд» — 2:1 (П1 с форой -1 за 1,87) Неверные прогнозы «Вольфсбург» — «Кельн» — 1:0 (К1 забьет 2-3 гола за 1,82) «Милан» — «Сампдория» — 1:1 (П1 с форой -1 за 1,91) «ПСЖ» — «Лилль» — 0:1 (П1 с форой -1 за 2,16) | Сыгравшие прогнозы «Рубин» — «Сочи» — 1:0 (П1 с форой 0 за 1,72) «Лейпциг» — «Бавария» — 0:1 (П2 с форой 0 за 1,8) «МЮ» — «Брайтон» — 2:1 (П1 за 1,67) Расход «Аталанта» — «Удинезе» — 3:2 (П1 с форой -1 за 1,75) Неверный прогноз «Тамбов» — ЦСКА — 1:2 (П2 с форой -2,5 за 1,95) |
| Счет в четвертом рауде | 1,5 | 3,5 |
| Третий раунд | Сыгравший прогноз «Сельта» — «Реал» — 1:3 (П2 с форой -1 за 2,36) Неверные прогнозы «Вальядолид» — «Севилья» — 1:1 (П2 за 1,89) «Вердер» — «Вольфсбург» — 1:2 (тотал меньше 2,5 за 1,78) «Ницца» — «Марсель» — 3:0 (П2 с форой 0 за 1,76) Отмененный матч «Интер» — «Сассуоло» (П1 с форой -1,5 за 1,93) | Сыгравшие прогнозы «Лион» — «ПСЖ» — 2:4 (П2 с форой 0 за 1,72) «Бавария» — «Штутгарт» — 4:0 (П1 с форой -2 за 1,87) Неверные прогнозы «Атлетико» — «Алавес» — 1:0 (П1 с форой -1,5 за 2,19) «Ювентус» — «Беневенто» — 0:1 (К1 не пропустит за 1,88) «Кельн» — «Боруссия» Д — 2:2 (П2 с форой -1 за 1,72) |
| Счет в третьем раунде | 1 | 2 |
| Второй раунд | Сыгравшие прогнозы «Фулхэм» — «Ман Сити» — 1:3 (П2 с форой -1,5 за 2,03) «Вольфсбург» — «Шальке» — 5:0 (П1 с форой -2 за 2,65) Неверные прогнозы «Лидс» — «Челси» — 0:0 (П2 за 1,77) «Хетафе» — «Атлетико» — 0:0 (П2 за 1,98) «Реймс» — «Лион» — 1:1 (П2 с форой -1 за 1,77) | Сыгравшие прогнозы «Локомотив» — «Сочи» — 3:1 (П1 за 2,06) «Уфа» — «Рубин» — 0:3 (П2 за 2,25) «Боруссия» Д — «Герта» — 2:0 (П1 с форой -1 за 1,77) «Сассуоло» — «Верона» — 3:2 (тотал больше 2,5 за 1,86) «МЮ» — «Вест Хэм» — 1:0 (П1 за 1,86) |
| Счет во втором раунде | 2 | 5 |
| Первый раунд | Сыгравшие прогнозы «Ювентус» — «Лацио» — 3:1 (П1 с форой -1 за 2,6) «Атлетико» — «Реал» — 1:1 (тотал меньше 2,5 за 1,68) Неверные прогнозы «Челси» — «Эвертон» — 2:0 (К2 забьет за 1,71) «Хоффенхайм» — «Вольфсбург» — 2:1 (П2 за 2,36) «Ротор» — «Химки» — 0:0 (П2 за 2,8) | Сыгравшие прогнозы «Спартак» — «Краснодар» — 6:1 (тотал больше 2,5 за 1,82) «Бавария» — «Боруссия» Д — 4:2 (П1 с форой -1 за 1,99) Расход «Динамо» — «Тамбов» — 2:0 (П1 с форой -2 за 1,71) Неверные прогнозы «Ливерпуль» — «Фулхэм» — 0:1 (П1 с форой -1,5 за 2,13) «Интер» — «Аталанта» — 1:0 (Х2 за 1,79) |
| Счет в первом раунде | 2 | 2,5 |
| Счет в «Битве полов» | 3 | 7 |
Хотите попробовать заработать на своих прогнозах? Зарегистрироваться на сайте БК «Лига Ставок» можно здесь.
Тринатриевая соль лимонной кислоты | CAS 68-04-2 | SCBT
Тринатриевая соль лимонной кислоты | CAS 68-04-2 | SCBT — Santa Cruz Biotechnology Тринатриевая соль лимонной кислоты CAS: 68-04-2MF: C6H5O7 • 3Na
МВт: 258,07
- Дом
- Химические вещества
- Прочие химические вещества
- Тринатриевая соль лимонной кислоты
org/ListItem»> АнтикоагулянтыАльтернативные имена: Цитрат тринатрия; Цитрат натрия
Количество CAS: 68-04-2
Чистота: ≥98%
Молекулярный вес: 258.07
Молекулярная формула: C 6 H 5 O 7 • 3 Na
Только для исследовательских целей.
Не предназначено для диагностического или терапевтического использования.
Нажмите на изображение или кнопку увеличения, чтобы увеличить
Закрыть
Тринатриевая соль лимонной кислоты представляет собой конъюгированное основание слабой кислоты и может выступать в качестве биологического буферного агента, поскольку сопротивляется изменениям pH.
Лимонная кислота — одно из ряда соединений, ответственных за физиологическое окисление жиров, углеводов и белков до диоксида углерода и воды. Часто используется для приготовления натрийцитратного буфера для поиска антигена в образцах тканей. Цитратный раствор предназначен для разрушения поперечных связей белков; таким образом, демаскирование антигенов и эпитопов в фиксированных формалином и залитых парафином тканевых срезах приводит к увеличению интенсивности окрашивания антител. Цитрат обладает антикоагулянтной активностью; как хелатор кальция, он образует комплексы, которые нарушают тенденцию к свертыванию крови.
Доступны дополнительные формы:
Моногидрат лимонной кислоты (sc-203327)
Лимонная кислота, безводная (sc-211113)
Цитрат натрия, дигидрат (sc-203383)
Цитрат натрия одноосновный (sc-215869)
Цитрат натрия трехосновный гидрат (sc -236898)
Концентрированный раствор цитрата (sc-294091)
Ссылки
1. Vandemark, P.J., et al.
1964. J. Bacteriol. 88: 1602-1607. PMID: 14240945
2. Shi, S.R., et al. 1993. J. Histochem. Cytochem. 41: 1599-1604.PMID: 7691930
3. Echezarreta, G., et al. 1997. Сангре. 42: 369-375. PMID: 9424736
4. Uszyński, W., et al. 2007. Folia Histochem. Cytobiol. 45: 33-36. PMID: 17378243
Применение :
• Для поиска антигена приготовьте раствор 10 мМ натрийцитратного буфера, pH 6,0.
Растворимость :
Прозрачный бесцветный в концентрации 50 мг / мл в воде
Температура плавления :
≥150 ° С
Только для исследовательских целей.Не предназначено для диагностического или терапевтического использования.
Номер в леях :
MFCD00012462
Улыбки :
C (C (= O) [O -]) C (CC (= O) [O -]) (C (= O) [O -]) O.
[Na +]. [Na +]. [Na +]
Adobe Acrobat Reader требуется для надежного просмотра, печати
и комментирования PDF-документов.
Santa Cruz Biotechnology, Inc.является мировым лидером в разработке продуктов для рынка биомедицинских исследований. Позвоните нам по бесплатному телефону 1-800-457-3801 .
Copyright © 2007-2021 Santa Cruz Biotechnology, Inc. Все права защищены. «Santa Cruz Biotechnology» и логотип Santa Cruz Biotechnology, Inc., «Santa Cruz Animal Health», «San Juan Ranch», «Дополнение чемпионов», логотип San Juan Ranch, «Ultracruz», «Chemcruz», » Immunocruz «,» Exactacruz «и» EZ Touch «являются зарегистрированными товарными знаками Santa Cruz Biotechnology, Inc.
Все товарные знаки являются собственностью соответствующих владельцев.
Ваша подписка на рассылку новостей и объявлений по электронной почте получена. Регистрируясь, вы подтверждаете, что прочитали и согласны с условиями нашей политики конфиденциальности. Вы имеете право отказаться от подписки в любое время, щелкнув ссылку «отказаться от подписки» в любом полученном вами электронном письме с новостями и объявлениями.
Чтобы разместить заказ с использованием юаней или отправить товар в континентальный Китай, посетите сайт www.scbio.cn
Цитрат натрия | 68-04-2
Цитрат натрия Химические свойства, применение, производство
Описание
Цитрат натрия может относиться к любой из натриевых солей лимонной кислоты (хотя чаще всего к третьей):Моноцитрат натрия
Динитрат натрия
Трицитрат натрия
В качестве пищевых добавок три формы соли также известны E номер E331.
Описание
Тринатрийцитрат имеет химическую формулу Na 3 C 6 H 5 O 7 . Иногда его называют просто цитратом натрия, хотя цитрат натрия может относиться к любой из трех натриевых солей лимонной кислоты. . Обладает солевым, слегка терпким вкусом. По этой причине цитраты некоторых щелочных и щелочноземельных металлов (например, цитраты натрия и кальция) обычно известны как «кислые соли» (иногда лимонную кислоту ошибочно называют кислой солью).Химические свойства
Кристаллический порошок от белого до кремового цветаХимические свойства
Цитрат натрия не имеет запаха и имеет приятный кисловатый вкус. Цитрат натрия безводен или содержит две молекулы кристаллизационной воды.Происшествие
Лимонная кислота и ее соли встречаются в природе во многих растениях и животных.использует
Подщелачивающее средство (системное).
использует
Цитрат натрия можно использовать в косметических препаратах в качестве подщелачивающего средства и для связывания следов металлов в растворах (посредством хелатирующего действия).Это натриевая соль лимонной кислоты.использует
Цитрат натрия — буфер и секвестрант, полученный из лимонной кислоты. в виде безводного цитрата натрия и в виде дигидрата цитрата натрия или натрия цитрат водный. кристаллические продукты получают прямая кристаллизация из водных растворов. цитрат натрия безводный drous имеет растворимость в воде 57 г в 100 мл при 25 ° C, в то время как дигидрат цитрата натрия имеет растворимость 65 г в 100 мл при 25 ° C. он используется в качестве буфера в газированных напитках и для контроля pH в сохраняет.улучшает взбиваемость сливок и удаляет растушевку сливок и немолочных отбеливателей для кофе. это про обеспечивает эмульгирование и растворение белка в плавленом сыре. Это предотвращает осаждение твердых частиц при хранении в сгущенном молоке.
в сухих супах улучшает регидратацию, что сокращает время приготовления
время. он действует как секвестрант в пудингах. он функционирует как
комплексообразователь железа, кальция, магния и алюминия.
типичные уровни использования варьируются от 0,10 до 0,25%. это также называется
цитрат тринатрия.использует
Цитрат тринатрия — буфер и секвестрант, представляющий собой тринатрий соль лимонной кислоты. см. цитрат натрия.использует
Цитрат натрия также известен как цитрат соды, белые кристаллы или гранулы. порошок получали нейтрализацией лимонной кислоты натрием. карбонат. Он растворим в воде, но в меньшей степени в спирте. Натрий цитрат использовался в качестве консерванта в белковой бумаге.Приложение
2 — 1 — ПищаЦитрат натрия в основном используется в качестве пищевой добавки E331, обычно для ароматизатора или в качестве консерванта.Цитрат натрия используется в качестве ароматизатора в некоторых разновидностях клубной соды.
Цитрат натрия является обычным ингредиентом Bratwurst, а также используется в коммерческих готовых к употреблению напитках и смесях для напитков, придавая им терпкий вкус. 2 — 2 — Буфер
В качестве конъюгированного основания слабой кислоты цитрат может действовать как буферный агент или регулятор кислотности, сопротивляясь изменениям pH. Цитрат натрия используется для регулирования кислотности некоторых веществ, например, желатиновых десертов. Его можно найти в мини-контейнерах для молока, используемых с кофемашинами.Соединение является продуктом антацидов, таких как Alka-Seltzer, когда они растворяются в воде.
2 — 3 — Применение в медицине
В 1914 году бельгийский врач Альберт Хустин и аргентинский врач и исследователь Луис Аготе успешно использовали цитрат натрия в качестве антикоагулянта при переливании крови. Он по-прежнему используется сегодня в пробирках для забора крови и для хранения крови в банках крови. Цитрат-ион хелатирует ионы кальция в крови, образуя комплексы цитрата кальция, нарушая механизм свертывания крови.
Цитрат натрия используется для снятия дискомфорта при инфекциях мочевыводящих путей, таких как цистит, для уменьшения ацидоза, наблюдаемого при ацидозе дистальных почечных канальцев, а также в качестве осмотического слабительного. Это основной компонент раствора ВОЗ для пероральной регидратации.
Препарат
Производится нейтрализацией лимонной кислоты гидроксидом натрия или карбонатом натрия. Может быть приготовлен в безводном состоянии или может содержать 2 моля воды на моль цитрата натрия.Пищевая добавка
Цитрат натрия иногда используется в качестве регулятора кислотности в напитках, а также в качестве эмульгатора масел при приготовлении сыра. Это позволяет сырам таять, не становясь жирными. Рассмотрим следующую цитату из Модернистской кухни:Наша модернистская версия макарон с сыром обязана своим химическим составом Джеймсу Л. Крафту, который в 1916 году запатентовал первый американский кусок сыра. Он показал, что фосфат натрия удерживает воду и капли жира в смеси при плавлении сыра.
Мы используем цитрат натрия, который имеет такой же эффект, и его легче найти. В результате получается такая же гладкая, как плавленый американский сыр, но сложный и насыщенный вкус, как у любого из ваших любимых сыров.Методы очистки
Кристаллизуйте соль из теплой воды, охладив до 0o. [Beilstein 3 III 1100, 3 IV 1274.]Продукты и сырье для получения цитрата натрия
Сырье
Препараты
Категория: консерванты США / ЕС / FDA / JECFA / FEMA / FLAVIS / Ученый / Патентная информация:
Физические свойства:
Органолептические свойства:
Косметическая информация: Поставщиков:
Информация по безопасности:
Информация о безопасности использования:
Ссылки по безопасности: Артикул: Другая информация: Примечание о потенциальных блендерах и основных компонентахВозможное использование:
Синонимы:
Статей: | |||
Как закрыть банковский счет
На первый взгляд закрытие банковского счета может показаться простым.Тем не менее, есть ряд шагов, которые необходимо выполнить, и действия, которые необходимо предпринять, чтобы закрыть вашу учетную запись должным образом. Соблюдение правильной процедуры поможет вам избежать ненужных расходов, сборов и осложнений. Мы проведем вас через весь процесс от начала до конца и дадим советы, на что следует обратить внимание.
1. Откройте новый счетВаш первый шаг начинается не с учетной записи, которую вы хотите закрыть, а с вашей новой учетной записи. Сначала вам нужно будет открыть новую учетную запись, чтобы в дальнейшем у вас было куда переводить платежи и средства.
Возможно, вы закрываете свой банковский счет, потому что переезжаете в новый район. Но если вы закрываете счет, потому что недовольны им или самим банком, вам может понадобиться, чтобы ваш новый счет подходил именно вам. Хорошее место для начала — это просто проверить лучшие текущие счета. Таким образом, вы знаете, что начинаете поиск с лучшего, что может предложить отрасль. Если с учетной записи, которую вы хотите закрыть, взимается слишком большая комиссия, обязательно найдите бесплатный текущий счет, чтобы избежать дальнейших проблем с оплатой.На самом деле, есть масса вариантов на выбор. Так что вам не нужно зацикливаться на аккаунте, который вам не нравится.
Как только вы найдете свой новый банковский счет, проверьте, предлагает ли банк «набор для смены». Банковский «комплект для смены» включает контрольные списки и формы, чтобы проинструктировать вкладчиков и биллеров об изменении в ваших счетах. Это может помочь сделать процесс переключения более удобным.
2. Обновление автоматических и повторяющихся платежейПрежде чем вы действительно навсегда закроете свою учетную запись, вам необходимо решить все вопросы.Для начала подведите итоги всех своих автоматических и повторяющихся платежей. Это включает в себя такие вещи, как ваши музыкальные и телевизионные потоковые сервисы, членство в спортзале, выплаты по студенческим кредитам и многое другое. Чтобы лучше понять свои привычки в расходах, полезно взглянуть на свои банковские выписки за прошлый год.
Вооружившись списком платежей, вы можете начать отменять их со своей старой учетной записи и настраивать их с помощью новой учетной записи. Обязательно обратите внимание на то, когда будет производиться каждый следующий платеж.Во-первых, это предотвратит возможность двойной оплаты услуги с каждой учетной записи. Это также гарантирует, что вы не получите овердрафта на одном счете для совершения платежа. С одной стороны, платеж может быть получен с вашего нового недостаточно финансируемого счета. С другой стороны, платеж может поступить на ваш старый счет после того, как вы его очистите.
3. Переключите прямые депозитыТак же, как вы хотите посмотреть, куда уходят ваши деньги, не забывайте о том, откуда они берутся.Обратитесь в отдел заработной платы вашей компании, чтобы обновить настройки прямого депозита, чтобы отразить изменения в учетной записи. Вам нужно будет указать маршрут и номера счетов для вашего нового банковского счета. Это может занять некоторое время, чтобы вступить в силу, поэтому обязательно следите за обеими учетными записями, чтобы убедиться, что изменения происходят правильно.
Это также относится к любым инвестиционным или брокерским счетам и любым другим источникам дохода, которые у вас могут быть. Вам нужно будет изменить данные своего аккаунта в этих аккаунтах, чтобы получать выплаты.
4. Переведите средства на новый счетПосле обновления данных о платежах и депозитах вы можете переводить средства на новый счет. Проверьте, есть ли какие-либо ограничения на перевод, поскольку вы не сможете перевести весь свой баланс сразу. В этом случае вам придется переводить баланс понемногу. Кроме того, если в вашем аккаунте есть требование о минимальном остатке, не забудьте сохранить там и эту сумму.
Помните все перечисленные и обновленные вами платежи? Не забудьте оставить на счете достаточно денег, чтобы покрыть оставшиеся платежи.Также может помочь оставить там немного дополнительных денег на случай, если возникнут другие неожиданные платежи. В противном случае вы можете столкнуться с комиссией за овердрафт.
5. Закройте счетТеперь, наконец, пора закрыть вашу учетную запись. Это может занять недели или месяцы, в зависимости от того, сколько времени потребуется для расчета платежей и перехода на новую учетную запись. На этом этапе важно убедиться, что все ваши автоматические платежи приняты во внимание.Вы же не хотите иметь «зомби» аккаунт, как это происходит, когда банку приходится повторно открывать ваш аккаунт, чтобы произвести забытый автоматический платеж.
Обычно есть несколько способов закрыть свою учетную запись. Вы можете отправиться в ближайшее отделение, чтобы закрыть его с помощью представителя банка. Это может быть самым простым способом, так как вы можете задать любые вопросы, которые могут у вас возникнуть.
Если вам не нравится ехать в другое место, вы также можете закрыть свою учетную запись в Интернете. Точные процессы в каждом банке будут отличаться.Как правило, вам нужно связаться со службой поддержки через систему безопасного обмена сообщениями, чтобы запросить закрытие аккаунта. Другие банки могут потребовать, чтобы вы позвонили в службу поддержки клиентов или отправили письмо по электронной почте, чтобы надлежащим образом закрыть счет.
6. Получите письменное подтверждениеНезависимо от того, каким способом вы закрываете свой счет, вам необходимо получить письменное подтверждение от банка, что вы закрыли свой счет. Это поможет вам создать свои финансовые записи для использования в будущем.Это также может пригодиться в качестве доказательства закрытия, если ваш старый банк восстанавливает ваш старый счет, чтобы производить будущие платежи в любое время.
7. Последние штрихиЧтобы полностью отказаться от старого аккаунта, важно уничтожить соответствующие чеки и дебетовую карту. Это предотвратит их случайное использование и мошенничество.
Несмотря на то, что ваш счет сейчас закрыт, не забудьте сохранить банковские выписки. Они понадобятся вам для вашей документации и, возможно, для налоговых целей.
Советы по поиску счета на правом берегу- Вы готовы закрыть свой банковский счет, но еще не зарегистрировали следующий счет? Не волнуйтесь, у вас есть масса вариантов. Возможно, вы готовы отказаться от своего старого текущего счета в колледже. Вы можете взглянуть на приносящие проценты текущие счета, чтобы сделать хранение денег на счете немного более полезным. С другой стороны, если вы видите потенциальный овердрафт в будущем, найдите счет с низкими комиссиями за овердрафт.
- Не совсем уверены, что вам нужно от следующего банка? Может быть, финансовый консультант поможет вам получить лучшее представление. Правильный консультант может более подробно изучить ваши финансы и определить, можете ли вы платить меньше комиссионных или экономить по более высоким ставкам. К счастью, найти подходящего советника в вашем районе так же просто, как использовать наш инструмент подбора советников. Мы можем быстро связать вас с квалифицированными консультантами, чтобы вы могли начать работу.
Фотография предоставлена: © iStock.com / Ridofranz, © iStock.ru / marchmeena29, © iStock.com / fizkes
Лорен Перес, CEPF® Лорен Перес пишет для SmartAsset по различным темам, связанным с личными финансами, со специальными знаниями в области сбережений, банковских и кредитных карт. Она является сертифицированным преподавателем в области личных финансов® (CEPF®) и членом Общества содействия редактированию и письму в бизнесе. Лорен получила степень по английскому языку в Университете Рочестера, где она специализируется на языке, средствах массовой информации и коммуникациях.Она родом из Лос-Анджелеса. Несмотря на то, что Лорен время от времени ходила по магазинам, она осознавала важность управления деньгами и сбережений с юных лет. Лорен любит давать рекомендации друзьям и семье по кредитным картам и пенсионным счетам, основываясь на часах исследований, которые она проводит в SmartAsset. ДанныеYelp показывают, что 60% закрытий предприятий из-за пандемии коронавируса теперь являются постоянными
Yelp в среду опубликовал свой последний отчет об экономическом воздействии, в котором говорится о закрытии предприятий в США.S. растут в результате экономических потерь, нанесенных пандемией коронавируса.
По состоянию на 31 августа около 163 735 предприятий указали на Yelp, что они закрылись. Это меньше, чем 180000, которые закрылись в самом начале пандемии. Однако на самом деле он показывает 23% -ное увеличение количества закрытий с середины июля.
Помимо мониторинга закрытых предприятий, Yelp также учитывает предприятия, закрытие которых стало постоянным. Это число неуклонно росло на протяжении последних шести месяцев и теперь достигло 97 966, что составляет 60% закрытых предприятий, которые не будут открываться повторно.
«В целом данные Yelp показывают, что количество закрытий предприятий продолжало расти, а число постоянных закрытий увеличилось на 34% с момента нашего последнего отчета в середине июля», — сказал CNBC Джастин Норман, вице-президент Yelp по анализу данных.
Сентябрьский отчет Yelp отмечает шесть месяцев с 1 марта, даты, которую компания считает началом бизнес-кризиса.
Чтобы собрать данные о закрытии, Yelp отслеживает изменения рабочего времени или описаний в своем приложении, предлагая немедленное локализованное представление о влиянии пандемии на малый бизнес.
«Несмотря на тяжелый удар, нанесенный малым предприятиям, мы видели, что домашние, местные, профессиональные и автомобильные службы смогли противостоять последствиям пандемии лучше, чем другие отрасли», — отметил Норман.
Данные подтверждают тенденцию, согласно которой большинство потребителей предпочитают оставаться дома, а не физически покровительствовать заведениям, поскольку домашние и профессиональные услуги, такие как ландшафтные дизайнеры, подрядчики и юристы, закрываются гораздо реже, чем магазины одежды и даже предприятия по производству домашнего декора.Авто- и буксирные службы также сообщили об относительно низком уровне закрытия.
«Потребители по-прежнему нуждаются в этих услугах», — сказал Норман. «Благодаря развитию виртуальных консультаций, а также бесконтактных или социально удаленных услуг, эти предприятия в это время проявили особую устойчивость».
За последние шесть месяцев рестораны, бары и ночные клубы больше всего пострадали от ограничений, вызванных пандемией: по состоянию на 31 августа закрылись 32 109 ресторанов. Количество ресторанов, вынужденных навсегда закрыться, немного выше, чем у Yelp. общее среднее — 61%.
Yelp также отмечает, что предприятия, которые уже хорошо подходят для еды на вынос, такие как пиццерии, кафе и гастрономы, переживают воду лучше, чем другие рестораны. Типы ресторанов с наибольшим количеством закрытий включают места для завтрака и позднего завтрака, сэндвич-магазины и мексиканские рестораны.
Норман отметил, что изменения в политике в ближайшие недели и месяцы могут повлиять на то, станут ли эти закрытия постоянными. «Непрерывное развертывание ресторана в помещении, особенно в таких мегаполисах, как Нью-Йорк, заслуживает внимания, поскольку для предприятий будет критически важно поддерживать правильный баланс между практикой социального дистанцирования и другими ответственными мерами безопасности, чтобы они могли оставаться открытыми.
Бары и ночные клубы также испытали на себе большое влияние пандемии, поскольку бизнес не может так легко адаптироваться к обеду на открытом воздухе или к еде на вынос. Несмотря на то, что это сектор, который в шесть раз меньше, чем рестораны, 6 451 заведение закрылось. Показатель постоянных закрытий увеличился на 10% с июля и сейчас составляет 54%.
Розничная торговля продемонстрировала аналогичный рост постоянных закрытий с июля, увеличившись на 10% до 58%, обозначенных как постоянные. Это из 30 374 закрытых розничных предприятий. .
Отчет показал удивительный рост числа закрытых предприятий красоты по сравнению с предыдущим месяцем — с июля около 42% предприятий были закрыты навсегда. Общее количество закрытий для индустрии красоты составляет 16 585, что на 22% больше, чем в июле.
Различные штаты также сталкиваются с разной степенью закрытия, и, что неудивительно, Yelp видит корреляцию между штатами с большим количеством закрытий и штатами с высоким уровнем безработицы. Если посмотреть на количество закрытий на 1000 для каждого штата, то сильнее всего пострадали Гавайи, за ними следуют Калифорния, Невада, Аризона и штат Вашингтон.Уровень безработицы на Гавайях в июле составлял 13%, и штат также сильно зависит от туризма.
«Из-за пандемии эти штаты сильно пострадали от ограничений на поездки, а также столкнулись с высоким уровнем безработицы», — сказал Норман. «Эти штаты также являются домом для наиболее пострадавших мегаполисов, включая Лас-Вегас, Гонолулу и несколько крупнейших городских районов Калифорнии, таких как Сан-Диего, Сан-Франциско, Сан-Хосе и Лос-Анджелес».
Yelp также отметил несоответствия между крупными городами, где количество закрытых территорий выше, а предприятия также не работают, и небольшими районами, которые оказались более снисходительными к малому бизнесу.Лос-Анджелес и Нью-Йорк сообщают о наибольшем количестве закрытий: в Лос-Анджелесе было закрыто 15 000 предприятий, половина из которых являются постоянными, а в Нью-Йорке — более 11 000 закрытий, при этом высокий показатель 63% был отмечен как постоянный.
«Между тем, на Востоке, в том числе в Питтсбурге, Филадельфии и Балтиморе, мы видим более крупные метро с меньшим количеством закрытых», — отметил Норман.
В конечном итоге данные Yelp показывают, что Мэйн-стрит все еще ощущает экономические последствия пандемии, и во многих штатах и сферах бизнеса восстановление экономики может не наступить в ближайшее время.
«Хотя трудно сказать, когда можно ожидать стабилизации закрытия предприятий, мы продолжаем видеть, как предприятия успешно адаптируются к этим нестабильным временам в течение последних шести месяцев благодаря их собственной упорной работе, инновациям и изменениям местной политики», — Норман сказал.
Исправление: Yelp в среду опубликовал свой последний отчет об экономическом воздействии. В более ранней версии имя отчета было неверным.
Определение связывания пептида MHC класса II с помощью дрожжевого дисплея в масштабе репертуара улучшает предсказание антигена
Платформа MHC-II, отображаемая на дрожжах, идентифицирует связывание пептида
32,33 .Мы модифицировали отображаемую дрожжами конструкцию HLA-DR401 (HLA-DRA1 * 01: 01, HLA-DRB1 * 04: 01) для определения взаимодействий пептид-MHC путем введения сайта протеазы 3C и метки эпитопа Myc в гибкий линкер, который соединяет пептид к β-цепи HLA (рис. 1а). Дрожжи инкубировали с протеазой 3С для расщепления линкера, позволяя несвязавшимся пептидам свободно диссоциировать. Инкубация происходила при низком pH в присутствии пептида-конкурента с высоким сродством и катализатора пептидного обмена HLA-DM (фиг. 1b), имитируя нативную эндосомную среду загрузки пептида MHC-II 34 .Затем дрожжи, кодирующие связывающие или не связывающие пептиды, дифференцировали с помощью флуоресцентно меченного антитела, направленного против проксимальной пептидной эпитопной метки. Фиг. 1. Разработка и проверка платформы дрожжевого дисплея для идентификации связывания пептида с коэкспрессируемым MHC класса II.a Структурное представление HLA-DR401 (PDB 1J8H), модифицированного для кодирования сайта расщепления 3C протеазой и метки эпитопа Myc внутри линкера, соединяющего пептид и домен MHC β1. b Схема протокола проверки, включая расщепление линкера с помощью 3C, пептидный обмен при низком pH в присутствии HLA-DM и пептида-конкурента с высокой аффинностью, а также количественное определение оставшегося связанного пептида с помощью антитела против Myc. c Динамика средней интенсивности флуоресценции (MFI) флуоресцентно меченного антитела против Myc для дрожжей, кодирующих HLA-DR401-CLIP 81-101 , без обработки (необработанные), с расщеплением линкера (3C) или с линкером расщепление и пептидный обмен (3C + HLA-DM), как определено проточной цитометрией. d Сравнение удерживания пептидов для HLA-DR401-CLIP 81-101 , -CII 261-273 или -HA 306-318 -кодирующих дрожжей с расщеплением линкера и пептидным обменом, как определено с помощью проточной цитометрии и нормализовались до MFI до лечения.Для каждой конструкции n = 3 аликвоты обрабатывали независимо и измеряли для каждой временной точки и состояния. Статистическая оценка была выполнена с помощью повторных измерений двухфакторного дисперсионного анализа с тестом Даннета для множественного сравнения в условиях лечения (3 степени свободы, F = 54 в 1 C и F = 504 в 1D) или теста Тьюки для множественных сравнений в условиях лечения ( 2 степени свободы, F = 312 в 1 C и F = 2366 в 1D). Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.
Дрожжи, экспрессирующие HLA-DR401, связанный с ассоциированным с классом II пептидом с неизменной цепью (CLIP 81-101 ), пептид, замещенный во время презентации эндогенного антигена 34 , демонстрировали значительную потерю сигнала метки эпитопа сразу после расщепления линкера (фиг. . 1c). Потеря сигнала увеличивалась при инкубации при низком pH в присутствии конкурирующего пептида (рис. 1c). В соответствии с его ролью катализатора обмена пептидов, добавление HLA-DM значительно ускоряет потерю сигнала.Однако дрожжевые экспрессирующие пептиды, о которых известно, что они сильнее связываются с HLA-DR401, HA 306-318 35,36 и CII 261-273 37,38,39 , сохраняют сигнал метки эпитопа при обработке 3C протеазой. и HLA-DM (рис. 1d), подтверждая наш дизайн.
Выбор и анализ библиотеки pMHC HLA-DR401
Для обеспечения возможности идентификации HLA-DR401-связывающих пептидов в масштабе репертуара мы создали библиотеку отображения поверхности дрожжей, кодирующую 1 × 10 8 случайных пептидов, связанных с MHC.Чтобы упростить последующий анализ, пептиды были сконструированы как рандомизированные 9меры, фланкированные константными остатками, чтобы способствовать связыванию MHC в едином регистре, поскольку открытая бороздка связывания пептида MHC-II вмещает множество возможных регистров пептидов 23,24 . Библиотеку подвергали итеративным циклам расщепления линкера, пептидного обмена и отбора на сохранение метки эпитопа (фиг. 2a), в результате чего после пяти циклов был получен пул дрожжей, кодирующих сильные связывающие вещества (дополнительный рисунок 1A). После глубокого секвенирования мы наблюдали быструю конвергенцию пептидного мотива, который был сильно обогащен предсказанными связывающими веществами (дополнительный рис.1Б и 1С). Обогащенные пептиды были очень разнообразными и состояли из 81422 уникальных пептидов в ожидаемом регистре (дополнительные данные 1). Распределение частоты пептидов в обогащенной библиотеке было в основном ровным, без наблюдаемой корреляции между частотой отдельных пептидов и аффинностью (дополнительный рис. 2A-C).
Фиг. 2: Выбор и анализ библиотеки рандомизированных пептидов HLA-DR401, представленной дрожжами.a Схема последовательных раундов отбора библиотеки для устранения несвязывающих пептидов и обогащения связывающих веществ. b Невзвешенные тепловые карты процентной частоты позиционирования и log2-кратного обогащения каждой аминокислоты в раунде 5 отбора ( n = 81 422 уникальных пептида). c Структура пептида HA 306-318 в пептидсвязывающей бороздке HLA-DR401 (PDB 1J8H) с обозначенными положениями якоря первичного пептида MHC. d Мотивы относительной энтропии Кульбака-Лейблера девяти основных аминокислот HLA-DR401-связывающих пептидов, как определено эмпирически из нашей библиотеки дрожжевого дисплея или путем кластеризации связывающих веществ, собранных в базе данных SYFPEITHI.
Мы наблюдали сильное предпочтение аминокислот в позициях «якорного» пептида MHC P1, P4, P6 и P9 (рис. 2b), где основная цепь пептида ориентирует боковые цепи аминокислот непосредственно в карманы на поверхности MHC (рис. 2c). 29 . Эти обогащения в значительной степени совпадают с предыдущими отчетами для HLA-DR401: 17,18,38,40,41,42,43,44 глубокий карман P1 способствует большим гидрофобным остаткам; основной карман P4 благоприятствует кислотным остаткам; P6 благоприятствует полярным остаткам Ser, Thr и Asn; а неглубокий карман P9 благоприятствует Ala, Gly и Ser.Однако о наблюдаемом обогащении P9 Cys ранее не сообщалось, а обогащение P6 Asp согласуется только с подмножеством предыдущих отчетов 17,18,44,45 . Мы также наблюдали менее жесткое предпочтение Pro и Asn в точке P7, которая считается вспомогательной позицией якоря 46 . Хотя оставшиеся позиции считаются детерминантами связывания TCR 47 , каждое из них демонстрирует отмеченные предпочтения, такие как равномерное истощение Trp, обогащение Pro и Asp на P5, сильное истощение P2 Pro и ранее описанное предпочтение. для P2 Arg 38,41 .Каждое описанное обогащение или истощение было статистически значимым ( p <0,001, дополнительные данные 2). В целом, наш обогащенный библиотекой мотив (рис. 2d) очень напоминал мотив известных связывающих HLA-DR401 (рис. 2e), генерируемых кластеризацией ранее описанных HLA-DR401-связывающих пептидов, собранных в базе данных SYFPEITHI 31 .
Чтобы количественно оценить влияние катализатора обмена пептидов HLA-DM на наблюдаемый нами репертуар пептидов, мы повторили выборки в отсутствие HLA-DM.За исключением незначительных различий в их величинах, наблюдаемые обогащения и истощения соответствовали добавлению HLA-DM (дополнительный рис. 2D, E), предполагая, что HLA-DM выбирает для удержания высокоаффинных пептидов единообразно в каждом положении, но не сообщает уникальных позиционных предпочтений, в соответствии с предыдущими отчетами 18,48 .
Анализ пептидных мотивов, которые отклоняются от прогнозов
В то время как пептидные мотивы, которые мы наблюдали для HLA-DR401 (рис.2d) в значительной степени соответствовали тем, которые наблюдались в ранее собранных данных (рис. 2e), эти мотивы не точно соответствовали тем, которые предсказываются обычно используемыми алгоритмами прогнозирования MHC-II, основанными на анализах связывания пептидов, таких как NetMHCII 2.3 11 или IEDB. консенсус 49 , или при структурном моделировании, например TEPITOPE 50 (Таблица 1), особенно на P4 и P9 (Рис. 3a).
Таблица 1 Проверка обогащенного библиотекой HLA-DR401-связывающего мотива. Таблица пептидов либо обогащена выбранными нами рандомизированными 9-мерными библиотеками HLA-DR401, но, по прогнозам, не связывается с HLA-DR401 с помощью NetMHCII 2.3 или IEDB Consensus, или получен из вируса гриппа A и предположительно связывает HLA-DR401, но не соответствует нашему обогащенному мотиву, со значениями алгоритмического прогнозирования и значениями IC 50 , измеренными с помощью анализов поляризации флуоресценции. Рис. 3: Сравнение обогащенного библиотекой HLA-DR401-связывающего мотива с алгоритмами прогнозирования MHC-II.a Мотивы относительной энтропии Кульбака – Лейблера девяти основных аминокислот HLA-DR401-связывающих пептидов, как определено применением выбранных алгоритмов прогнозирования MHC-II к пептидам, созданным с помощью вычислений. b Диаграммы рассеяния алгоритмических предсказаний в сравнении с измеренным IC 50 с линиями наилучшего соответствия и соответствующими коэффициентами детерминации ( R 2 ). Звездочкой обозначены R 2 значения отрицательной корреляции. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.
Чтобы определить, представляют ли эти различия достоверные различия в связывании пептидов, мы идентифицировали и синтезировали пептиды, которые были обогащены нашей библиотекой, но считались несвязывающими для обоих NetMHCII 2.3 и инструмент консенсуса IEDB (предсказанный IC 50 > 1 мкМ, консенсусный рейтинг> 10 46,49 ). Мы выполнили анализ конкуренции поляризации флуоресценции с использованием рекомбинантного HLA-DR401 на выбранных пептидах, чтобы определить их значения IC 50 , которые коррелируют с их аффинностью связывания MHC 51 . Каждый протестированный пептид имел IC 50 менее 1 мкМ и связывал 14/16 сильнее, чем HA 306-318 (76 нМ), хорошо охарактеризованное высокоаффинное связывающее вещество 35,36 (таблица 1).Важно отметить, что связывание цистеин-содержащих пептидов было специфическим, поскольку два аллель-несовпадающих цистеин-содержащих пептида не проявляли связывания (дополнительная фигура 3B). Хотя это наблюдаемое сильное связывание пептидов не было предсказано устаревшими алгоритмами, такими как NetMHCII 2.3 или консенсус IEDB (рис. 3b), недавно описанные алгоритмы, которые используют полученные из масс-спектрометрии элюированные лиганды pMHC в качестве обучающих наборов данных, такие как NeonMHC2 18 и NetMHCIIpan 4.0. EL 19 , работают заметно лучше (Таблица 1), хотя и с некоторыми остающимися несоответствиями.
Мы также идентифицировали 8 пептидов, полученных из вируса гриппа A [A / Victoria / 3/75 (h4N2)], которые были предсказаны как связывающие с помощью NetMHCII 2.3 или инструмента консенсуса IEDB (IC 50 <200 нМ, консенсусный рейтинг <5 ), но не соответствовали нашему обогащенному мотиву, в основном из-за отклонений в точках P4 и P9 (таблица 1). Каждый из них имел измеренное значение IC 50 > 2 мкМ и связывание на 6/8 слабее, чем у CLIP 89-101 . NetMHCIIpan 4 также в значительной степени предсказал, что эти пептиды не связываются.0 EL и NeonMHC2 (таблица 1). В целом, было минимальное соответствие между измеренным IC 50 этих пептидов и прогнозами устаревших инструментов, таких как NetMHCII 2.3, консенсус IEDB или TEPITOPE (рис. 3b).
Эти данные подчеркивают важность высококачественных наборов данных, таких как те, которые создаются нашей платформой дрожжевого дисплея или масс-спектрометрией, для выявления пептидов, которые были бы неправильно классифицированы предыдущим поколением инструментов прогнозирования антигенов.
Предпочтения за пределами пептидного ядра влияют на связывание MHC
Канонически считается, что положения пептида с P1 по P9 образуют ядро интерфейса с канавкой для связывания пептида MHC-II 28,29 .Однако положения за пределами бороздки MHC, также известные как пептидные фланкирующие остатки (PFR), могут сильно влиять на связывание пептида 52,53,54 . В частности, модификации в положении P10 могут изменять пептид IC 50 на величину до двух порядков 53 без изменения пептидного ядра или взаимодействий TCR 47 .
Чтобы исследовать влияние положений вне бороздки на связывание пептида, мы сконструировали и выбрали рандомизированную 13-мерную библиотеку HLA-DR401.В то время как пептиды из раунда 5 не отображали изначально очевидного мотива (дополнительный рисунок 4A), деконволюция регистра с помощью кластера Гиббса 55 идентифицировала 7 различных регистров среди 15 147 уникальных пептидов (дополнительные данные 1), 3374 из которых занимали центральный регистр, где позиции P (-2) — P11 диверсифицированы (рис. 4). Позиция P10 демонстрирует умеренное предпочтение ароматических остатков, что согласуется с предыдущими выводами 53 , а также истощение как Gly, так и Glu. Мы также наблюдали истощение гидрофобных остатков и обогащение кислотных остатков в положениях P (-2) и P (-1).Позиционные предпочтения между положениями P1 и P9 согласовывались с исходной библиотекой (рис. 2b), предполагая, что на наш мотив не влияли фиксированные фланкирующие пептидные остатки в нашей первоначальной конструкции.
Рис. 4: Обнаружение предпочтений в контактах TCR и положениях вне пептидного ядра.Невзвешенные тепловые карты логарифмически-двукратного обогащения и / или позиционной процентной частоты каждой аминокислоты для всех пептидов в пятом раунде отбора рандомизированной 13-мерной библиотеки HLA-DR401, которая определена для связывания в третьем регистре пептидов ( n = 3374 уникальные пептиды).
Чтобы подтвердить эти наблюдения, мы выполнили конкурентные анализы с вариантами CII 261-273 . Примечательно, что модификация P10 до его наиболее обогащенного остатка, тирозина, приводила к 30-кратному снижению измеренного IC 50 , превращая CII 261-273 в сильное связующее (таблица 2, дополнительный рисунок 4B). Кроме того, модификация его наиболее обедненного остатка, глицина, привела к 4-кратному увеличению IC 50 . Добавленная модификация P (-2) и P11, которые находятся вне бороздки, но не считаются контактами с TCR 47 , не улучшила связывание пептида для благоприятных остатков, но способствовала потере связывания для неблагоприятных остатков.Мы наблюдали сравнимые эффекты от модификации каждого контакта TCR [P (-1), P2, P3, P5 и P8] до благоприятных или неблагоприятных остатков, а единственная модификация P2 в Pro приводила к потере любого обнаруживаемого связывания, что согласуется с его сильное истощение. Хотя NetMHCII 2.3 и недавно описанный NetMHCIIpan 4.0, как сообщается, учитывают PFR 11,19,30 , мы не наблюдали существенных изменений в прогнозируемом IC 50 , когда позиции P (-2), P10 или P11 были изменены (Таблица 2) .
Таблица 2 Влияние предпочтений в контактах и положениях TCR за пределами пептидного ядра. Таблица модифицированных пептидов CII 261-273 с соответствующими измеренными значениями IC 50 и предсказаниями выбранных алгоритмов предсказания MHC-II.Эти данные демонстрируют, что на связывание пептида сильно влияют положения вне бороздки MHC, особенно в точке P10, подчеркивая дополнительные факторы, которые могут быть исправлены наборами данных, например, созданными библиотеками, отображаемыми на дрожжах.
Применение к менее изученному аллелю HLA-DR
Среди аллелей MHC-II человека хорошо изучен HLA-DR401, более 5000 пептидов хранятся в базе данных иммунных эпитопов (IEDB) 26 . Тем не менее, многие аллели имеют мало связующих веществ или вообще не имеют их. Поэтому мы попытались применить нашу платформу к одному из таких аллелей, HLA-DR402 (HLA-DRA1 * 01: 01, HLA-DRB1 * 04: 02), который отличается от HLA-DR401 четырьмя аминокислотами (рис. 5a), но все же имеет только 256 пептидов, курируемых в IEDB, многие из которых являются неуникальными вложенными наборами и вариантами одной аминокислоты родительской последовательности 26,31 .
Рис. 5: Выбор, анализ и проверка библиотеки HLA-DR402.a Структура HLA-DR401 в комплексе с HA 306-308 (PDB 1J8H), выделяющая полиморфизмы HLA-DR402 (красный) и полиморфизм-проксимальные положения пептида (синий) с соответствующим выравниванием последовательностей. b Невзвешенные тепловые карты позиционной процентной частоты и log2-кратного обогащения каждой аминокислоты в раунде 5 отбора рандомизированной 9-мерной библиотеки HLA-DR402 ( n = 7 692 уникальных пептида). c , d Мотивы относительной энтропии Кульбака-Лейблера девяти основных аминокислот HLA-DR402-связывающих пептидов, определяемые либо эмпирически из нашей библиотеки дрожжевого дисплея, либо в каждом из двух кластеров, обнаруженных в нашей библиотеке. e Аминокислоты значительно ( p <0,05) больше представлены в каждом положении в пределах девяти основных аминокислот HLA-DR402-связывающих пептидов между кластерами. Отображаемый размер остатков коррелирует со статистической значимостью отклонения, и значимость определялась двусторонним невзвешенным биномиальным тестом для p <0.05, с поправкой Бонферрони для проверки множественных гипотез. f Диаграммы рассеяния алгоритмических предсказаний в сравнении с измеренным IC 50 с линиями наилучшего соответствия и соответствующими коэффициентами детерминации ( R 2 ). Звездочкой обозначены R 2 значения отрицательной корреляции. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.
Наша конструкция HLA-DR402, отображаемая на дрожжах, была подтверждена на предмет ее способности специфически удерживать ранее описанные связывающие пептиды 44,56,57,58,59,60 (дополнительный рис.5A), и была сконструирована, отобрана и проанализирована рандомизированная 9-мерная библиотека HLA-DR402. В то время как прогнозируемая аффинность обогащенных пептидов увеличивалась на протяжении всего отбора, окончательная доля прогнозируемых связывающих веществ была низкой (27%), что свидетельствует о большом расхождении между нашей обогащенной библиотекой и алгоритмами прогнозирования (дополнительный рис. 5B). Последовательности из 5 раунда отбора снова выявили сильно обогащенный мотив (фиг. 5b) с 7 692 уникальными пептидами в ожидаемом регистре (дополнительные данные 1).
В соответствии с расположением и природой полиморфизмов HLA-DR402 (рис.5a), предпочтения остатков в положениях пептида P2, P3, P6, P8 и P9 отражают таковые для HLA-DR401, но заметно отличаются в положениях P1, P4, P5 и P7 (рис. 5b, c). В частности, усеченный карман P1 способствует более мелким гидрофобным остаткам; P4 поддерживает основные остатки и большие гидрофобные остатки Trp и Met; P5 поддерживает Pro, а также основные остатки; и P7 отдает предпочтение основным остаткам, что согласуется с консенсусом из предыдущих отчетов 38,44,45,57,61,62,63,64 . Дальнейший анализ показал, что обогащенные последовательности представляют собой два уникальных мотива (рис.5d): первый, традиционный мотив HLA-DR с сильными предпочтениями в позициях якоря MHC P1, P4, P6 и P9; второй, нетрадиционный мотив, в котором преобладают гидрофобные остатки в P4, и значительно ( p <0,05) меньше зависит от гидрофобных остатков в P1, но больше зависит от P5 Pro (Fig. 5e).
Наш расширенный мотив снова отличался от мотивов, сгенерированных устаревшими алгоритмами прогнозирования (дополнительный рисунок 5C), которые отражают усечение кармана P1 и согласованные предпочтения на P6, но при этом увеличивают неопределенность на P9.Кроме того, недостаток данных по обучению курируемых пептидов для этого аллеля приводит к неубедительному мотиву для NetMHCII 2.3. Наш обогащенный мотив был подтвержден конкурентными анализами, которые подтвердили, что пептиды, обогащенные библиотекой 16/16 (измеренные IC 50 <150 нМ), не были предсказаны как связывающие HLA-DR402 как NetMHCIIpan 3.2, так и TEPITOPE (дополнительная таблица 1, дополнительный рис. 5D). Эти пептиды были получены из обоих кластеров в пределах наших данных, поддерживая каждый мотив. Мы также идентифицировали 8 пептидов, полученных из вируса гриппа A, и предположили, что оба NetMHCIIpan 3 обладают сильным связыванием.2 и ТЕПИТОП, которые не соответствовали нашему общему обогащенному мотиву. Интересно, что только 3/8 оказались слабыми или несвязывающими (IC 50 > 500 нМ), возможно, из-за усреднения двух перекрывающихся мотивов в наших данных. Примечательно, что прогнозы устаревших алгоритмов не показали корреляции с измеренным IC 50 (рис. 5f). Однако многие из этих недостатков были исправлены с помощью недавно описанных алгоритмов, в которых в качестве обучающих наборов используются элюированные лиганды pMHC, полученные из масс-спектрометрии, такие как NeonMHC2 и NetMHCIIpan 4.0 EL (дополнительная таблица 1).
Эти результаты демонстрируют, что наша платформа может генерировать большие объемы высококачественных обучающих данных даже для аллелей, для которых нет аллель-специфических реагентов для проверки свертки и функции. Кроме того, было обнаружено, что аллели HLA-DR могут связывать пептиды в нескольких различных пептидных мотивах, включая нетрадиционные мотивы, и могут вносить неточности в алгоритмы, которые перевешивают гидрофобные предпочтения в положении P1.
Бенчмаркинг производительности обученных алгоритмов дрожжевого дисплея
Мы предположили, что данные о связывании пептидов, полученные из дрожжевого дисплея, можно использовать для улучшения алгоритмического прогнозирования связывания MHC.Чтобы обратиться к этой гипотезе, мы обучили алгоритмы прогнозирования с помощью данных нашей библиотеки, отображаемой дрожжами, с использованием NN-Align, архитектуры, лежащей в основе NetMHCII и NetMHCIIpan 64 , что облегчило прямое сравнение эффекта обучающих данных с эффектом архитектуры алгоритма прогнозирования. Алгоритмы, обученные на данных дрожжевого дисплея, показали хорошую корреляцию с описанными выше измеренными значениями IC 50 (дополнительный рисунок 6A, B) и правильно классифицировали 24/24 ранее измеренных пептидов HLA-DR401 и 21/24 HLA. Пептиды -DR402 как связывающие или несвязывающие (ранг <10% и измеренный IC 50 <1 мкМ, или ранг> 10% и измеренный IC 50 > 1 мкМ, соответственно).Кроме того, в соответствии с эффектом фланкирующих пептид остатков на связывание, обучение на 13-членных данных дрожжевого дисплея HLA-DR401 привело к улучшенной корреляции с измеренным IC 50 для вариантных пептидов CII 261-273 по сравнению с обучением на 9mer или в NetMHCII 2.3 (дополнительный рис. 6C).
Далее мы приступили к всестороннему тестированию прогностической производительности нашего алгоритма по сравнению с большим набором других описанных подходов. Мы определили два набора данных о связывании пептидов для каждого аллеля, которые не были представлены в большинстве текущих наборов данных для обучения прогнозированию 18,44 , что облегчило независимую оценку.Эти наборы данных были получены с помощью моноаллельной масс-спектрометрии (МС) с элюированным лигандом, полученной из антигенпрезентирующих клеток, которые экспрессируют только один аллель MHC-II, что устраняет неоднозначность в присвоении аллелей, встречающуюся в обычных наборах данных лигандов с полиаллельным элюированием MS 14, 27 . Этот метод недавно был использован для получения высококачественных данных для многих аллелей MHC-I и MHC-II 14,15,18,44 . Хотя эти наборы данных более чем на порядок меньше, чем те, которые были получены с помощью дрожжевого дисплея, с точки зрения уникальных пептидных ядер (дополнительные данные 1, дополнительный рис.7), их мотивы в значительной степени согласуются с дрожжевым дисплеем, за исключением P9 Cys и отсутствия двух отдельных мотивов для HLA-DR402. Поскольку один из этих наборов данных 18 лежит в основе недавно опубликованного алгоритма прогнозирования MHC-II NeonMHC2, мы сгенерировали дополнительный алгоритм прогнозирования на основе этих данных — снова с использованием NN-Align — для обеспечения дальнейшего сравнения влияния обучающих данных по сравнению с базовой алгоритмической архитектурой. .
Каждый алгоритм был применен к оставшемуся набору аллель-сопоставленных данных 44 с пептидами-ловушками, совпадающими по длине и экспрессии, для определения двух показателей прогностической эффективности: площади под кривой рабочих характеристик приемника (AUC) и положительной прогностическая ценность (PPV).В то время как модели, обученные дрожжевым дисплеем MS- и 9-мерного дисплея, работали сравнимо друг с другом, общая прогностическая эффективность каждого алгоритма была изначально относительно низкой с максимальной AUC 0,81 (дополнительный рисунок 8A), что свидетельствует о несоответствии между обучением и тестированием. оценочные наборы. Неконтролируемая кластеризация каждого набора оценок, полученных из MS, с кластером Гиббса 55 показала, что значительная часть каждого набора (26% для HLA-DR401, 19% для HLA-DR402) была выбросами (дополнительные данные 1), включая пептиды с длинными участки Gly или Pro, о которых ранее сообщалось, что они неспецифически попадают в наборы данных элюированных лигандов 65 .
Удаление этих выбросов дало повсеместно улучшенные характеристики прогнозирования (рис. 6a). Для обоих аллелей алгоритмы, обученные MS-дисплею и дрожжевому дисплею, сравнительно показали AUC (0,92–0,94) и превзошли NetMHCII 2.3 и NetMHCIIpan 3.2, которые также построены на NN-Align. Это превосходство было более выражено в PPV: алгоритм, обученный дрожжевому дисплею, достиг 67% PPV для HLA-DR401. Хотя недавно выпущенный NetMHCIIpan 4.0 EL 19 значительно превзошел своих предшественников, его обучающий набор включал наш оценочный набор, и поэтому этот алгоритм нельзя было оценить справедливо.NeonMHC2 продемонстрировал высокие показатели для обоих аллелей через AUC (0,96–0,97) и PPV (64–69%). Поскольку NeonMHC2 построен на тех же базовых данных, что и алгоритмы, обученные MS, его улучшенная производительность может быть связана с включением информации о процессинге пептидов, такой как предпочтения по расщеплению пептидов 18 . Кроме того, недавно описанный MixMHC2Pred 14 , который обучен на данных МС с обычным полиаллельным элюированным лигандом, показал сопоставимые с NeonMHC2 характеристики на подмножестве пептидов HLA-DR401 (дополнительный рис.8B), но не удалось полностью сравнить из-за ограничений длины пептида и отсутствия предиктора HLA-DR402. Все оцененные алгоритмы превзошли другой недавно выпущенный алгоритм, обученный MS с полиаллельным элюированным лигандом, MARIA 16 .
Рис. 6: Бенчмаркинг производительности алгоритмов, обученных дрожжевому дисплею.Кривые рабочих характеристик приемника (ROC) для прогнозирования с помощью существующих алгоритмов прогнозирования или алгоритмов, обученных на нашей 9-мерной библиотеке дрожжевого дисплея (обученной YD) или данных моноаллельной масс-спектрометрии с элюированным лигандом (обученная MS), на любом из a — данные MS-данных элюированного лиганда с удаленным выбросом для HLA-DR401 и -DR402, с подобранными по экспрессии ложными пептидами, или b — данные библиотеки 13-мерного HLA-DR401 для дрожжевого дисплея с наивными библиотечными ложными объектами.Для каждого набора данных показаны площадь под кривой ROC (AUC) и положительная прогностическая ценность (PPV) каждого прогноза. Звездочками обозначены алгоритмы, которые содержат набор оценок в своих обучающих данных. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.
Важно, однако, что использование набора тестов, полученных из MS, для оценки прогностической эффективности может не полностью улавливать ложноотрицательные результаты, которые могут возникнуть из-за пробелов в данных, полученных из MS, например, возникающих из-за систематической недостаточной выборки цистеин-содержащих пептиды 18,44 .Поэтому мы дополнительно оценили прогностическую эффективность каждого алгоритма на данных нашей 13мерной библиотеки HLA-DR401. Мы наблюдали сравнимую производительность между NetMHCII 2.3, NetMHCIIpan 3.2, NetMHCIIpan 4.0 EL и алгоритмом NN-align, обученным MS (AUC 0,79–0,82, PPV 27–30%) (рис. 5b). NeonMHC2 немного уступал своему аналогу на основе NN-Align, даже несмотря на то, что он использовался в «режиме мозаики», который игнорирует предпочтения пептидного расщепления, что дополнительно предполагает, что включение предпочтений пептидного расщепления лежит в основе его ранее отмеченного превосходства над данными, полученными при МС.Модель, обученная дрожжевому дисплею, явно превзошла каждый альтернативный алгоритм с AUC 0,92 и PPV 55%, а эффективность прогнозирования лишь минимально улучшилась за счет удаления посторонних пептидов (дополнительный рисунок 8C).
В целом, алгоритм, обученный дрожжевому дисплею, работал сравнимо с современными подходами, такими как NeonMHC2 и NetMHCIIpan 4.0, на данных, полученных с помощью MS, при этом лучше работал с данными, полученными с дрожжевого дисплея. Эти результаты предполагают присутствие истинных пептидных мотивов в данных дрожжевого дисплея, которые не были адекватно отобраны в данных, полученных с помощью МС.Прямое сравнение алгоритмов, обученных MS- и дрожжевому дисплею, на позиционном уровне выявило значительно ( p <0,05) более строгое предпочтение P9 в алгоритме, обученном дрожжевому дисплею для обоих аллелей (дополнительный рис. 7B). Кроме того, в соответствии с его недостаточной представленностью в данных, полученных из MS, Cys был значительно пере- или недопредставлен в нескольких положениях, а алгоритмы, обученные MS, имели большее предпочтение для небольших гидрофобных остатков Ile, Leu и Val в нескольких положениях.
Обученные алгоритмы дрожжевого дисплея улучшают прогнозирование антигена
Чтобы исследовать влияние этих различий на прогнозирование клинически значимых пептидов, мы выполнили прогнозирование антигена для HLA-DR401 с помощью NeonMHC2 и алгоритма 9-мерного дрожжевого дисплея на двух наборах данных: протеом вируса гриппа A (IAV) и подтвержденные по экспрессии мутации от пациентов с аденокарциномой легких человека 66 . На основе этих наборов данных 9-мерная модель, обученная дрожжевому дисплею, дифференцированно классифицировала — относительно пептидов, полученных из NeonMHC2-5 IAV, как сильные или несвязывающие, и дифференцированно классифицировала 13 пептидов, полученных из аденокарциномы, как потенциальных неоантигенов рака.Интересно, что эти алгоритмы отображали неперекрывающиеся алгоритмические промахи (дополнительная таблица 2, дополнительный рисунок 9), предполагая, что существуют пептидные мотивы, уникальные для данных обучения, полученных как на MS-, так и на дрожжевом дисплее, которые способствуют повышению производительности прогнозирования пептидов.
Когда все 55 пептидов, проанализированных на связывание с HLA-DR401 в этом исследовании, были рассмотрены, текущие алгоритмы с элюированным лигандом, обученные MS NeonMHC2, NetMHCIIpan4.0 EL, MARIA, и наша собственная обученная модель MS показали незначительную корреляцию с измеренным IC 50 ( R 2 = 0.08-0.19), что указывает на низкую эффективность прогнозирования пептидного сродства (фиг. 7). Кроме того, NetMHCIIpan 4.0 BA, который обучен исключительно на данных по аффинности связывания пептидов 19 , не смог показать корреляцию с измеренным IC 50 для этих пептидов ( R 2 = 0,01). Однако наш 9-мерный дрожжевой дисплей Алгоритм обученной модели показал заметно улучшенную корреляцию с измеренным IC 50 ( R 2 = 0,47), и в соответствии с нашими выводами о фланкирующих остатках пептидов, предсказания 13-членной модели, обученной дрожжевому дисплею, показали еще большую корреляцию R 2 = 0.62). Эти результаты подтвердились, когда каждый прогноз был преобразован в процентный ранг (дополнительный рисунок 10).
Рис. 7: Тестирование производительности алгоритма MHC-II для прогнозирования аффинности связывания пептида.Диаграммы рассеяния алгоритмических прогнозов в сравнении с измеренными значениями IC 50 для 55 пептидов, проанализированных на связывание с HLA-DR401 в анализах конкуренции поляризации флуоресценции, с линиями наилучшего соответствия и соответствующими коэффициентами детерминации ( R 2 ).Звездочкой обозначены R 2 значения отрицательной корреляции. Исходные данные представлены в виде файла исходных данных.
В целом, наши результаты продемонстрировали, что наборы данных как элюированных лигандов MS-, так и пептидов, полученных из дрожжевого дисплея, улучшили производительность алгоритмов прогнозирования MHC-II по сравнению с устаревшими наборами данных, и оба идентифицировали уникальные пептидные мотивы. Однако мы обнаружили, что дрожжевой дисплей предоставил гораздо большие наборы данных, чем элюированный лиганд MS, и обеспечил заметно улучшенные характеристики в прогнозировании пептидного сродства.
Powerball — Играйте и проверяйте выигрышные числа
Powerball будет улучшена в августе 2021 года! По мере того, как мы готовимся к этим изменениям, возможности многоабонентского розыгрыша, будущей игры и автоматического продления для Powerball будут ограничены онлайн и в розницу.
Мощные джекпоты — это много веселья.
Если вам нравится играть на крупные денежные призы, то Powerball — это игра для вас! Powerball может сделать вас следующим мультимиллионером, и есть несколько разных способов играть.
Как играть в Powerball
После розыгрыша 8 апреля 2020 года гарантированные начальные суммы джекпота и минимальное увеличение джекпота будут отменены, а будущие увеличения джекпота будут определены и объявлены группой продуктов перед каждым розыгрышем. количество. Больше информации здесь.
Подумайте, как играть в Powerball, используя цвета и числа. Вы должны выбрать числа для пяти белых шаров и одного красного шара (Powerball), всего шесть чисел.Щелкните для более детального просмотра игрового листа, чтобы узнать больше.
Вот способы играть в Powerball:
- Выберите свои собственные числа на листке. Выберите пять разных чисел от 1 до 69; затем выберите один номер Powerball от 1 до 26.
- Или вы можете выбрать Easy Pick и позволить компьютеру выбирать ваши числа
- Вы также можете использовать комбинацию этих методов игры: выберите несколько ваших любимых чисел и позвольте компьютеру подставить остальные.
- Каждая игра (шесть чисел) стоит 2 доллара. Розыгрыши
- Powerball проводятся каждую среду и субботу в 23:00.
Сделайте игру еще более яркой с Power Play
®Power Play® — это дополнительная функция, которая позволяет выиграть еще больше денег всего за 1 доллар за игру. Power Play® может увеличить ваш выигрыш до 2 миллионов долларов! Если вы выиграете с помощью Power Play®, ваш приз без джекпота увеличивается в 2, 3, 4, 5 или 10 раз в зависимости от номера Power Play®, выпавшего в розыгрыше. Ознакомьтесь с таблицей выше, чтобы увидеть, как добавление Power Play® увеличивает любой приз, кроме джекпота.Добавьте Power Play® и угадайте пять чисел без Powerball, и вы автоматически выиграете 2 миллиона долларов!
Победа в игре Powerball
Есть девять способов выиграть в Powerball, и вот несколько:
- Если вы угадаете только номер Powerball, вы можете выиграть минимум 4 доллара.
- Угадайте первые пять чисел, и вы выиграете 1 миллион долларов.
- Угадайте все пять чисел и число Powerball, и вы получите джекпот Powerball!
Два шанса на победу в неделю
Вы можете играть в Powerball дважды в неделю! Розыгрыши Powerball проводятся каждую среду и субботу в 11 p.м.
- Мы прекращаем продажу билетов Powerball в 22:00. в розыгрыши, так что покупайте билеты пораньше!
- Билеты на Powerball Вирджиния не могут быть отменены, и все продажи окончательны. Мы рекомендуем использовать игровой лист, чтобы убедиться, что ваши числа верны.
- При использовании дополнительных розыгрышей не забудьте сообщить своему клерку, какой вариант (ы) вы предпочитаете — Multi-Draw, Future или Repeat.
- Любые выигрышные билеты, купленные в Вирджинии, должны быть погашены в Вирджинии.
Параметры зазоров
Всегда здорово иметь варианты, поэтому отметьте поле ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ИГРЫ на своем игровом листе для любого из следующего.
- Хотите разыграть одни и те же числа в нескольких розыгрышах одного билета? Билет с несколькими розыгрышами позволяет вам сыграть до 26 розыгрышей подряд на одном билете. Помните, что цена билета увеличивается с каждым добавляемым вами розыгрышем.
- Думаете о особой дате? Вы можете купить билет на одну дату розыгрыша в будущем. Это называется розыгрышем будущего. Отметьте поле «Необязательные игры» на своем игровом листе и сообщите секретарю, какую дату розыгрыша вы планируете в будущем.
- Вам так нравятся эти числа, что вы хотите, чтобы они присутствовали более чем на одном билете? Вы можете повторить игру и напечатать одни и те же числа на нескольких билетах до 20 раз.
- Сообщите своему клерку, какой вариант вы хотите, когда представляете свой листок. Имейте в виду, что игра в более чем один розыгрыш увеличивает цену билета на количество розыгрышей, которое вы выберете.
Вы можете найти различные розничные точки VA Lottery Powerball в приложении Virginia Lottery или с помощью инструмента «Найти продавца». Загрузите приложение, чтобы сканировать свои невыигрышные билеты, а также посмотрите наши новейшие скретчеры!
Покупайте онлайн и никогда не пропустите розыгрыши!
Вы можете покупать и играть в Powerball в любое время и в любом месте в Вирджинии на своем мобильном телефоне, планшете или компьютере.Купите сразу несколько розыгрышей, чтобы оставаться в игре столько, сколько захотите, и выберите функцию автоматического продления, чтобы не беспокоиться о том, что вы пропустите розыгрыш.
Посмотреть розыгрыш
Вы можете смотреть розыгрыши Powerball в прямом эфире каждую среду и субботу в 23:00. щелкнув вкладку «Выигрышные числа» вверху страницы. Вы даже можете посмотреть их позже. Розыгрыши остаются на нашем сайте!
Получите информацию об игре от Alexa!
Если вы загрузите навык Alexa Lottery в Вирджинии, вы можете запросить у Alexa информацию об этой игре, включая недавние выигрышные номера и многое другое.
Юридические вопросы
После розыгрыша 8 апреля 2020 года гарантированные начальные суммы джекпота и минимальное увеличение джекпота будут отменены, а будущие увеличения джекпота будут определены и объявлены Группой продуктов перед каждым розыгрышем.
Нужна дополнительная информация? Вот наши официальные правила Powerball.